167285. lajstromszámú szabadalom • Eljárás triciu-izotóppal jelzett nagy fajlagos aktívitású telítetlen zsírsavak előállítására
167285 7 8 standard anyagok vékonyrétegkromatográfiás viselkedésével és azonosnak találtuk. Az összehasonlításnál használt ezüstnitráttal impregnált szilikagél G vékonyrétegkromatográfiás lemezeket az alábbiak szerint készítettük el: 10 g ezüstnitrátot feloldunk 130 ml desztillált vízben, és 40 g szilikagél G-t adunk az oldathoz. A nyert szuszpenzióból Desaga felkenővel 10 db 20X20 cm-es lemezt kenünk. A lemezeket egy napig sötétben szobahőmérsékleten száradni hagyjuk, majd 1 órán át 120 °C-on szárítószekrényben aktiváljuk. A lemezeket sötétben tároljuk. Futtatórendszer: 160 ml n-heptán, 40 ml etilacetát és 3 ml ecetsav elegye. Előhívó reagens: 3% cerium (IV)-szulfát 5 n kénsavban oldva. A reagenssel bepermetezett lemezt 110°C-on szárítószekrényben melegítve a termék és a közbeeső termékek foltjai barna színnel válnak láthatóvá. A 6-cisz,9-cisz,12--cisz-oktadekatrién-1-01 Rf-értéke 0,21, a 8-cisz,ll-cisz, 14-cisz-ejkozatriénsav Rf-értéke 0,35. összehasonlítottuk a termékből éteres diazometán oldattal készített metilészter és a jelzet len 8-cisz,ll-cisz,14-cisz-ejkozatriénsav-metilészter rétegkromatográfiás, valamint gázkromatográfiás viselkedését, és ugyancsak azonosnak találtuk. A rétegkromatográfiás összehasonlítást a fent megadott módon végeztük, a 8-cisz,ll-cisz,14-cisz-ejkozatriénsav-metilészter Rf-értéke 0,59. A gázkromatográfiás összehasonlítás pedig az alábbiak szerint történt : Készülék: Perkin Elmer F 21 típusú gázkromatográf. Kolonna: 2 mX4 mm saválló acél; töltet: Chromosorb W—AW (60/80 mesh) hordozón 4% etilénglikoladipát. Hőmérséklet: Elpárologtató 210 °C; kolonna 195 °C; detektor kb. 200 °C. Vivőgáz: nitrogén, áramlási sebessége kb. 60 ml/perc (holtidő 38 másodperc). Detektor: Lángionizációs. A standard sztearinsav-metilészter retenciós ideje: 6,95 perc. A 8-cisz,ll-cisz,14-cisz-ejkozatriénsav-metilészter sztearinsav-metilészterre vonatkoztatott relatív retenciója: 2,54. Az előállított C3 -as metiléncsoporton tricium-izotóppal jelzett 8-cisz,ll-cisz, 14-cisz-ejkozatriénsav a jelzetlen 8-cisz,ll-cisz,14-cisz-ejkozatriénsavhoz hasonlóan juh ondóhólyagból nyert mikroszóma-preparátummal 1 la, 15(S)-dihidroxi-9-oxo-13 --transz-prosztén-savvá (PGEj-é) volt átalakítható, így lehetővé vált a C3 -as metiléncsoporton tricium-izotóppal jelzett PGEX előállítása. 2. példa C3 -as metiléncsoporton tricium-izotóppal jelzett 11-cisz-ejkozénsav. a) 0,555 g (5 mmól) vízmentes kalcium-kloridot keverés közben 60 ml abszolút etilalkoholban feloldunk. Az oldat pH-ját etilalkoholos nátriumhidroxiddal 7,5—8-ra állítjuk, —20 °C-ra hűtjük és egyszerre hozzáadunk 0,341 g (9 mmól) nátrium-bór-tricidet. A reakcióelegyet 30 percig keverjük, majd hozzáadjuk 1,482 g (5 mmól) olajsav-metilészter 5 ml etilalkoholos oldatát, ezt követően 5 órán át —20 °C-on, majd további 3 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegy feldolgozása és 5 tisztítása megegyezik az 1. példa szerintivel. A kapott 9-cisz-oktadecén-l-01 Rf-értéke az 1. példában megadott rétegkromatográfiás rendszerben 0,34. b) A Cj-es metiléncsoporton tricium-izotóppal jelzett 9-cisz-oktadecén-l-01 toziláton és jodidon ke-10 resztüli malonészteres láncnyújtása mindenben megegyezik az 1 példában ismertetett eljárással, amelynek révén C1 -es metiléncsoportban tricium-izotóppal jelzett 9-cisz-oktadecén-l-01-ra számolva 30%os termeléssel kapjuk a C3 -as metiléncsoporton 15 tricium-izotóppal jelzett 11-cisz-ejkozénsavat. A termék vékonyrétegkromatográfiás viselkedését az 1. példában ismertetett módon összehasonlítottuk a jelzetlen 11-cisz-ejkozénsav rétegkromatográfiás viselkedésével és azonosnak találtuk (Rf-érték: 20 0,48). Megjegyezzük, hogy a fenti kiviteli példákban ismertetett kémiai átalakításokat argon atmoszférában végeztük. 25 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás tricium-izotóppal jelzett I általános képletű telítetlen zsírsavak — ahol R 15, 17 vagy 19 szénatomszámú, 1—4 egymáshoz képest izolált helyzetű telítetlen kötést tartalmazó szénhidrogén-30 láncot jelent — előállítására, azzal jellemezve, hogy egy II általános képletű észtervegyületet — ahol R jelentése a fenti, R' pedig metil- vagy etilcsoportot jelent — kalcium- vagy nátrium-bór-triciddel redukálunk, a kapott IV általános képletű alkoholt 35 — ahol R jelentése a fenti — tozil-kloriddal reagáltatjuk, a keletkezett tozil-észtert egy alkáli-jodiddal hozzuk reakcióba, majd az ily módon kapott V általános képletű jód-származékot — ahol R jelentése a fenti — malonsav-dietilészter nátrium 40 származékával reagáltatjuk, és a keletkezett VI általános képletű észtert — ahol R jelentése a fenti — egy lúgoldattal elszappanosítjuk, ezt követően dekarboxilezzük. 2. Eljárás tricium-izotóppal jelzett I általános 45 képletű telítetlen zsírsavak — ahol R 15, 17 vagy 19 szénatomszámú, 1—4 egymáshoz képest izolált helyzetű telítetlen kötést tartalmazó szénhidrogénláncot jelent — előállítására, azzal jellemezve, hogy egy III általános képletű sav-kloridot — ahol R je-50 lentése a fenti — nátrium-bór-triciddel redukálunk, a kapott IV általános képletű — ahol R jelentése a fenti — alkoholt tozil-kloriddal reagáltatjuk, a keletkezett tozil-észtert egy alkáli-jodiddal hozzuk reakcióba, majd az ily módon kapott V általános 55 képletű jód-származékot — ahol R jelentése a fenti — malonsav-dietilészter nátrium származékával reagáltatjuk, és a keletkezett VI általános képletű észtert — ahol R jelentése a fenti — egy lúgóldattal elszappanosítjuk, ezt követően dekarboxilezzük. 1 db rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 766088/4 — zrínyi Nyomda, Budapest. — F. v.: Bolgár Imre vezérigazgató
