168188. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7béta-amino-cefém-3-on- 4-karbonsav-származékok előállítására
168188 „ 21 22 között, és így az ismert VIII általános képletű 3-cefem-vegyületeket kapjuk, mely képletben Rx2, és R2 a fentiekben megadott, és melyekben ezeket a csoportokat önmagában ismert módszerekkel egymásba átalakíthatjuk. A VIII általános képletű vegyületek vagy gyógyászati, főleg antimikróbás tulajdonságokkal rendelkeznek, elsősorban azok, melyekben R2a egy gyógyászatilag aktív 60-amino-penam-3-karbonsav- vagy 7j3-amino-3-cefem4-karbonsav-N-acilszármazékban előforduló acilcsoport, és R2 hidroxilcsoportot, vagy a karbonilcsoporttal együtt fiziológiás körülmények között könnyen hasítható karboxilcsoportot alkotó éterezett hidroxilcsoportot jelent, illetve e vegyületek sói, vagy közbenső termékként használhatók más, gyógyászati hatású vegyületek előállítása során. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeknek a fentiekben leírt, IV, V, illetve VIII általános képletű vegyületekké történő átalakításánál az I általános képletű vegyületet nem szükséges izolálni, azokat a II általános képletű vegyületekből történő előállításuk során keletkezett nyers reakcióelegyként közvetlenül is átalakíthatjuk a VI, VII és VIII általános képletű vegyületekké. Az eddigiek során a leírásban „rövidszénláncú"-ként feltüntetett szerves csoportok legfeljebb 7, előnyösen 1-4 szénatomot tartalmaznak az acilcsoportok legfeljebb 20, előnyösen legfeljebb 12 szénatomot tartalmaznak. A csatolt rajzokon az egyes szubsztituensek kötését jelentő hullámos vonal azt jelenti, hogy ezen szubsztituensek mind a-, mind 0-helyzetben kapcsolódhatnak. A telítetlen gyűrűkben a szaggatott vonal azt jelenti, hogy a kettős kötés vagy egyik vagy másik helyzetbe van eltolva. A következő példák során a találmányt részletesebben ismertetjük. A hőmérsékleti értékeket Celsius fokokban adjuk meg. 1. példa 0,50 g 3-metilén-7/?-fenilacetilamino-cefam4a-karbonsav-difenilmetilészter 100 ml metanollal készített oldatát —70° hőmérsékleten 6,5 percen át oxigén-ózon-gázárammal kezeljük, mely 0,175 mmól ózont juttat az elegybe percenként. A reakcióelegyhez 0,5 ml dimetilszulfidot adunk és a reakcióelegyet 1 órán át —70°-on, majd 2 órán át szobahőmérsékleten kezeljük és ezután szárazra pároljuk. A maradékot metilénkloridos oldataként 15 g szilikagélen kromatografáljuk. Metilénkloriddal az amorf 7/3-fenilacetilamino-cefam-3-on-4£-karbonsav-difenilmetilésztert eluáljuk. Kitermelés: 0,31 g. Vékonyrétegkromatográfia (szilikagélen): Rf = 0,47, toluol-aceton-metanol-ecetsav 82 : 10 : 5 : 5 rendszerben. IR-abszorpciós spektrum (metilénkloridban): jellemző sávok 2,95, 5,61, 5,77, 5,85, 5,95, 6,21 és 6,87 ju-nál, a vegyület pozitív vas-III-klorid reakciót mutat, amely az enol-forma jelenlétét igazolja. 