166840. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibiotikumok előállítására
166840 13 14 káliumsóinak keverékét kapjuk, lényegében tisztán. A találmány szerinti eljárással előállított antibiotikumok sajátos hatást fejtenek ki a kérődzők bendőjében. A fiatal kérődzők, különösen a még el nem választott állatok, az egyszerű gyomorral rendelkező állatokhoz hasonlóan táplálkoznak, egyszerű, folyékony táplálékot hasznosítanak. Amint a fiatal állatok cellulózt, keményítőt és más szénhidrátokat tartalmazó szilárd halmazállapotú táplálékot kezdenek fogyasztani, a bendő elkezdi működését, kifejlődik benne a mikrobiológiai populáció. Miután az állat hosszabb időn át szilárd táplálékot evett, bendője eléri a teljes működési szintet és működését az állat egész élete folyamán folytatja. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek az összes kérődző állat, tehát az összetett gyomorrendszerrel (ennek egy része a bendő) bíró állat kezelésére használható. Gazdasági szempontból fontos kérődző a szarvasmarha, a juh és a kecske. Érthető módon, a találmány szerinti eljárás nem csak azokra az állatokra vonatkozik, amelyeket hizlalunk, vagy nemcsak a fiatal állatokra. Ha a találmány szerinti eljárással kifejlett állatokat, tejelő teheneket vagy tenyészállatokat kezelünk, azok kevesebb tápanyagot fogyasztanak. Az állatokat előnyösen hatásos, a bendőben lejátszódó folyamatokat befolyásoló mennyiségű antibiotikummal kell kezelnünk. A bendőben lejátszódó folyamatokat befolyásoló legkisebb mennyiségű hatóanyag az állatok táplálékától, a tenyésztés körülményeitől és az állatok korától függ. Megfelelő mennyiségű hatóanyagnak számít a naponta és testsúly-kilogrammonkénti 0,02—2,0 mg-os mennyiség, előnyösen azonban naponta és testsúly-kilogrammonként 0,05 mg és 1 mg közötti hatóanyaggal kezeljük az állatokat. Az A 28695-jelű antibiotikumok előállítását a következő példákkal szemléltetjük. 1. példa Az A 28695 előállítása rázott tenyészetben Az A 28695-jelű antibiotikumot termelő Streptomyces albus NRRL 3883 törzs spóraszuszpenziójával a következő összetételű ferdeagar-tenyészetet oltjuk: Dextrin 700* 10,0 g N—Z-amin A** 2,0 g Húskivonat 1,0 g Élesztőkivonat 1,0 g Agar 20,0 g Desztillált víz 1 liter 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 * Holland gyártmányú burgonyadextrin. ** Sheffield Chemical Co., Division of National Dairy Products Corp., Norwich, New York. 65 Az NRRL 3883-jelű törzs spóraszuszpenziójával oltott tenyészeteket 30 °C hőmérsékleten 4—6 napon át inkubáljuk. A spórázó telepekkel borított táptalajról desztillált vízzel lemossuk a spórákat, így vizes szuszpenziót kapunk. Egy ml spóraszuszpenzióval 100 ml, a következő összetételű steril táptalajt oltunk: Glükóz Szójaliszt Kukoricaliszt CaCOs NaCl Csapvíz 15,0 g 15,0 g 5,0 g 2,0 g 5,0 g 1 liter A beoltott táptalajt 24—28 órán át 30 °C hőmérsékleten 5 cm kitérésű percenként 108-at forduló rázóasztalon inkubáljuk. Ezután 5 ml inokulummal 100 ml, 500 ml-es Erlenmeyer-lombikban sterilezett, következő összetételű táptalajt oltunk: Szójaliszt 15,0 g Kazein 1,0 g NaNOs 3,0 g Glükóz-szirup 20,0 g Csapvíz 1 liter A beoltott táptalajt 42—72 órán át 25—30 °C hőmérsékleten 250 percenkénti fordulatszámú rázóasztalon rázatjuk. A táptalaj pH-ja a fermentáció végén 7,0. 2. példa Az A 28695 előállítása fermentorban Az A 28695-jelű antibiotikumokat termelő törzset a következő összetételű ferdeagaron tartjuk fent: Dextrin 10,0 g Élesztőkivonat 1,0 g Enzimesen hidrolizált kazein 2,0 g Húskivonat 1,0 g CoCl2 . 6H 2 0 0,01 g Agar 20,0 g Desztillált víz 1 liter A táptalaj pH-ját nátriumhidroxid oldattal 7,0-re állítjuk be, majd 7,5—10 atmoszféra nyomáson, 30 percen át gőzzel (autoklávban) sterilezzük. A táptalaj pH-ja sterilezés után 6,9. Az agart az A 28695 antibiotikumokat termelő Streptomyces albus NRRL 3883 törzzsel beoltjuk, majd 30 °C hőmérsékleten 10 napon át inkubáljuk. A spórázó tenyészetről steril desztillált vízzel spóraszuszpenziót készítünk. Egy-egy tenyészettel 250 ml-es lombikokban 7