167271. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az aminocsoporton alkiniloxi-karbonil-csoporttal védett aminosavak és peptidek előállítására

167271 13 14 sei kell eltávolítani, lényegében sértetlenek maradnak, miközben az alkiniloxi-karbonil-csoportot szelektíven eltávolítjuk. Az amino-védőcsoportok katalitikus hidrogenolízisét közömbös oldószerben valósítjuk meg körülbelül 15—45 °C hőmérsékleten körülbelül 1—5 atmoszféra hidrogénnyomáson hidrogénező katalizátor jelenlétében. Katalizátorként előnyösen szénre felvitt palládiumot alkalmazunk, például szénre felvitt 5—10% palládiumot. Hordozós katalizátorként egyéb hidrogénező katalizátort is alkalmazhatunk, így platinát, platinaoxidot, ródiumot és ruténiumot, amelyeket általánosan alkalmazott katalizátorhordozókra vittünk fel, így szénre, timföldre, szilikagélre és hasonlókra. Ezeket a katalizátorokat, beleértve a palládiumot is, finoman eloszlatott fémállapotban is alkalmazhatjuk hordozó nélkül. A hidrogenolízishez oldószerként alkoholokat, étereket és észtereket alkalmazhatunk, például metanolt, etanolt, izopropanolt, tetrahidrofuránt, dioxánt, etilacetátot, amilacetátot és hasonló oldószereket. Dimetilformamidot, dimetilszulfoxidot, vizes ecetsavat és egyéb általánosan alkalmazott oldószereket szintén használhatunk. A reakciót előnyösen szobahőmérsékleten valósítjuk meg körülbelül 1 at és 3 at közötti hidrogénnyomáson körülbelül 0,05—0,75 g 5%-os, szénre felvitt palládium jelenlétében, 1 millimól peptidre előnyösen 0,5 g 5%-os, szénre felvitt palládiumot alkalmazunk. A hidrogenolízist megvalósíthatjuk Parr-hidrogénező készülékben vagy megfelelő üvegedényzetben, így nyitott főzőpohárban vagy gömblombikban vagy egyéb reakcióedényben. Ha a hidrogén ilízist lombikban vagy nyitott főzőpohárban végezzük, a katalizátort a peptidet tartalmazó oldatban szuszpendáljuk és az oldaton keverés közben buborékoltatjuk át a hidrogéngázt. A reakcióelegyben széndioxid képződik a hidrogenolízis következtében és ezt báriumhidroxid oldatában foghatjuk fel, hogy meghatározzuk, mikor válik teljessé a hidrogenolízis reakciója. Ha a II általános képletben R klóratomot jelent, az alkiniloxi-karbonil-csoporthidrogenolízisét a klórszubsztituens hidrogenolízise kíséri hidrogénklorid képződésével. Az így képződött hidrogénkloridot felhasználhatjuk a védőcsoport eltávolításakor keletkező szabad aminocsoport hidrokloridjának in situ előállítására. A klóracetilén-védőcsoport, például az l-klór-3--metil-l-butin-3-oxikarbonilcsoport különösen értékes az N-terminális glutamin-peptidek szintézisében. A glutamin-peptid-gyökök intramolekuláris ciklizációra hajlamosak, ekkor a peptiden belül nem kívánatos piroglutaminil gyök képződik. Ha a találmány szerinti klóracetilén-védőcsoportot alkalmazzuk, a védőcsoport hidrogenolízisével egyidőben lejátszódó hidrogénklorid fejlődés a peptid glutamin-gyökére hat és megakadályozza a glutamin-gyök ciklizálódását. Az alkiniloxi-karbonil-védőcsoport különösen értékes amino-védőcsoport a peptidszintézisben, minthogy a peptidekből hidrogenolízissel szelektíven eltávolítható az általánosan alkalmazott karbonsav, amino-, hidroxil- és merkaptocsoport