166365. lajstromszámú szabadalom • Eljárás oxigéntartalmú vizes oldatban lévő eltérő koncentráciíjú anyagok kvantatív meghatározására
166365 9 10 nek elvét a 4. ábra mutatja. All hengeres tolattyú 18 furatának átmérője 2 mm, hossza 10 mm. Az adagoló üvegből készült. A berendezés egyes részeit 1 mm átmérőjű szilikoncsövek kötik össze. A puffer 18 mmól kaliumjodidot, 7,5 mmól ammóniumheptamolibdátot és 800 mmól nátriumkloridot tartalmazó, 6,0 pH-értékű, 0,2 mólos káliumfoszfát-puffer. Az adagolóba kb. 1 percenként meghatározott glükóztartalmú szérummintákat juttatunk. Az 1—3. minták glükóztartalma egyenként 100 mg glükóz/100 ml szérum, a 4. mintáé 200, az 5. mintáé 300, a 6. mintáé 400 és a 7. mintáé 500 mg/100 ml. A regisztrálóberendezésen felrajzolt mérési görbéket az 5. ábra szemlélteti. A kapott értékek a 6. ábrán kalibráló görbe alakjában vannak ábrázolva. Az író szerkezet nulla-vonala feletti csúcs magassága a minta glükóztartalmával arányos. 2. példa Húgysavat határozunk meg urikáz alkalmazásával az alábbi egyenlet szerint: húgysav + 2 H2 0 + Q2 urikő * allantoin + H 2 0 2 + C0 2 Az 1. példában ismertetett eljárást és berendezést használjuk a húgysav meghatározására is. Az S oszlopot hordozóra felvitt urikázzal töltjük meg. Az oszlop 1 cm átmérőjű, töltési magassága 5 cm. A hordozóhoz kötött urikáz aktivitása 3 E/g. Az 1. példában leírt berendezést használjuk, de az áramlási sebesség 3,5 cm/mp, az átfolyató kamra belépő nyílásának átmérője 1 mm (2. ábra). Az adagoló szerkezetének elvét a 4. ábra szemlélteti. Ali hengeres tolattyú 18 furatának átmérője 2,5 mm, hossza 13 mm. Az adagoló üvegből készült. A berendezés egyes részeit 1 mm átmérőjű szilikoncsövek kötik össze. Pufferként 6,5 pH-értékű 0,2 mólos borátpuffert használunk, amelyben 600 E/ml aktivitású katalázt oldottunk. Az adagolóba kb. 6 percenként meghatározott húgysavtartalmú oldatot juttatunk. Az 1. minta 5 mg/100 ml húgysavat, a 2. minta 10 mg, a 3. minta 15 mg, a 4. minta 30 mg, az 5. minta 45 mg és a 6. minta 60 mg/100 ml húgysavat tartalmaz. A regisztráló-berendezésen felrajzolt mérési görbét a 7. ábra mutatja. Az így kapott értékek a 8. ábrán láthatók kalibráló görbe alakjában. Az író készülék nullavonala feletti csúcsmagasság a megfelelő minta húgysavtartalmával arányos. A fenti példából kitűnik, hogy a találmány szerinti eljárás hordozóhoz kötött, kisebb fajlagos aktivitású enzimmel is előnyösen elvégezhető. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás oxigéntartalmú vizes oldatban levő eltérő koncentrációjú anyagok kvantitatív meghatározására 5 oxidációval vagy redukcióval, oxigénátvivő enzimek jelenlétében és az oxigénkoncentráció változásának oxigént érzékelő elektróda segítségével végzett mérésével, azzal jellemezve, hogy a vizsgálandó anyagot tartalmazó oldatot előre meghatározott oxigénkoncentráció-10 jú pufferoldat konstans sebességgel folyó áramába, légbuborékmentesen, blokkszerűen, konstans áramlási sebesség mellett beadagoljuk, majd kötött enzimet tartalmazó hordozón átvezetjük, ezt követően pedig mérőcellához vezetjük. 15 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az elektródától távozó pufferoldatot a körfolyamatba visszavezetjük. 3. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a pufferoldat oxigénkoncent-20 rációját oxigéntartalmú gáz, illetve oxigénmentes inersgáz átáramoltatásával konstans értékre állítjuk be. 4. Az előző igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a vizsgálandó oldat blokkszerű adagolása során a pufferoldat-25 áramot megosztjuk, a részáramokat felváltva megszakítjuk és a vizsgálandó anyagot tartalmazó oldatot a megszakított részáramba juttatjuk. 5. A 4. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a vizsgálandó oldatot a meg-30 szakítás helyén túladagoljuk és a részáram megnyitásával a felesleget eltávolítjuk. 6. Berendezés az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás kivitelezésére, mely reakció térrel, konstans szállítóteljesítményű szivattyúval és a reakciótérrel csővezetékeken 35 keresztül összekapcsolt oxigént érzékelő elektródával, valamint regisztráló berendezéssel rendelkezik, azzal jellemezve, hogy a reakciótér hordozóhoz kötött enzimet tartalmazó oszlop (S), az oszlop (S) és a puffertartály (R) között pedig mintaadagoló (A) van elhelyezve. 40 7. A 6. igénypont szerinti berendezés kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a mérőcella (D) és a puffertartály (R) között visszaáramoltató vezeték van. 8. A 6. vagy 7. igénypont szerinti berendezés kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a mintaadagoló (A) leg-45 alább két, két vagy több furattal (17, 18) ellátott tolattyúval (11) felváltva záró furattal (13a, 15a; 12a, 14a) rendelkezik, és az egyik furat (18) a vizsgálandó anyagot tartalmazó oldatot szállító vezetékkel van öszszekötve. 50 9. A 8. igénypont szerinti berendezés kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a mintaadagoló (A) a furaton (18) keresztül van a szivattyúval (P) összekapcsolva. 7 rajz (5 ábra) A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 76.2748,66-42 Alföldi Nyomda, Debrecen — Felelős vezető: Benkö István igazgató