167273. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dezacetoxi-cefalosporin C előállítására
27 167273 28 tetett bioatugráfiás vizsgálat szerint dezacetoxicefalosporin C-t tartalmazó frakciókat egyesítjük. Az egyesített eluátumból desztillációval eltávolítjuk az oldószert, a száraz desztillációs maradékot, amely a dezacetoxi-cefalosporin C-t tartalmazza, a lehető legkisebb mennyiségű izo-propanolban oldjuk. Az alkoholos oldatot körülbelül hússzoros mennyiségű éterbe öntjük, majd keverjük az oldatot, amikor a dezacetoxi-cefalosporin C kiválik. A csapadékot szűréssel elkülönítjük és levegőn szárítjuk amikor 126 mg antibiotikumot kapunk nátriumsó alakban. 2. példa Az előző példában ismertetett eljárást ismételjük meg, azzal a különbséggel, hogy az előzőekben megadott összetételű inokulum-táptalajt az Emericellopsis NRRL 5714 jelű törzs spóráival oltjuk. A vegetatív tenyészettel annak kinövése után az alábbi összetételű főfermentációs táptalajt oltjuk: Oldódó keményítő 1,0 g Dextróz 4,0 g Szójadara 1,0 g Kalciumkarbonát 0,5 g Habzásgátló 0,1 g Víz 100 ml A táptalaj pH-ját sterilezés és oltás előtt 6,5-re állítjuk be. A tenyésztést 26 °C hőmérsékleten, öt napon át folytatjuk és a dezacetoxi-cefalosporin C-t az 1. példában megadott eljárást megismételve különítjük el a tenyészléből. 3. példa Az 1. példa szerinti fermentációs eljárást ismételjük meg, azzal a különbséggel, hogy az 1. példában megadott összetételű inokulum-táptalajt a Scopulariopsis NRRL 5715 jelű törzs spóraszuszpenziójával oltjuk. A vegetatív tenyészettel az 1. példában megadott összetételű főfermentációs táptalajt oltunk. A fermentációt 26 °C hőmérsékleten 5 napon át folytatjuk, majd a dezacetoxi-cefalosporin C-t az 1. példában ismertetett eljárást megismételve különítjük el a tenyészléből. 4. példa Az 1. példában megadott összetételű táptalajokon és tenyésztési körülmények között Paecilomces carneus HRRL 5711 jelű törzset tenyésztünk, és a keletkezett dezacetoxi-cefalosporin C-t az ugyanott megadott eljárást megismételve különítjük el. 5. példa Az 1. példában megadott összetételű táptalajokon és tenyésztési körülmények között Diheterospora chlamydosporia NRRL 5728 jelű törzset tenyésztünk, és a keletkezett dezacetoxi-cefalosporin C-t az ugyanott megadott eljárást megismételve különítjük el. 6. példa Az 1. példában megadott eljárást az összes, a leírásban ismertetett törzzsel elvégeztük. Az aláb-5 biakban megadjuk a keletkezett dezacetoxicefalosporin C mennyiségét a nyert tenyószlé ml-ére vonatkoztatva. Az értékeket az 1. példában ismertetett kromatográfiás módszerrel határoztuk meg, az összehasonlítást autentikus dezacetoxicefalospo-10 rin C mintával vágeztük. NRRL TC lf",PT*TYl£ Mikroorganizmus (ATCC) szám J.V1 UCL XÍÍK. (/íg/ml Cephalosporium corda 5 445 250 Cephalosporium chrysogenum (14 615) 225 Cephalosporium sp. 5 712 40 Cpehalosporium sp. 5 716 125 Cephalosporium sp. 5 718 150 Cephalosporium sp. 5 719 75 Cephalosporium sp. 5 720 100 Cephalosporium sp. 5 721 80 Cephalosporium sp. 5 722 50 Cephalosporium sp. 5 723 70 Cephalosporium sp. 5 724 150 Cephalosporium sp. 5 725 75 Emericellopsis sp. 5 713 40 Emericellopsis sp. 5 714 40 Emericellopsis sp. 5 717 70 Emericellopsis sp. 5 446 126 Emericellopsis sp. 5 447 175 Scopulariopsis sp. 5 715 50 Paecilomyces carneus 5 711 125 Diheterospora chlamidosporia 5 728 20 40 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az I képletű dezacetoxi-cefalosporin C előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely penicillin N-termelő mikroorganizmust, így Cepha-45 losporium corda NRRL 5445, Cephalosporium chrysogenum ATCC 14 615, Cephalosporium sp. NRRL 5712, NRRL 5716, NRRL 5718, NRRL 5719, NRRL 5720, NRRL 5721, NRRL 5722, NRRL 5723, NRRL 5724, NRRL 5725, Emeri-50 cellopsis sp. NRRL 5713, NRRL 5714, NRRL 5717, NRRL 5446, NRRL 5447, Scopulariopsis sp. NRRL 5715, Paecylomyces carneus NRRL 5711 vagy Diheterospora chlamydosporia NRRL 5728 törzset szénforrást és nitrogénforrást, továbbá szer-55 vétlen sókat tartalmazó vizes táptalajon, süllyesztett aerob körülmények között tenyésztünk, majd a tenyészléből elkülönítjük a keletkezett dezacetoxi-cefalosporin C-t. (Elsőbbsége: 1973. április 9.) 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási 60 módja, azzal jellemezve, hogy a fermentációt a Cephalosporium corda NRRL 5445 jelű mikroorganizmussal végezzük. (Elsőbbsége: 1972. április 26.) 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, dezacetoxi-cefalosporin C előállítására, azzal 65 jellemezve, hogy a fermentációt Cephalosporium 14
