166646. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-amino-3-metil-CEF-3-EM-4-karbonsav és észtereik előállítására

13 166646 14 8. táblázat Megmaradó szubsztrát 7-amino-3-metil-cef-3--em-4-karbonsav 1. kísérlet 2. kísérlet 9 mg 21 mg 18 mg 11. példa Az „Institute for Fermentation, List of Cultures, Fourth Edition 1968" c. kiadvány 174. oldalán felsorolt valamennyi Escherichia törzsből (Id. 9. táblázat) egy oltókacsnyit 50 ml 7,0 pH-jú vizes tápközegbe oltunk, mely 1% húskivonatot, 1% peptont, 0,5% NaCl-t és 0,3% fenilecetsavat tartalmaz. A tenyészetet 16 órán át rázzuk 24 C°-on. A sejteket centrifugálással elkülönítjük, 50 ml hideg desztillált vízzel mossuk, azután 5 ml desztillált vízben szuszpendáljuk. A szuszpenzióhoz hozzáadjuk 100 mg 7-fenil-acetamido-3-metil-cef-3-em-em-4-karbonsav 5 ml 0,2 mólos, 7,5 pH-jú foszfátpufferrel készített oldatát. A reakcióelegyet 32 C°-on egy órán át rázzuk, majd a kapott 7-amino-3-metil-cef-3-em-4-karbonsavat L.P. Marrelli módszerével (Journal of Pharmaceutical Science, 54, 2173—72, 1968) kolorimetriásan meghatározzuk. A kapott eredményeket a 9. táblázatban foglaljuk össze. 9. táblázat Escherichia törzsek A 7-amino-3-metil-cef-3-em-4-karbonsav hozama (mg/m) Escherichia coli IFO-3044 <0.1 Escherichia coli IFO-3139 ~=0.1 Escherichia coli IFO-3240 <0.1 Escherichia coli IFO-3301 <0.1 Escherichia coli IFO-3302 <1.1 Escherichia coli IFO-3366 <=0.1 Escherichia coli IFO-3542 <4.50 Escherichia coli IFO-3543 4.56 Escherchia coli IFO-3544 <0.1 Ercherichia coli IFO-3545 <0.1 Escherichia coli IFO-3546 <0.1 Escririchia coli IFO-3806 <0.1 Escherichia coli IFO-12433 <0.1 Escherichia coli var. communior IFO-3546 3.44 Escherichia coli var. communior IFO-3547 3.22 Escherichia coli var. communior IFO-3548 <0.1 Escherichia coli var. communior IFO-3549 <0.1 Escherichia coli var. communior IFO-3550 3.84 Escherichia coli var. communior IFO-3552 <0.1 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás 7-amino-3-metil-cef-3-em-4-karbonsav vagy e vegyület észtereinek előállítására, azzal jellemezve, 5 hogy egy 7-acilamido-3-metil-cef-3-em-4-karbonsavat vagy annak egy rövidszénláncú alkil-, alkiltioalkil-, alkilszulfenilalkil-, alkilszulfonilalkil-, halogénalkil- vagy benzilészterét, ahol a 7-acilamido-csoport acil-csoportja fenilacetil- vagy fenoxiacetil-csoport, egy Escherichia 10 nemzetségbeli mikroorganizmus törzs, mely Escherichia törzs, ha tenyészetét 0,25 mólos, 7,0 pH-jú foszfátpufferben oldott szubsztrátummal együtt 16 órán 28 C°-on rázzuk, a rázott keverék antibakteriális aktivitását a rázás kezdete előtti aktivitás 80%-ára vagy annál ki-15 sebb értékre csökkenti úgy, hogy a rázott keverék csökkentett antibakteriális aktivitása fenilacetilkloriddal való fenilacetilezéssel újra növelhető, mimellett a rázott keverék abszorpcióját 260 millimikron hullámhossznál a rázás kezdete előtti abszorpcióra vonatkoztatva 20 legalább 20%-ig megtartja, előnyösen az Escherichia coli IFO—3210, az Escherichia coli IFO—3467, az Escherichia coli var. communior IFO—3550, az Escherichia intermedia AHU—1412, az Escherichia coli IFO— 3542, az Escherichia coli IFO—3543, az Escherichia 25 coli var. communior IFO—3546, az Escherichia coli var. communior IFO—3547 vagy az Escherichia coli var. communior IFO—3550, vagy a Xanthomonas oryzae IFO—3312, Xanthomonas malvacearum IFO—3383, Bacillus pumilus IFO—12093, 30 Bacillus licheniformis IFO—12199, Pseudomonas solanacearum IFO—12510, Protaminobacter alboflavus IFO—13221, Mycoplana sp. IFO—13240, Aeromonas hydrophyla IFO—12634, Bacillus sp. ATCC—14552, Aureobasidium pullulans IFO—4464, Arthrinium phae-35 ospermum IFO—6574, Anthracobia melaloma IFO— 6985, Ascotricha chartarum IFO—6310, Aspergillus parasiticus IFO—4082, Aspergillus brevipes IFO— 5821, Acremonium potronii IFO—5706, Actinomucor elegáns IFO—4022, Alternaria longipes IFO—6149, 40 Aegerita Candida IFO—6988, Beauveria bassiana IFO—4848, Botryotinia fuckeliana IFO—5365, Byssochlamys fulva IFO—6307, Cunninghamella echinulata IFO—4445, Botryospheria ribis chromogena IFO— 4837, Colletotrichum dematium IFO—6703, Cylindro-45 cephalum aureum IFO—6807, Cercospora kikuchii IFO—6711, Ceratocystis piceae IFO—7644, Ceratocystis soerulesoens IFO—8668, Cephalosporium mycophilum IFO—6615, Chaetomium elatum IFO—6554, Chaetomium anahelicinum IFO—8389, Chrysosporium 50 verrucosum IFO—8279, Cephaloascus fragrans IFO— 7785, Corynespora smithii IFO—8162, Cylindrocladium penicilloides IFO—6784, Cylindrocarpon willkommii IFO—5995, Cladosporium cladosporoides IFO—6371, Coniochaeta tetraspora IFO—8526, Dactylaria mycop-55 hila IFO—6785, Diaporthe phaseolorum IFO—6707, Daedaleopsis styracina IFO—4910, Fusarium oxysporum IFO—4469, Fusarium roseum IFO—8503, Fusarium solani IFO—8509, Griphosphaeria nivalis IFO— 7444, Gibberella zeae IFO—7160, Glomerella cingulata 60 IFO—5257, Isaria kogane IFO—5299, Microascus desmosporus IFO—6761, Neurospora sitophila IFO— 4596, Pestaliopsis funerea IFO—5427, Pleospora herbarum IFO—6125, Pyrenophora graminea IFO—7507, Pseudoplea trifolii IFO—6681, Papularia sphaerosper-65 ma IFO—6574, Pellicularia filamentosa IFO—6523, 7