167596. lajstromszámú szabadalom • Amino-CEF-3-AM-4-karbonsav-származékok előállítására és izolálására
g 167596 10 C egy alkálifémsójából, előnyösen a nátriumsóból. Abban az esetben, ha a cefalosporin C nátriumsója viszonylag kevés „poliszacharid' szennyeződést tartalmaz, a (II) általános képletű vegyület vagy származékai 7—ACA-vá hasíthatok kloroformban anélkül, hogy zavaró emulziók képződnének. Azonban, ha a cefalosporin C-nek, vagy a nem tisztított (A) általános képletű származékának nátriumsója viszonylag nagy mennyiségű „poliszacharid" tartalommal rendelkezik, a kloroformos közegben végzett hasításkor lényeges emulzióképződési problémákkal kell számolnunk. Azonban, ha a (II) általános képletű cefalosporin C származék átkristályosítását olyan körülmények között végezzük, hogy hasznosítani tudjuk a származék és a „poliszacharid" szennyeződések közötti oldhatósági különbséget, olyan anyagot kapunk, amely lényeges emulziós nehézségek nélkül hasítható 7—ACA-vá kloroformos közegben. Ilyen anyagot állítunk elő a találmány szerinti eljárással tekintet nélkül a cefalosporin C származék kiindulási anyagául szolgáló cefalosporin C-ben jelenlévő „poliszacharid" mennyiségére. A következő előnyök származnak még a találmány szerinti cefalosporin C típusú származékok alkalmazásából: 1. Megnövekedett kitermelési hányadok a cefalosporin C származékok 7-amino-cefalosporinokká történő hasítási reakciójában. 2. Olyan kiváló minőségű 7-amino-cefalosporinok előállítása, mely az ezt követő acilezési reakcióban a problémákat minimálisra csökkenti, illetve teljesen kiküszöböli. 3. A végső antibiotikum gyártás fokozatában a keletkezett közbenső termékekben a szennyeződések mennyisége erősen lecsökken. 4. Megnövekedett a kitermelési hányad a 7-amino-cefalosporinok végső antibiotikummá történő acilezési reakciójában. Nevezetesen azt találtuk, hogy a 7-ACA-cefalotinná történő acilezési reakciójában a kitermelési hányad a „poliszacharid" szennyeződések jelenlétében végzett műveletnél kapott, körülbelül 79%-ról körülbeiül 92%-ra nőtt akkor, ha ezeket a szennyeződéseket a kiindulási 7-ACA-ból teljesen eltávolítottuk. A következő részletes példák tovább szemléltetik a találmány szerinti eljárást anélkül, hogy a találmány oltalmi körét korlátoznák. 1. példa 60 g (128 mmól) cefalosporin C nátriumsót 300 ml ionmentesített vízzel addig keverünk, míg az anyag teljesen feloldódik. Az oldathoz körülbelül 300 ml acetont adunk. Az elegyet keverjük és 5 C°-ra hűtjük, mialatt a cefalosporin C "nátriumsója alkülönül. Az elegy pHját 20%-os vizes nátriumhidroxid-oldattal 9,0—9,5-re állítjuk. Az így kapott oldathoz, amelynek hőmérsékletét körülbelül 5 C°-on tartjuk, keverés közben 19,7 ml 2,4-diklórbenzoilkloridot (141 mmól, 10% felesleg) adunk 30-35 perc alatt. A 2,4-diklórbenzoilklorid adagolása közben az elegy pH-ját 9,0—9,5 közötti értéken tartjuk, ha szükséges, 20%-os vizes nátriumhidroxidoldat egyidejű adagolásával. A 2,4-diklórbenzoilklorid adagolás befejezése után az elegyet 5 C°-on 10 percig, vagy amíg a pH érték 9,0—9,5 marad 2 percig keverjük. Azután az elegyet tömény sósavval 6,5 pH értékig megsavanyítjuk. Az így kapott elegyet 300 ml vízzel, ezt