jelenlétében is, mely védőcsoportok ugyanabban a peptidben lehetnek jelen. így például az alkinil-oxi-karbonücsoport a fentiekben ismertetett hidrogenolízissel olyan amino-védőcsoportok jelenlétében is eltá-5 volítható, mint a terc-butiloxikarbonil- (T-BOC) és adamantiloxikarbonilcsoport, így például a lizin t-BOC-csoporttal védett e-aminocsoportjának és az ornitin t-BOC-ő-amino-csoportjának jelenlétében. Az acetilén-kötést tartalmazó aminovédőcsopor-10 tok szelektíven eltávolíthatók a kéntartalmú csoportokat tartalmazó peptidekből a hidrogenolízissel eltávolítható védőcsoportokkal együtt, például a benzilészterekkel és benziléterekkel. Az alkiniloxi-karbonil amino-védőcsoport sem-15 leges pH-értéken távolítható el katalitikus hidrogenolízissel védett merkapto csoport jelenlétében, például S-védett cisztein jelenlétében. Ilyen S-védőcsoport például a tetrahidropiranil-csoport, pmetoxibenzil-csoportot [Bull. Chem. Soc. Japan, 37, 20 (3) 433 (1964)], izobutiloximetilcsoport (J. Org. Chem., 35, 215 (1970); J. Chem. Soc. 3832 (1964)], /3-/S-dietoxikarboniletilcsoport, S-etilmerkapto-csoport [Bull. Chem. Soc. Japan, 40, 2913 (1969)], az alkoxikarbonil- és benziloxikarbonilcsoport [J. 25 Am. Chem. Soc, 85, 1337 (1963)], alkilkarbamoiicsoport [Helv. Chim. Acta, 49, (14) 83 (1966)], az acetamidometilcsoport [Tetrahedron Letters, No. 26, 3057 (1968)], a terc-butilcsoport és a hasonló tiol-védőcsoportok, amelyeket a peptidszin-30 tézisben általánosan alkalmaznak. Az alkiniloxi-karbonil amino-védőcsoport különösen értékes a peptidek szintézisében, minthogy eltávolítható a kéntartalmú csoportot tartalmazó peptidek aminocsoportjáról, például a metionint és 35 ciszteint tartalmazó peptidek aminocsoportjából. Meg kell jegyeznünk, hogy a III általános képletben a zárójelbe tett rész egy aminosavgyököt jelent. Természetesen, R7, értéke az egyes aminosav gyökökben azonosak vagy különböző lehet. 40 Ha a III általános képletben R5 védett szubsztituenst jelent, például védett merkaptocsoporttal szubsztituált 1—4 szénatomos alkil-szubsztituenst, ezek a védett csoportok az I általános képlet jelentésében megadott csoportok lehetnek. 45 Azok a III általános képletű peptidek, amelyeket természetesen aminosavakkal állítottunk elő, a peptidek előnyös csoportját képezik, amelyeket a peptidkémiában leírt számos módon használhatunk. Az ilyen természetesen aminosavgyököket tartal-50 mázó peptideket ismert polipeptidek szintézisében használhatjuk, például az ismert fiziológiai tulajdonságokkal rendelkező glükagon szintézisében. Az olyan aminosavakkal előállított III általános képletű vegyületek, amelyek a természetben nem 55 fordulnak elő, különböző molekulasúlyú oldható polimerek szintézisére alkalmazhatók, ezeket az anyagokat felületbevonó szerként használhatjuk. A találmány értelmében az aminosav aminocsoportját úgy védjük meg, hogy az aminosavat 60 acetilén-kötést alkalmazó halogénformiáttal vagy acetilén-kötést tartalmazó karbonáttal reagáltatjuk (II általános képletű vegyületek), így az N-védett I általános képletű aminosavat kapjuk. Ezután az N-védett aminosav karbonsav-funkcióját aktív 65 észterré, vegyes anhidriddé vagy acü-halogeniddé 7