167273. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dezacetoxi-cefalosporin C előállítására

167273 6 A légmicéliumok bolyhos felszínű telepeket képeznek, színük kezdetben fehér, majd az öreg tenyészetekben világos okkerságra. A légmicéliumot túlnyomó részben egyenesen vagy félig-egyenesen álló, helyenként elterülő szövedékes hifatömeg alkotja. Szintetikus táptalajon az organizmus növekedése lassú, a légmicélium gyengén fejlett vagy hiányzik. A vegetatív micélium színe narancs (Maerz és Paul színskálája szerint 10—7F). A Cephalosporium chrysogenum ATCC 14615 leírása. Fenti törzs leírását Sukapure és Thirmalachar munkájából ismerjük: Studies on Cephalosporium Species from India I, Mycologia LV, 563—569 (1963). Az alábbiakban ismertetett agarok mindegyikén fehér színű légmicélium figyelhető meg az oltást követő 3. napon, míg az 5. napon sárgásrózsaszínű színárnyalat jelenik meg. Czapek folyékony agarán nőtt kolóniákban fej lett, pelyhes (flokkózus) vagy fonadékos (funikulózus) hifák figyelhetők meg, amelyek egyenesen és lefelé görbülve helyezkednek el. A kolóniák sugarasan ráncoltak, kerekek, széleik épek, egyenesvonalúak és 16 mm-es inokulált sávból 38 mm átmérőjűre fejlődnek. -A 14. napig a kolóniákon spóraképzés nem figyelhető meg. A burgonya-dextróz-agaron nőtt kolóniák színe világos szűrkéssárga. A kolóniák egy 18 mm nagyságú beoltott sávból 37 mm-es nagyságúra fejlődnek. A fenti agáron nőtt kolóniák légmicéliuma gyengén fejlett, lágy, fonadékszerű, egyenes és lefelé hajló. A fíalidák erőteljesen fejlettek, a szövedékből, fonadékból és az egyedül álló hifákból indulnak ki. A konídiumokat láncokban és csupasz gömböcske alakú képződményekben hordozzák. A konídiális fejlődési szakasz vizsgálatára ezt a táptalajt használjuk. Malátakivonat-agaron 16 mm átmérőjű sávot oltva 37 mm átmérőjű kolóniákat kapunk. A kolónia pelyhes és fonadékos is lehet, szövedék jön létre, de a konídiális fejlettség ritkán figyelhető meg. A kolóniák színe halvány szárgásrózsaszín, hátoldaluk halvány narancsszínű. A módosított V8 jelű leves-agaron 17 mm átmérőjű oltott felületről 37 mm étmérőjű kolóniák fejlődnek. A légmicéliumot alkotó hifák valamivel hosszabbak, mint a Czapek-agaron nőtt kolóniákon. A tenyészet halvány sárgásrózsaszínű, hátoldala barnás-sárgásnarancs. A kolóniák pelyhesek vagy fonadékosak, többnyire elterülő szövedékből állnak. A konídiumokat hordozó fíalidákat közepes számban figyelhetjük meg. A fíalidák színe világos, hegyesek, hosszúságuk 55,8 fx és 92,1 n között változik, átlagosan 66,2 fi. Felfelé vékonyodnak, alul 2,3 fi, felül 0,5 fi szélesek. Az egy sejtből álló, világos színű, téglalap vagy eliptikus alakú konídiák hossza 5,6 fi és 7,7 fi között változik, szélességük 2,5—3,5 fi. Átlagos méretük 6,8x3,1 fi. A Cephalosporium NRRL 5716 faj tulajdonságai. Az alábbiakban megadott agarakon kinőtt kolóniákon makroszkopikusan látható, szabad légmicélium nem fejlődik, közel sima felszínű, lapos, nedves, tésztaszerű micéliumból állnak, amelyek sugaras irányban enyhén rovátkoltak. Czapek agáron olyan kolóniák figyelhetők meg, amelyek 20 mm átmérőjű oltott területről 32 mm 5 átmérőjűig fejlődnek. A fíalidák az erősen kötött elterülő szövedékből fejlődnek ki és csak ritkán a micéliáris felszínből. A kolóniák színe halvány sárgásfehér, szélük sima és ép. A kolóniák hátoldala fehér színű, növekedésükkor halvány sárgászöld 10 színű oldódó színanyag keletkezik. Burgonya-dextróz-agaron a Czapek-agaron nőtt kolóniákhoz méretben, színben, a fíalidák fejlesztésében, állagában és színanyag-termelésben hasonló kolóniák fejlődnek. A különbség köztük az, hogy 15 a burgonya-dextróz-agaron fejlődött kolóniák éles, sugaras irányban rovátkolt, csipkézett széllel rendelkeznek. Az oltást követő 14. napon az oldódó színanyag intenzívebb. A malátakivonat-agaron nőtt kolóniák szintén 20 hasonlóak a Czapek-agaron fejlődött kolóniákhoz, ugyanakkor azonban oldódó színanyag nem keletkezik. Az oltást követő 7. napon a kolóniák mindkét oldalukon fehér színűek, a 14. napon pedig, szintén mindkét oldalukon, halvány zöldessárga szí-25 nűek. A módosított V8 jelű leves-agaron olyan kolóniák fejlődnek, amelyek a fenti agarokon nőtt kolóniáktól több tulajdonságban különböznek. Színük világosbarna és viszonylag mély, szűk, sugárirány-30 ban futó barázdák figyelhetők meg rajtuk. A kolóniák hátoldala halványbarna színű, a micéliumok át meg átszövik a táptalajt. A tenyészet felszínét laza, fehér színű, hifákból álló légmicélium alkotja. A fenti táptalajon nőtt kolóniák mikroszkopiku-35 san erősen összeálló szabálytalan hifák szövedékéből állnak, amelynek duzzadtak és csavarodottak. Növekedési sebességük azonos a Czapek-agaron megfigyelttel. A fenti táptalajon nagyobb mértékű a fíalidák fejlődése; ezek a kolóniák felszí-40 néről és a szövedéket alkotó hifákból indulnak ki nagy számban. A fíalidák színe világos, egysejtűek, jól elkülönülnek és oldalirányban túlnövik a hifák alkotta lemezeket. Hosszúságuk 20 fi és 46,5 fi, alapjuknál mért szélességük 2,3 fi és 4,7 fi között 45 változik, átlagosan 39,37x4,65 fi méretűek. Csúcsukon szélességük 0,5 fi. A konídiumok láncokban vagy csupasz gömbökben fűződnek le. Színük világos, egysejtűek, sima felszínnel rendelkeznek és általában összetapadnak. 50 Néhány ugyan allantoid, de ezek közelítőleg elvékonyodó végekkel rendelkeznek, egyesek navikulárisak. Méretük: 3,5 fi és 7,0 fi hosszúság, 1,4 fi és 2,1 fi szélesség; átlagos méret: 5,0x1,5 fi. A Cephalosporium NRRL 5718 jelű faj tulajdon-55 ságai. A kolóniákon Czapek-agaron gyengén fejlett és színtelen légmicélium figyelhető meg. A hifák szabálytalanok, duzzadtak, csavarodottak. Burgonya-dextróz-agaron lapos kolóniák fejlőd-60 nek, amelyeken a légmicélium-növekedés erőssége szempontjából különböző sávok vannak. A növekedés fonadékos és mérsékelten szövedékes, a konídiumokat tartalmazó fíalidák a fonadékokból, szövedékekből és magányosan álló hifákból fejlődnek. 65 A konídiumok láncokban vagy gömbökben állnak. 3