követően 5—10 g szűrési segédanyaggal (Hyflo) kezeljük. Az elegyet szűrési segédanyagon szűrjük át (3-as méretű Büchner tölcséren körülbelül 0,63-1,27 cm vastagságban). A csapadékot 50 ml vízzel mossuk. A szűrletet és a 5 mosóvizet egyesítjük, összekeverjük és 20 C°-ra melegítjük. Tömény sósavval az elegy pH-ját körülbelül 3,0-ra állítjuk. Az oldatot a termék olyan kristályaival öltjükbe, melyeket egy kis laboratóriumi kísérlet során állítottunk elő, és az elegy pHját 10 tömény sósavval 2,7-re állítjuk. Az elegyet 30 percig 20 C° -23 C°-on keverjük, miközben az N<2,4-diklórbenzoil) -cefalosporin C kikristályosodik (először olajként csapódik ki, és azután az olajcseppek megszilárdulnak). Az elegyet tömény sósavval 1,8 pH-15 -értékre savanyítjuk, 2—3 percig keverjük és 300 ml vizet adunk hozzá. A vizes szerves elegyet 2—3 percig keverjük, 5 C°-ra hűtjük és 0 C° -5 C°-on egy órán át keverjük. A terméket szűrjük, 500 ml vízzel mossuk 9f) és 45 C°-on vákuumban szárítjuk, ily módon 68,0 g terméket kapunk (89,1%). 20 g N-(2,4-diklórbenzoil) -cefalosporin C és 180 ml kereskedelmi minőségű aceton elegyét addig keverjük, míg egyenletes keverékké nem válik, és azután 25 9,0 ml ionmentesített vizet adunk hozzá. Az elegyet a termék feloldásáig keverjük (körülbelül 10—15 perc). Az így készített oldathoz 2 g szűrési segédanyagot (Hyflo) és 2 g színtelenítő csontszenet (Darco) adunk. Az elegyet 5 percig keverjük és szűrési segédanyagból 30 képezett betéten (körülbelül Iga 0-as méretű Büchner tölcsérben) átszűrjük. A szűrést megismételhetjük a színtelenítő csontszén eltávolítására, m% a szűrlet tiszta lesz. A kis mennyiségű csapadékot maximum 20 ml acetonnal mossuk. A szürletet és a 35 mosófolyadékot egyesítjük és 250 ml ionmentesített vízzel elkeverjük. Az elegyet 25 C°-ra hűtjük és ionmentesített vizet adunk hozzá addig, míg a felhősödés első nyoma megjelenik (körülbelül 75—110 ml víz hozzáadása után). Az elegyet ezután 0,50 g; •0 átkristályosított termékkel beoltjuk. Az elegyet 30 percig keverjük a környezet hőmérsékletén (23—25 C°), körülbelül 350 ml vizet adunk keverés közben, 40 perc alatt az alegyhez. A víz-hozzáadás befejezése után az elegyet lehűtjük és 1 órán át 5 C° hőmérsékle-45 ten tartjuk. Az így kapott elegyet szűrjük, vízzel mossuk és 45 C°-on vákuumban szárítjuk. Az N-(2,4--diklórbenzoil)-cefalosporin C kitermelése 16-16,5 g. Op.: 136-141° (bomlás közben). 2. példa 60 g (134 mmól) cefalosporin C nátriumsót 300 ml vízben feloldódásáig keverünk. 150 ml acetont 55 adunk hozzá és az oldatot keverés közben 10 C°-ra hűtjük. Az oldat pH-ját 20%-os vizes nátriumhidroxidoldattal 9,0 értékre állítjuk és 17 ml (134 mmól) 4-klőrbenzoilkloridot adunk hozzá. Az elegyet 10—15 C°-on 30 percig keverjük, miközben 20%-os 6Q vizes nátriumhidroxid-oldatot adagolunk hozzá olyan mennyiségben, hogy az elegy pH-ját megközelítőleg 9,0 értéken tartjuk. Ezután 1050 ml vizet két részletben (800 ml és 250 ml) adunk az elegyhez és a pH-t tömény sósavval 1,9 értékre állítjuk. Az elegyet 65 N-(4-klórbenzoil) -cefalosporin C kristályokkal oltjuk be és jégfürdőben lehűtjük. Az elegyet éjjelen át jégszekrényben hagyjuk állni (körülbelül 5 C -on). Az 5
