167528. lajstromszámú szabadalom • Eljárás G-418, verdamicin I, sziszomicin és gentamicin A antibiotikumokat tartalmazó keverék és alkotórészei előállítására
15 167528 16 2. Sziszomicin, ennek az antibiotikumnak biológiai tulajdonságait. a J. Antibiotics 23, 551-565 írja le. Előállítását és tulajdonságait a 735 145 számú belga szabadalmi leírás ismerteti. 3. G-418 antibiotikum, eddig ismeretlen volt. 4. Gentamicin A, Weinstein és munkatársai az „Antimicrobial Agents and Chemotherapy" műben (1965, 816-820 old.) ismertették a gentamicin A baktériumellenes tulajdonságait, és szerkezetét Maehr és Schaffner J. Am. Chem. Soc. 89, 25 (1967) közölték. Ennek a négy fő alkotórésznek papírkromatogramon mutatott viselkedését a 7. táblázat szemlélteti. 7. táblázat Az antibioíikumok Rf és Rt értékeinek összehasonlítása Papírkromatografáló rendszer Verdamicin I Sziszomicin G418 Gentamicin A Kloroform : metanol : tömény ammónia (1:1:1) 0,65 Chromar 550 papíron felszálló Kloroform : metanol : 17% ammónium hidroxid 2:1:1 Whatman 1. sz. papíron leszálló 0,58 Antibiotikumok értékei, t = 6 óra: 0,40 0,21 0,41 0,18 0,05 2-Butanon : terc-butanol: metanol : tömény ammóniumhidroxid 16:3:1 :6 Whatman 1. sz. papíron leszálló Antibiotikumok Rt értékei, t=16óra: 0,44 0,36 0,27 Rt = folt távolsága a kezdőponttól kezdőpont és papír vége közötti távolság -t időpontban A négy fő alkotórészen kívül néha egyéb baktériumellenes anyagok jelenlétét is ki lehet mutatni. Ezek az anyagok azonban olyan csekély mennyiségben keletkeznek, hogy elkülönítésüket, tisztításukat és jellemzésüket sikeresen nem tudtuk 5 Q elvégezni. Például a fermentálásban keletkezett összes antibiotikumot tartalmazó nyers kivonatot kis térfogatra bepárolva, szirupszerű folyadékot kaptunk, ezt Chromar 500-on felszálló kromatografálással egy óra hosszat kloroform, metanol és 55 tömény ammóniumhidroxid 1:1:1 térfogat arányú keverékével fejlesztettük ki. Amikor a kromatogramot Staphylococcus aureus 6538P mikroorganizmussal szemben bioautografáltuk, alig kimutathatóan még három fermentációs termék kis gQ mennyisége volt felismerhető. E termékek Rf értékei közelítően 0,41, 0,30 és 0,12 voltak. Amint fentebb említettük, a verdamicin I fizikai-kémiai elemzése arra vall, hogy új anyag, szerkezetileg azonban rokona a gentamicin C2-nek. 55 A két antibiotikumot 6n sósavval 100C°-on 2 óra hosszat hidrolizálva, majd n-butanol, piridin, víz és ecetsav 6:4:3:1 térfogatarányú oldószerrendszerrel vagy propanol, piridin, víz és ecetsav 6:4:3:1 térfogatarányú oldószerrendszerrel papírkromatografálva, és a kromatogramot ninhidrinnel permetezve, világosan kitűnik, hogy a gentamicin C2 és a verdamicin I hidrolízistermékei eltérők. A kromatogramok mindkét rendszerben két közös termék jelenlétét mutatták, ezek egyike a 2-dezoxisztreptamin. A verdamicin I többi hidrolízis terméke azonban különbözik a megfelelő gentamicin C2 -származéktól. Az alább felsorolt fizikai és kémiai adatok és a hidrolízistermékek elemzése alapján véleményünk szerint a verdamicin I szerkezetét a sztereokémiái szerkezet rögzítése nélkül*a II képlet fejezi ki. A verdamicin I kémiai és fizikai tulajdonságait a 8. táblázatban összegeztük. 8
