167637. lajstromszámú szabadalom • Eszköz mikrobiológiai célra és eljárás az eszköz előállítására

5 167637 6 roló szélei hőkezeléssel lezártak, mint az a kO élnél látható. Az ábrákkal illusztrált 10 és 31 eszközök azonos laminált szerkezetűek. Különbség közöttük pusztán a méretben és az alapelemhez való rögzítési módban van, igy jellemzőik és felhasználhatóságuk további ismertetése során a két laminált szerkezetet együtt tárgyaljuk. Mindkettő tartalmaz egy abszorbens szövetet, gélréteget, a gélréteg és az abszorbens szövet közötti átmeneti határréteget, valamint adott esetben egy vagy több gélkonzisztenciáju fedőréteget. Az abszorbens réteg nedvességszivó papirból, szövetből, fából vagy bármely más anyagból áll, amely képes folyadékok abszorbeálására és visszatartására. A szövet méretei és alakja változtatható, igy például lehet sik, vagy hengeres alakú. A szövetet előnyösen mikrobiológiai tápanyagokkal és szuszpendálószerekkel itatjuk át, illetve adott esetben szinindikátorral vagy kivánt esetben háttér-festékkel is át lehet itatva. Kihangsúlyozzuk továbbá a különbséget a leírásban használt "gélréteg"és "fedőréteg" kifejezések között, A találmány szerinti eszköz lamináris szerkezeti kialakításban - mint azt már korábban ismertettük - abszorbens szövetet és "gélréteget" tartalmaz. A találmány szerinti eszköz azonban tartalmazhat további "réteget" vagy "rétegeket", melyeket "fedőréteg" vagy "fedőrétegek" kifejezéssel jelölünk, és amelyek szintén laminárisán helyezkednek el a találmány szerinti eszköz lamináris struktúrájában. Az adott esetben jelen levő "fedőréteg" pusztán a határréteg felett elhelyezkedő gélréteget fedő réteg vagy rétegek. A "gélréteg" és a "fedőréteg" megkülönböztetése összetételük miatt szükséges, és nem annyira vastagságuk vagy előállitási módjuk miatt. Megjegyezzük továbbá, hogy a két vagy több önálló "réteg" képzésében jelentkező különbségeket három általános kategóriába sorolhatjuk, éspedig az el-ső kategória lényege a következő : két vagy több, eltérő összetételű gélréteget alakitunk ki egymásután; a második kategória lényege: két vagy több, azonos gélösszetételü, de eltérő reagenseket és a reagenseket eltérő koncentrációban tartalmazó rétegeket alakitunk ki egymásután; mig a harmadik kategória: két vagy több, eltérő gélösszetételü, eltérő reagenseket és a reagenseket eltérő koncentrációban tartalmazó réteget alakitunk ki egymásután. A rétegek közötti különbségeket a példában részletesen ismertetjük. A kiindulási gélréteg, vagyis az egyetlen réteg, ha nincs fedőréteg, az abszorbens szövethez képest laminárisán helyezkedik el, folyamatos és lényegében száraz, azaz dehidra— táltsága mintegy 68-99 %. Ha nincs gélből álló fedőréteg, akkor ez a réteg a fedőréteg későbbiekben ismertetett feladatát látja el. Ha előnyös módon e réteg fölött gélből álló fedőréteg van kialakitva, akkor ennek a rétegben /mármint az alaprétegnek/ a feladata az abszorbens szövet felületének lezárása szövet - gélréteg határréteget és úgynevezett "tűhegynyi nyilas menetes"uj felületet képezve. Az ilyen "tűhegynyi nyilas mentes" felületen a mikroorganizmusok és a vízmentes oldószerekben oldott szerves szine'zékek nem tudnak átjutni, mig a mikrobiológiai tápanyagok és a nedvesség át tud hatolni a felületen. Megállapítottuk, hogy a réteg gyakorlatilag alkalmazott vastagságú tartományán belül a fenti anyagok áthatolóképessége /permeabilitása/ elsősorban a gélképző anyag koncentár cióját ól függ, és csak kevésbé függ a rétegvastagságtól. A nedvesség és a mikrobiológiai tápanyagok kívánatos áthatolóképességét biztositó gélképző anyag koncentrációtartománya vízzel telitett állapotban mintegy 1,5-20 suly/ö, előnyösen mintegy 3-15 suly$, illetve a koncentráció a használt gélképző anyag minőségétől is függ. Vizzel telitett állapotban /vagyis a gél nem dehidratált állapotában/ a célszerű vastagság mintegy 0,05 mm és 1,0 mm, előnyösen 0,1 mm és 0,5 mm között van, és ismételten használt gélképző anyag