167919. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az A-25822 jelű antibiotikum- komplex komponensei előállítására
5 167919 6 Az N komponens elemanalízisének adatai: C: 82,09%, H: 10,58, N: 3,42%. Fajlagos forgatóképessége [u]2 £ = -14° (c = 0,05, MeOH). Az N komponens 66%-os DMF-ban kivitelezett elektrometrikus titrálási adatai szerint egy, 7,45-ös pK-értékkel jellemezhető titrálható csoportot tartalmaz. Az N vegyület infravörös abszorpciós spektrumában (7. ábra) a következő hullámhosszakon látszik elnyelési maximum: 3,40, 3,50, 5,88, 6,20, 6,85, 7,28,8,15-8,38,9,35 és 11,25 mikron. Ultraibolya spektrumában Xmax = 240 m/u (semleges és lúgos oldatban), X,,,^ = 280 m/u (savas oldatban). Az A, B komponens, ül. az A és B acetátszármazékának szerkezetét meghatároztuk és az I általános képletben adjuk meg, ahol R1 és R 2 hidrogénatomok vagy metilcsoportok, és ahol R3 hidroxil- vagy acetoxicsoport. A B komponenst kapjuk, ha R1 és R 2 hidrogénatomok és R3 hidroxilcsoport. A B acetátszármazéka, az M komponens, a fermentáció során a B-vel együtt keletkezik. Az M-vegyület esetében az I általános képletben R1 és R 2 hidrogénatomok és R 3 acetoxicsoport. Ha az I általános képletben R1 és R 2 metilcsoportok és R3 hidroxilcsoport, úgy az A vegyületet kapjuk. Az A komponens acetátszármazékát (R1 és R 2 metil-, R 3 acetoxicsoport) úgy állítjuk elő, hogy az A vegyületet piridinben ecetsavanhidriddel reagáltatjuk. Az M komponenst szintén előállíthatjuk a B-ből, ha ez utóbbit piridinben ecetsavanhidriddel reagáltatjuk. Az I általános képletben az atomok közötti szaggatott vonalak a-konfigurációt, míg a folyamatos vonalak a két, angularis metilcsoport és a hidroxil- vagy acetoxicsoportok esetén ^-konfigurációt jelölik. Az A 25822 fentebb ismertetett egyes összetevőit az elfogadott szteroid-nevezéktan szabályai szerint elneveztük. A szénatomok számozásának sorrendjét a II általános képleten mutatjuk be. Eszerint az A komponens 3/3-hidroxi-24-metilén-14a-aza-D-homo-4,4-dimetil-5-a-koleszt-8(9),14(14a)dién. Az A komponens acetátszármazéka így 30-acetoxi-24-metilén-14a-aza-D-homo-4,4-dimetil-5a-kolesz-8-(9),14(14a)-dién. A B komponenst 3|3-hidroxil-24-metilén-14a-aza-D-homo-5a-koleszt-8(9),14(14a)-diénnek, míg az M vegyül etet 30-acetoxi-24-metilén-14a-aza-D-homo-5akoleszt-8(9),14(14a)-diénnek nevezzük. Az A 25822 csoportba tartozó antibiotikumok közül az N jelű szerkezetét is meghatároztuk és a III képletben mutatjuk be, neve 24-metilén-14a-aza-D-homo-5a-koleszt-8(9), 14(14a)-dién-3-on. Az A 25822 antibiotikumkeverék A, B, M és N komponenseinek szerkezetét fizikai, kémiai tulajdonságaik, a spektrumanalízis, a mágneses magrezonancia és infravörös spektrum alapján határoztuk meg. A szerkezetet Röntgen-krisztallográfiával bizonyítottuk. A többi komponens, így a D, L és H szerkezetét mind ez ideig nem határoztuk meg, bár a D és L jellel jelölt vegyületekkel kapcsolatban már születtek eredmények. A D komponens két hidroxilcsoporttal rendelkezik, valószínűleg a B vegyület 15-hidroxilszubsztituált származéka, a 