168127. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tiszta szérumalbumin biológiai folyadékokból történő izolálására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1973. VIII. 22. (TE-734) Közzététel napja: 1975. IX. 27. Megjelent: 1977. II. 28. 168127 Nemzetközi osztályozás: C 07 g 7/00 r^.»siäÄrjz^ I ü I a ! ä o n Feltatálók: IVANOV Mihail Ivanovics, orvos, Moszkva, FROM Anatolij Alekszandrovics, orvos, Moszkva, KISZELEV Anatolij Eflmovics, orvos, Moszkva, NIKITENKO Alekszandr Alekszandrovics, orvos, Petrovo-Dalnee, RUSZANOV Valentin Mihailovics, orvos, Moszkva, SZKOBELEV Leonid Ivanovics, orvos, Moszkva, Szovjetunió Tulajdonos: Central'nüj Ordena Lenina Insztitut Gematologü i Perelivania Krovi, Moszkva, Szovjetunió Eljárás tiszta szérumalbumin biológiai folyadékokból történő izolálására 1 A találmány fehérjék frakcionálására vonatkozik, különösen tiszta szérumalbumin biológiai folyadékokból történő izolálására. Az albumint 5-20%-os koncentrációjú oldatként széles körben alkalmazzák a gyógyászatban, így 5 vérátömlesztésnél, traumatikus égési- és operációs sokknál, kollapszus és más vérkeringési zavarok esetén, valamint a parenterális tápláláshoz. Az albumint laboratóriumi célokra is felhasználják. Az állati szérum albumintartalmát különböző ipar- IQ ágak hasznosítják. A 2469193 számú USA szabadalmi leírásból ismert eljárás albumin izolálására biológiai folyadékokból pl. donor-vérplazmából és szérumból fehérjének etilalkohollal történő frakdonálásán alapul. Az is eljárással lehetővé válik az albumin jó hozammal és 98%-os tisztasági fokkal elektroforézis útján történő izolálása. Ezenkívül az albumin mellett más értékes fehérjéket is kinyernek. Az eljárást 0 C°-nál alacsonyabb hőmérsékleten 20 kivitelezik. Az egyes fehérjefrakdó kicsapása az oldatban az alkoholkoncentrádő, a pH-érték és az ionerősség többszöri változtatásával történik; a kicsapott fehérjéket egymás után leválasztják. 25 Hátrányként megemlítjük, hogy az eljárás több lépcsős és igen munkaigényes. A vérplazma és szérum albumintartalmát egy másik eljárás szerint éterrel izolálják. Az eljárás az alkoholos eljáráshoz képest nem előnyös, sőt robba- 30 nás- és mérgezési veszély miatt alkalmazása korlátozott (Kekwich K.A., Medical research consil. Special reports. London, 286, 1954) Cohn E. a J. Am. Chem. Soc. 62, 3386 (1940) irodalmi helyen olyan eljárást ismertet, amelynél az albumint közömbös szerves sókkal izolálják. Az eljárás lényege, hogy az egyes fehérjefrakciókat kicsapják és különböző sókoncentrációk hatására az oldatból elkülönítik. Az eljárás fő hátránya, hogy a felgyülemlett sómennyiséget nehéz eltávolítani a fehérjetartalmú oldatból. Egy másik eljárás szerint (Horejsi J., Smetana P., Acta med. Scand., 155, 165, 1956) a vérplazma albumintartalmának izolálását RivanoUal végzik. A Rivanol specifikusan kötődik a fehérjékhez és ezáltal az albumin és az alfa- és beta-globulin egy része kicsapódik. A Rivanol-eljárással azonban igen nehéz tiszta albumint előállítani. Ezenkívül a Rivanol-oldattal történő kicsapás a munka volumenét nemkívánatos módon növeli. Az ismertetett eljárásokkal csak teljes értékű donor-vérplazmából és-szérumból lehet az albumint kinyerni. Vannak azonban olyan nyersanyagforrások, amelyek volumene meghaladja a donor-vérplazma mennyiségét. Ilyenek például a placentavér- és abortusz során keletkező vérszérum, placenta-extraktum, amelyekből az ismert eljárásokkal nem lehet tiszta albumint kinyerni. A kiindulási anyagok ugyanis szöveti fehérjékkel valamint nem fehérjeszerkezetű 168127 1