minősegétől is függ. A leírásban a "gél" kifejezés alatt kolloid oldatokból kapható homogén vagy heterogén szilárd fázisokat értünk. így gélképző anyagként használhatunk zselatint, agar-agart, zselatin és agar-agar keverékét, továbbá zselatin és/vagy agar-agar más kolloid anyagokkal, például cellulózgumikkal, alginátokkal, alburn inokkal, karragénekkel, valamint komplex poliszacharidokkal és polipeptidekkel alkotott keverékeit. Más zselatinszerü és kolloid anyagok géljei és keverékei is használhatók, ha ezek az anyagok liofilek és képesek úgynevezett "tűhegynyi nyilas mentes" felületet képezni. A gélréteg is tartalmazhat valamilyen reagenst vagy reagenseket, igy mikrobiológiai tápanyagokat, szinindikátorokát vagy kivánt esetben háttér színezékeket, . A szövet és a gélréteg közötti határréteg tulajdonságaira nézve mind a szövet, mind a gélréteg tulajdonságaival rendelkezik. Az abszorbens szövetet ós/vagy a gélréteget átitató anyagok ezért ahatárérétegben is megtalálhatók. Ez a határréteg biztos itja a bekevert reagensek, valamint a használat során az oltófolyadék vagy a steril folyadék vonatkozásában a kapcsolatot az abszorbens szövet ós a gélréteg között. Ez a folyamatos határréteg meggyorsítja a folyadékok ós a tápanyagok diffúzióját, és közvetítő rétegként szolgál a szövet és a gélréteg között, vagyis a mikroorganizmusok növekedésének vonatkozásában egyesíti mind az ahszórbens szövet, mind a gélréteg hasznos tulajdonságait, ós ezáltal még jobban hasznosítható szerkezet kialakítását teszi lehetővé. Az előnyösen használt, gélből álló fedőréteg az alap géÍrótégre fekszik fel, azaz laminárisán van kialakítva, továbbá folyamatos és lényegében száraz, azaz dehidratáltsága mintegy 68-9° %. Ilnnek a gélből álló fedőrétegnek a felülete szolgál a mikroorganizmusok növekedésére. Ilyen vonatkozásban a gél célszerű koncentrációtartornanya a használt gélképző anyag jellegétől függően mintegy 1,5 suly"'; ós mintegy 20 suly"<> között van. A fedőréteg célszerű vastagsága dehidratált állapotban mintegy 0,05 mm és mintegy 1,0 mm, előnyösen mintegy 0,1 mm és 0,5 mm között van, A réteg megfelelő vastagsága kielégítő térfogatot biztosit a reagensek hatékony visszatartásához és diffúziójához a mikroorganizmusok szabad növekedésének biztosítására, ugyanakkor lehetővé teszi a kivánt vizfelvétel hatékony és csaknem teljes foganatosítását. Egy vagy több fedőréteget használhatunk, és gélképző anyagként zselatint, agar-agart, zselatin és agar-agar keverékét, továbbá zselatin és/vagy agar-agar kolloid anyagokkal, például cellulózgyantával, alginátokkal, albuminokkal, karragénekkel, valamint komplex poliszacharidokkal és polipeptidekkel alkotott keverékeit alkalmazhatjuk. Más, liofil és a felületi mikroorganizmus-növekedést, valamint a reagensek diffúzióját biztositó zselatinszerü és kolloid anyagok, továbbá gélek is használhatók. Közelebbről agar-agar előnyösen használható, minthogy az agar-agar napjainkban a mikroorganizmusok tenyésztésére rendszerint használt anyag. A gélből álló fedőréteg előnyösen valamilyen reagenst vagy reagenseket, igy mikrobiológiai tápanyagokat, szinindikátorokát és kivánt esetben háttérszínezékeket tartalmaz. Mint korábban emiitettük, a találmány szerinti e szköz egy előnyös kiviteli alakja értelmében a laminált szerkezet egészében, vagy egy vagy több gélréteg át van itatva valamilyen mikrobiológiai táptalajjal. Táptalajként használhatunk különböző összetételű táptalajokat, igy például actinomycesek tenyésztésére szolgáló táptalajt, azid-dextr ózt,. Christensen-féle táptalajt, eozin-metilén-kéket,formiát-ricinoleát táptalajt, triptóz-vér agar-agart, M-élesztő táptalajt, modifikált folyékony Sabouraud-féle táptalajt, valamint ezek kombinációit . Adótt mikroorganizmusra specifikus táptalaj vagy inhibitáló hatású keverék megválasztásával kimutatható az adott mikroorganizmus jelenléte vagy távolléte a növekedés vagy a nemnövekedés észlelésével. 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3