167552. lajstromszámú szabadalom • Hisztológiai fixáló készítmény

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG <#r^ ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1974. III. 06. (AI-233) Amerikai Egyesült Államok-beli elsőbbsége: 1973. III. 07. (338,732) Közzététel napja: 1975. VI. 28. Megjelent: 1976. XI. 30. 167552 Nemzetközi osztályozás: C0!n 1/00 Feltalálók: Wertlake Paul Terence vegyész, Short Hills, Harrison James Steele vegyész, Ringwood, Amerikai Egyesült Államok Tulajdonos: Applied Bioscience, Paterson, New Jersey, Amerikai Egyesült Államok Hisztológiai fixáló készítmény A találmány tárgya hisztológiai (szövettani) fixáló készítmény mikroszkópos vizsgálat céljára készülő szövetminták számára. Szövetek hisztológiai és hisztokémiai tanulmányozásánál szokásos eljárás szerint a szöveteket először rögzítik és utána készítenek belőlük mikrotom segítségével szövettani metszeteket. Az elvégzendő vizsgálat céljától függően különféle fixálási eljárások használatosak. A szövetek metszés előtti lefagyasztása vagy viaszba történő beágyazása gyakran kielégítő módszer, de ez bizonyos anyagok veszteségét vagy megváltozását eredményezi a szövetben. E nehézségek elkerülése céljából különböző tökéletesített eljárások használatosak, így vákuumban történő gyorshűtéses szárítás vagy a lefagyasztott sejtben a jég alkohollal való helyettesítése, de ezek tömegmunka esetében gyakran körülményesek. Kémiai fixáló módszerek is alkalmazhatók bizonyos esetekben, de ezek felhasználása korlátozott. Ilyen készítmény például Gray: The Handbock of Basic Microtech c. könyv (harmadik kiadás, 1964. McCran Hill, New York) 85-86. oldalán ismerteti higanyklorid tartalmú készítmény. E készítmény hátránya, hogy a higanyklorid alkalmazása miatt külön mosási művelet beiktatása szükséges, a szövet teljes átitatása nem valósítható meg kielégítően, az így kezelt szövet az acél eszközöket, így csipeszeket és hasonlókat megtámadja. További hátránya, hogy a készítmény salétromsavat is tartalmaz, mely a szövetet károsítja és annak színezésére kedvezőtlen hatást fejt ki. A találmány tárgya olyan új szövettani fixálószer, amely a fentiekben részletezett hátrányokat kiküszöböli és amely a szöveti sejteket csak minimálisan károsítja, használata kényelmes és a 5 szövetféleségek széles körénél alkalmazható. Közelebbről meghatározva a találmány tárgya triklór-ecetsav, cink-klorid és formaldehid vizes, kisszénatomszámú alkanolos oldatát tartalmazó rögzítő készítmény. A kisszénatomszámú alkanol bármilyen 10 jól ismert 1-4 szénatomos alkohol lehet, például metanol, etanol, n-propanol, izopropanol, n-butanol és különböző elágazó láncú butanolok. A metanol teljesen kielégítő és gazdaságossági szempontból, valamint jó oldóhatása miatt előnyben részesítjük. 15 Bár a feltüntetett mennyiségeket tiszta alkanolra vonatkoztatjuk, nyilvánvaló, hogy változó mennyiségű vizet tartalmazó alkanolok használhatók a találmány szerinti rögzítő készítményhez, mivel az alkaríol és a hozzáadott víz térfogata megfelelően 20 módosítható. A vizes kisszénatomszámú alkanolban az alkanol/összvíz térfogataránya 1:1-1:3. Az előnyben részesített arány 1 :1,1 - 1 :1,5. 25 A vizes alkanolban oldjuk fel a triklór-ecetsav, zinkklorid és formaldehid elegyét. A zink-klorid/triklór-ecetsav súlyaránya 2:1-4:1. Legkielégítőbb a 3 :1 arány. A formaldehid: triklór-ecetsav aránya 30 8 :1 - 10 :1, a jellemző arány 9 :1. 167552