10% acetont tartalmazó metilénkloriddal egy polárosabb vegyület eluálható, mely valószínűleg a 7 ß -f e n il acetilamino-cefam-3-on-4£-karbonsav-difenilmetilészter-1-oxid. Vékonyrétegkromatogram (szilikagélen): Rf=0,22 toluol-aceton-metanol-ecetsav 80 :10 : 5 : 5 rendszerben, IR-spektrum (metilénkloridban): jellemző sávok 2,96, 5,58, 5,76 (váll), 5,83, 5,97, 6,22 és 6,61 ju-nál, a vegyület pozitív 5 vas-III-klorid reakciót mutat, amely az enol-forma jelenlétét igazolja. A kiindulási anyagot a következőképpen állíthatjuk elő: !0 11,87 g nyers 3-hidroximetil-7|3-fenilacetilamino-3-cefem4-karbonsav-nátriumsó (melyet a 3-acetiloximetil-7/?-fenilacetilamino-3-cefem4-karbonsav-nátriumsójának Bacillus subtilis ATCC 6633 tisztított enzim extraktumával végzett enzimes dezacetile-15 zésével, majd a reakcióelegy liofilizálásával állítottuk elő) 200 ml vízzel készített oldatára 400 ml etilacetátot rétegzünk és tömény vizes foszforsawal pH = 2 értékre savanyítjuk. A vizes fázist elválasztjuk és kétszer 150-150 ml etilacetáttal utána 20 extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat négyszer 50-50 ml vízzel mossuk, magnéziumszulfát felett szárítjuk, majd kb. 400 ml-re pároljuk be. Az oldathoz difenildiazometán felesleget adunk, az oldatot 3 órán át szobahőmérsékleten állni 25 hagyjuk, majd a kristályos csapadékot leszűrjük. A szürletet kb. 200 ml-fe pároljuk be, melegen ciklohexánt adunk hozzá, majd szobahőmérsékletre történt lehűtés után egy ideig 4° körüli hőmérsékleten állni hagyjuk. A csapadékot leszűrjük és 30 aceton és ciklohexán elegyéből átkristályosítjuk, az így keletkezett 3-hidroximetil-7j8-fenilacetilamino-3--cefem-4-karbonsav-difenilmetilészter 176— 176,5° -on (korrigálatlan) olvad, [a]l° = -6° ± 1° (c- 1,231, kloroformban), vékonyrétegkromatogram (szilika-35 gélen előhívás jódgőzzel vagy X254 m ^hullámhosszú UV-fénnyel): Rf=0,42, kloroform-aceton 4:1 rendszerben, Rf = 0,43, toluol-aceton 2 : 1 rendszerben és Rf = 0,41, metilénklorid-aceton 6:1 rendszerben. 40 1,03 g 3-hidroximetil-7/3-fenilacetilamino-3-cefem-4-karbonsav-difenilmetilésztert és 1,05 g N-metil-N.N'-diciklohexilkarbodiimidiumjodidot nitrogénatmoszférában 25 ml abszolút tetrahidrofuránban oldunk, majd az oldatot 1 órán át 35°-on mele-45 gítjük. Ezután ismét 1,05 g N-metil-N,N'-diciklohexilkarbodiimidiumjodid 15 ml abszolút tetrahidrofurános oldatát adjuk hozzá, és a reakcióelegyet 17 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A reakcióelegyet forgó bepárlón csökkentett 50 nyomáson szárazra .pároljuk, a maradékot metilénkloridban felvesszük és 50 g szilikagéllel töltött oszlopon (adalék 10% desztillált víz) szűrjük, ezután az oszlopot négyszer 100-100 ml metilénkloriddal utánamossuk. Az eluátumot kistérfogatra 55 pároljuk be és 90 g szilikagéllel (10% desztillált vízzel dezaktiválva) töltött oszlopon kromatografáljuk. összesen 900 ml 3 :7 arányú toluol-metilénklorid eleggyel a nem poláros szennyezéseket eluáljuk. Kétszer 200 ml metilénkloriddal eluálva 60 kapjuk a 3-jódmetil-7j3-fenilacetilamino-3-cefem4--karbonsav-difenilmetilésztert, a vékonyrétegkromatográfiásan egységes frakciókat benzolból liofilizáljuk. IR-abszorpciós spektrum (metilénkloridban): jellemző sávok 3,00, 5,62, 5,82, 5,95, 6,70, 7,32 65 és 8,16 ju-nál. 11
