166686. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, hipokalcémiás hatású dotriakontapeptidamidok előállítására
51 166686 52 51. BOC-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-OH 17,0 g BOC-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-OBzl vegyületet 340 ml dimetilformamidban melegítés közben oldunk. Szobahőmérsékletre hűtés után 3,4 g 10%-os palládiumszén katalizátort adunk hozzá, és hidrogénezzük. A redukció 4 óra alatt befejeződik. A katalizátor leszűrése után az oldatot nagy vákuumban bepároljuk. Éterrel háromszor eldörzsölve egy vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat szerint egységes pentapeptid keletkezik. Op.: 181—183°; [ajD = -16,5° (c=2, dimetilformamidban) ; Rf7 = 0,65 (szilikagélen). 52. BOC-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys(Bzl)-N2H 2 -Z 9,2 g H-Cys(Bzl)-N2 H 2 -Z. hidroklorid vegyületet 300 ml frissen desztillált dimetilformamidban oldunk, 12,2 g BOC-Gly-Asn-Leu-Ser-lhr-OH vegyületet adunk hozzá, és szobahőmérsékleten oldódásig keverjük. Ezután az oldatot 0°-ra hűtjük, 3,28 ml trietilamin és 4,88 ml hidroxiszukcinimid 100 ml dimetilformamidos oldatát adjuk hozzá, továbbhűtjük — 22°-ra, és 4,36 g diciklohexilkarbodiimid 30 ml dimetilformamidos oldatát adjuk hozzá. Egy órán át — 22°-on keverjük, majd a belső hőmérsékletet lassan hagyjuk emelkedni, és még 3 napig szobahőmérsékleten keverjük, a kivált diciklohexilkarbamidot leszűrjük, és az oldatot nagy vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot etilacetát-5%-os citromsavoldat eleggyel elkeverjük, a csapadékot vízzel mossuk, vákuumban szárítjuk, száraz éterrel elkeverjük, szűrjük, és nagy vákuumban szárítjuk. Op.: 173—178°; [oc]D =-25,5° (c=2, dimetilformamidban); Rfl = 0,21 (szilikagélen). 53. H-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys(Bzl)-N2H r Z. trifluoracetát 13 g BOC-Giy-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys(Bzl)-N 2H 2 -Z vegyületet 130 ml 90%-os trifliiorecetsavban oldunk, és az oldatot 2 órán át 22°-on állni hagyjuk. Ezután az oldatot beszűkítjük, a maradékot éterrel háromszor elkeverjük, és vákuumban nátriumhidroxid felett szárítjuk, Op.: 159—161°; Rf6=0,63 (szilikagélen). 54. BOC-Cys(Bzl)-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys(Bzl)-NJHJJ-Z 6,69 g BOC-Cys(Bzl)-OSU és 12,2 g H-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys(Bzl)-N2 H 2 -Z. trifluoracetát vegyületet oldunk 100 ml dimetilformamidban. 150 mmól trietilamin/100 ml dimetilformamid koncentrációjú oldatból annyi trietilamint csepegtetünk hozzá, hogy a reakcióelegy pH-ja 6,4 legyen. Az oldatot 3 napig szobahőmérsékleten keverjük, majd vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot kétszer 300 ml etilacetáttal, majd 150 ml etilacetát-30 ml 5%-os citromsavoldat eleggyel háromszor elkeverjük, vákuumban szárítjuk, és dimetilformamid-etilacetát elegyből kikristályosítjuk. Op.: 191—193°; [a]D = - 31,5° (c = 2, dimetilformamidban); Rf8 = 0,35 (szilikagélen). 55. BOC-Cys-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-N2H 3 6 g BOC-Cys(Bzl)-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys(Bzl)-N2H 2 -Z vegyületet 40°-on 700 ml száraz folyékony 5 ammóniában oldunk. Keverés közben az ammónia forráspontján 973 mg nátriumot adunk hozzá úgy, hogy a reakcióelegy színe csak világoskék legyen. 25 perc múlva a reakció teljesen befejeződik. Még 10 percig keverjük a kék színeződés megtartása mellett, majd 10 2,4 ml jégecetet adunk hozzá, és nagy vákuumban (kb. 1 Hgtnm-en) szárazra pároljuk. A maradékot 12 ml vízzel, 3,2 ml jégecettel és 20 ml etilacetáttal egy órán át 0°-on keverjük, a csapadékot leszűrjük, kétszer 10 ml 1%-os ecetsavoldattal és egyszer 10 ml etilacetáttal 15 mossuk, és nagy vákuumban szárítjuk. R ß = 0,65 (szilikagélen). 20 56. BOC-Cys-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-N 2H 3 1,0 g BOOCys-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-N 2H 3 vegyületet oldunk 100 ml dimetilformamidban és 500 ml 25 vízben, mely 1,23 mólekvivalens sósavat tartalmaz. 3,7 ml 0,43 n káliumhidroxidoldattal az oldat pH-ját 6,8-ra állítjuk be. A pH-érték tartása mellett 90 perc alatt keverés közben egyidejűleg 247 ml 0,01 mólos káliumferricianidoldatot és 4,9 ml 0,43 n káliumhid-30 roxidoldatot csepegtetünk hozzá. Még 90 percig szobahőmérsékleten keverjük, majd 0,7 ml jégecettel az oldat pH-ját 4,0-re állítjuk be. Ezután az oldatot 50 ml acetátciklusú Dowex-2-X8 ioncserélővel, majd 13 ml H+ -ciklusú Dowex-50W-X8 ioncserélővel keverjük, szűrjük 35 és szárazra pároljuk. A maradékot 50%-os t-butanolban oldjuk, liofilizáljuk, és nagy vákuumban szárítjuk. A termék kb. 15% káliumacetátot tartalmaz. Szilikagélen végzett vékonyrétegkromatográfiás eljárással vizsgálva egységes; Rf5 = 0,63, R f6 =0,70, R f7 = 0,75. 57. H-Leu-Gly-OEt. hidroklorid 14 g Z-Leu-Gly-OEt vegyületet [J. R. Vaughan és R. L. 45 Osato, J. Am. Chem. Soc. 73, 5553 (1951) szerint előállítva] 150 ml abszolút etanolban oldunk, 11,5 ml 6,9 n etanolos sósavoldatot adunk hozzá és 2,8 g 10%-os palládiumszén katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. Egy óra után a katalizátort leszűrjük, és vákuumban 50 40° fürdőhőmérsékleten bepároljuk. A maradék olajos alakú, melyet közvetlenül tovább feldolgozunk. Rfl = 0,50 (szilikagélen). 58. BOC-Nle-Leu-Gly-OH 55 4,63 g BOC-Nle-OH vegyületből, 282 ml trietilamínból és 1,9 ml klórhangyasavetilészterből 50 ml tetrahidrofurános közegben az 1. pont szerint vegyes anhidridet állítunk elő, és ezt 5,05 g H-Leu-Gly-OEt. 60 hidroklorid 50 ml tetrahidrofurános oldatával reagáltatjuk. A maradékot etilacetát-petroléter (40:60) elegyből átkristályosítjuk. Op.: 126—128°; [aß 0 = — 28,3° (c = 1, dimetilformamidban). Szilikagélen végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat során Rfl = 65 0,7. 26
