166412. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibiotikum előállítására
19 166412 A Streptomyces Sp. X—5108 törzs fiziológiai reakciói 20 4. táblázat Közeg Inkubációs idő (nap) Növekedés mértéke Fiziológiai reakció Szerves nitrát táptalaj 8 közepes, nem-spórás Nitrát-redukció és gáz nincs Szerves nitrát táptalaj 13 jó; sötét pigm. Nitrát-redukció és gáz nincs Zselatin (15%) 18 C°-on 5 megfelelő, sötét oldható pigm. Nincs zselatin elfolyósítás Zselatin (15%) 18 C°-on 12 megfelelő jó növ.; barna pigm; nem-sporas Enyhe elfolyósítás Pepton-vas agar (Kligler) 14 jó; spórázás enyhe Kromogén (melamin termelés) Lakmusz-tej 6 megfelelő felületi növ. Lakmusz színe változatlan; csomósodás vagy feltisztulás nincs Lakmusz-tej 13 megfelelő felületi növ. nem-spórás Szín enyhén barnás; csomósodás vagy feltisztulás nincs Dorset tojás agar 3 jó; enyhén fehér spórázás — Dorset agar 10 nagyon jó növekedés; főként spórás, gyengén szürke Enyhén sötét pigment 5. táblázat A Streptomyces sp. X—5108 törzs szenes nitrogénforrás hasznosítása Inkubációs idő 14 nap; hőmérséklet 28 C° Szénforrás sitás1 Szénforrás sítás1 1-arabinóz 1 Szaccharóz 3 1-ramnóz 3 Raffinóz 3 d-xilóz 3 Keményítő 0—1 d-mannit 3 d-ribóz 3 i-inozit 3 d-galaktóz 3 Glükóz 3 d-mannóz 3 Fruktóz 3 Cellobióz 3 Laktóz 3 Acetát 3 Maltóz 3 Citrát 2 Dextrin 0 Malát 2 Dulcit 0 Oxalat 1 Eritrit 0 Szalicilát 0 Szorbit 1 Szukcinát 2 Glicerin 0—1 Tartarát 0 Fenol (0,1%) 0 Nitrogén-forrás Hasznosítás1 (NH4 ) 2 S0 4 1 NaN03 1 Nátriumnitrit 1 Acetamid 1 Aszparagin 3 Tirozin 3 dl-triptofán 2 Negatív kontroll (azaz nitrogénforrás nélkül) 0—1 3 =jó hasznosítás; 2 = megfelelő hasznosítás; 1 = gyenge hasznosítás; 0 = nem hasznosítja. 25 30 35 40 45 50 55 60 65 Negatív kontroll, nem ad szénhasznosítást. Az inokuláláshoz desztillált vizes spóra szuszpenziót alkalmazunk, melyet ferde paradicsom agárról veszünk. A szén- és nitrogén-vegyületek hasznosítását az alábbi alaptáptalajon határozzuk meg: KH2 P0 4 K2 HP0 4 MgS04 • 7 H2 0 CuS04 -5H 2 0 7H2 0 •4H2 0 FeS04 MnCl2 ZnS04 Agar Desztillált víz 7H,0 2,38 g 5,65 g 1,00 g 0,0064 g 0,0011g 0,0079 g 0,0015 g 15 g 1 liter A táptalaj pH-ját 6,8—7,0-ra állítjuk be. A szénforrás-hasznosítás meghatározása céljából szokásos nitrogénforrásként 2,64 g/l mennyiségben (NH4 ) 2 S0 4 -et adunk a táptalajhoz. A szénforrást 1%-os koncentrációban adagoljuk, kivéve a szerves savak nátriumsóit, melyeket 0,15%-os mennyiségben alkalmazunk. A nitrogénforrás-hasznosítás meghatározása esetén szintetikus agar alap-táptalajt + 1% keményítőt + + 0,1 g nitrogén/liter koncentrációban nitrogénforrást alkalmazunk. 6. táblázat A táptalaj összetétel változtatásának hatása a Streptomyces X—5108 törzs antibiotikum termelésére rázott lombik fermentációnál. Valamennyi táptalaj 1% dextrint, 0,1% K2 HP0 4 -t és 0,1% CaC03 -t tartalmaz. 1 ml Streptomyces sp. X—5108 spóra-szuszpenziót 100—100 ml táptalajba oltunk. Szám A nitrogén forrásokat 1 % cc-ban adagoljuk, kivéve a 17. és 23. kísérlet esetében (2%) Kor (nap) Antibiotikum aktivitás E egység/ /ml* 1. 2. 3. 4. Húsliszt hidrolizátum BY—100 (Commercial Solvent Co.) Proflo (Traders Oil Mill Co.) Zabliszt (Quaker Oats Co.) 6 5 5 5 50 45 23 32 10