3,15-dihidroxi-24-metilén-14a-aza-D-homo-5a-koleszt-8(9),14(14a)-dién. Az L vegyület valószínűleg a B komponens 15-ketoszármazéka, név szerint 30-hidroxi-24-metilén-14a-aza-D-homo-5a-koleszt-8(9),14(14a)-dién-15-on. A H kompo-5 nens szerkezete még nem ismert. Az A 25822 antibiotikumokat szabad bázisként vagy nem toxikus, gyógyászati szempontból elfogadható savaddíciós sóként használhatjuk. Az antibiotikumok szabad bázisként könnyen átalakulnak savad-10 díciós sókká, például szervetlen savak, például sósav, hidrogénbromid, kénsav, foszforsav, vagy szerves savak, például karbonsavak, mint az ecetsav, propionsav, citromsav, maleinsav, benzoesav, oxálsav, borostyánkősav, aszkorbinsav stb., vagy szerves szulfonsa-15 vak, például benzolszulfonsav, p-toluolszulfonsav, metánszulfonsav, laurilszulfbnsav stb. jelenlétében. Az A 25822 jelű antibiotikumok metiljodiddal reagálva kristályos metiljodidsókká alakulnak. Az A 25822 komponensek és ezek keveréke 20 szabad bázisként lényegében nem oldódnak vízben, ugyanakkor több poláris szerves oldószerben, például dimetilformamdiban, dimetilszulfoxidban, acetonban, etilacetátban, izoamilacetátban, metanolban, etanolban, kloroformban stb. oldódnak. Gyengén oldódnak 25 viszont kevésbé poláris szerves oldószerekben, mint amilyen a benzol, széntetraklorid, és igen gyengén alkilszénhidrogén oldószerekben, például pentánban, hexánban vagy heptánban. Az A 25822 egyes komponenseinek sói és ezek 30 keveréke vízben gyakorlatilag oldódik. Például a B komponens sósavas sója vagy szulfátja vízben jól oldódik. A B komponens szabad bázisként poliform anyagként viselkedik. Ha különböző oldószerekből kristá-35 lyosítjuk ki, úgy különböző olvadáspontú és különböző Röntgen-diffrakciós képet mutató terméket kapunk. Például, ha a szabad bázist n-hexánból kristályosítjuk ki, úgy 56-58 °C olvadáspontú terméket kapunk. Ha pentánból kristályosítunk, a szabad 40 bázis 42—44 °C hőmérsékleten olvad, míg ha acetonhexán elegyéből, úgy 115—118 °C olvadáspontú bázist kapunk. Mindegyik kristályos termék azonos elemanalízis-adatokkal, pK-értékkel és Spektrumokkal rendelkezik, egymástól csak az olvadáspontban és a 45 Röntgen-diffrakciós képben különböznek. Az A 25822 komponensek optikai aktivitásából arra következtethetünk, hogy a B vegyület polimorfizmusáért a diasztereoizmeria a felelős. A B vegyület polimorfizmusa hasonló az azaszte-5® roidok polimorfizmusához. Ha az A, B és L komponenseket ecetsavanhidriddel reagáltatjuk, monoacetilszármazékot, a D vegyülettel pedig diacetilszármazékot kapunk. Az A 25822 antibiotikumkeverék és a keverék " egyes összetevői állati és növényi betegségeket okozó mikroorganizmusok növekedését gátolják. A keverék és az egyes vegyületek mind in vitro, mind in vivo különösen hatásosak a betegségeket okozó gombák ellen, így mind az állat-, mirtd az embergyógyászatban a gombás eredetű betegségek kezelésére előnyösen használhatók. Az A komponens acetilszármazéka (I általános képletű vegyület, ahol R1 és R 2 metilcsoport, R 3 acetoxicsoport), amelyet a szabad bázis és ecetsavanhidrid piridinben kivitelezett reakciójával állítunk elő, 3
