167856. lajstromszámú szabadalom • Eljárás aminopenicillinek előállítására
1^7856 A) táblázat Acetobacter sp. IFO Acetobacter sp. IFO Acetobacter sp. IFÓ Xanthomonas sp. IFO 13209 13210 13211 13215 Morfológiai jellemzők: Aläk pálca pálca pálca pálca Méret 0,5X2JJL Ö.5X2JJL 0,5 X 2[L 0,5X2(ji Ostorok 1, poláros 1—3, poláros 1, poláros í, poláros Mozgékonyság + + + + Grarri-festés — — — — Spóraképzés — — — — Élettani jellemzők: Növekedés az alábbi táptalajokon fermentlé + + + + 5,5 pH-jú táptalaj + + + + 6%-os NaCl — — + — 10%-os etanol — — — — burgonya-ferdetenyészet + + + + halványbarna halványbarna halványbarna sárga BTB-cukor savanyít savanyít nem savanyít savanyít Lakmusz-tej peptonizál peptonizál peptonizál peptonizál Oxigén-felhasználás + + + + Zselatin hidrolízis + + + + Kazein hidrolízis + + + — Keményítő hidrolízis — — — — Nitrát-redukció — — — nyomokban MR-vizsgálat — — — + VP-vizsgálat — — — -Indolképzés — — — — Kénhidrogén-képzés + + + — Cellulóz-lebontás — — — — Kataláz + + + + A fent ismertetett új típusú szubsztrátumspecifitással rendelkező mikroorganizmusok továbbá ismert és letét- 4b be helyezett tenyészetek lehetnek. A találmány szerinti eljárásban felhasználható, ismert és letétbe helyezett mikroorganizmus-törzsek közül a következőket említjük meg: Gluconobacter cerinus IFO 3263, Glucoriobacter dioxyacetonicus IFO 3271, Acetobacter pas- 45 teurianurri IFÖ 3223, Gluconobacter suboxydans IFO 3172, Acetobacter turbidans IFÖ 3225, Acetobacter xylinum IFO 3288, Xanthomonas citri IFO 3781 és Xanthomonas oryzaé IFO 3995 és Xanthomonas pruni IFO 3780. 50 A találmány szerinti eljárásban félhasználható valamennyi mikroorganizmus a Pseudomonadaceaé családhoz tartozik. Ha a (II) általános képlétű «-helyettesített-a-amindsavszármazékokat és 6-amino-penicillánsavat a fent emlí- 55 tett, szubsztrátumspecifikus mikroorganizmusok enzimhatásának tesszük ki, eljárhatunk például úgy, hogy a mikroorganizmust (II) általános képletű a-helyettesített-a-aminosav-származékokat és 6-amino-penicillánsavat tartalmazó táptalajban tenyésztjük. Előnyösebbnek bi- 60 zonyult azonban az az eljárásváltozat, amelynek során a mikroorganizmust előzetesen egy hagyományos táptalajon tenyésztjük, és az így kapott fermentlevet használjuk fel a következő lépésben, adott esetben feldolgozás után. 65 A mikroorganizmusok tetiyésztését levegőztetés és keverés, rázás, vagy sztatikus körülményék között vécézhetjük. Általában* elŐnyöstíek bizonyult az aéröb tenyésztés. Táptalajként pl. huskivóhatot, élesztőkivöriatot, p&ptont, kazein-hidrolizátumot, kükoricalékvárt és/vagy a mikroorganizmusok tenyésztésében általánosári felhasznált egyéb terrriészetes anyagokat tartalmazó közegeket alkalmazhatunk. A közegekhez kívánt esetben szénforrásokat, pl. cukrokat, szerves savakat vagy normál paraffinokat; a nitrogént aminő- és/vagy nitrátcsoport formájában tartalmazó szerves vagy szervetlen nitrogéntartalmú vegyületeket; foszfátokat; mangánsökat; nátriumkloridot, vagy egyéb ionos fémeket és/vagy vitaminokat is adhatunk. A közegek pH-értékét előnyösen 6—8 között tartjuk. A tenyésztést előnyösen 20—40 Cc -on, célszerűen 28—37 C°-on végezzük. A tenyésztés ideje a fermentortól, a fermentlé összetételétől, a tenyésztés hőmérsékletétől és hasonló tényezőktől függően változik. Előnyösen úgy járunk el, hogy a tenyésztést az aminopenicillin-szintetizáló képesség maximumának elérésekor — azaz a logaritmikus növekedési szakasz végén, vagy a stancioner szakasz elején — állítjuk le. Általában jó eredményeket érünk el, ha a tenyésztést 16—40 órán át végezzük. Az így kapott fermentleveket, adott esetben feldolgozás után, a találmány szerinti enzimes aminopeni-3
