166235. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 5-metil-tetrahidrohomofolsav, 5,11-metilén-tetrahidrohomofolsav és 5,11-metenil-tetrahidrohomofolsav és alkáli fémsóik előállítására

7 166235 8 1. példa 5-Metil- tetrahidrohomofolsav-nátriumsó előállítása 3,0 g platinaoxidot 20-20 ml vízzel négyszer átmosunk, majd 130 ml vízben 40 Hgmm-es túlnyomás mellett szobahőmérsékleten hidrogénezünk, miközben az elegyet erélyes keverésben tartjuk. A redukciót 2 óra 50 perc alatt befejezzük. A művelet során 410 ml hidrogén abszorbeálódik. 5,5 g homofolsavat szuszpendálunk 200 ml vízben, majd ehhez 22 ml 1 mólos nátriumhidroxid-oldatot csepegtetünk (pH 7,0-ig). A nátriumhidroxid hozzáadását fény kizárása mellett keverés közben körülbelül 1 óra hosszat végezzük. A keverést egy további óra hosszat folytatjuk, majd az %y kapott sárga színű oldatot a fenti hidrogénező edénybe visszük. A hidrogénezést 40 Hgmm-es túlnyomással végezzük. A művelet során 590 ml hidrogén abszorbeálódik. A hidrogénezés 4 óra és 50 perc alatt befejeződik. A reakcióelegyet argon-gáz védelme alatt, üvegszűrőn szűrjük, majd a szűrletet egy argon gázzal átöblített három nyakú 2 literes edénybe visszük. A reakcióelegyhez, 2,9 ml 37%-os formaldehidoldatot viszünk. A reakcióelegyet argon gázzal átöblítjük, majd 55°C-ra felmelegítjük. A műveletet fény kizárása mellett keverés közben végezzük. A reakcióelegyhez gyorsan 90 ml 1,0 mólos nátriumbórhidridoldatot adunk, majd az elegyet 55°C-on 2 óra hosszat hökezeljük. 2 óra elteltével a hidrogéngáz fejlődése gyakorlatilag megszűnik. A reakcióelegyet szobahőmérsékletre lehűtjük, 8 ml merkaptoetanolt adunk hozzá és a kapott világos sárga színű oldat pH-ját jégecettel 3,8-ra állítjuk. A képződő zavaros oldatot hűtőszekrényben 3°Con egy éjszakán át állni hagyjuk. A szennyező anyagokat szűréssel elkülönítjük, majd a halvány sárga színű szűrletet 500 mg aktív szénnel (Norit A) 20 percig keverjük, és szűrjük. Csökkentett nyomás alatt az oldatot bepárolva viszkózus olajat kapunk. Az olajos maradékot 900 ml hideg etanollal alaposan eldörzsöljük, és az így kapott szuszpenziót hűtőszekrényben 1 óra hosszat tartjuk. Ezt követően a szuszpenziót további 1 óra hosszat keverjük, miközben az elegyet jéggel hűtjük. A kapott fehér pelyhes csapadékot Büchner-tölcséren összegyűjtjük, hideg etanollal ismételten mossuk, 5 óra hosszat vákuumban szárítjuk, majd vákuumban tároljuk. Hozam: 4,05 g. Az így kapott termék ultraibolya spektruma: Xmin Xmax Xmin Xmax pH 1 245 266 285 291 pH 7 247 291,5 pH 13 246,5 287,5 Vékonyréteg kromatográfia: cellulózon, oldószer: 0,1 mólos foszfát-pufferoldat, pH 7; 1% merkaptoetanol; Rf.:0,80 Analízis * számított: C = 45,5%; H = 5,25%; N = 17,0%; Na = 8,3%; talált: C = 45,4%; H = 4,8%;: N = 17,7%;Na = 8,49 2. példa 5,11-Metilén -tetrahidrohomofolsav-nátriumsó előállítása 3,2 g platinaoxidot négyszer vízzel mosunk, majd 5 3 óra 10 perc alatt hidrogénezzük, amikor 595 ml hidrogén abszorbeálódik. 5,5 g homofolsavat hidrogénezünk a redukált platina-katalizátor alkalmazásával. A műveletet 4 óra 10 perc alatt végezzük; hidrogénabszorpció: 600 ml. A terméket argon gáz 10 védelme alatt leszűrjük, majd 1,6 ml formaldehidet adunk hozzá. A terméket liofilizáljuk és mélyhűtőben tároljuk. A következő nap a terméket vízben oldjuk, 16,5 ml formaldehid hozzáadása után argon gáz bevezetése 15 mellett 6 óra hosszat 55°Con hökezeljük. Ezt követően a reakcióelegyet szobahőmérsékletre lehűtjük, majd 20 percig 300 mg aktív szénnel (Norit A) keverjük. Keverés közben 30 ml ecetsav hozzáadásával a pH-t mintegy 3,5 értékre állítjuk. A csaknem fehér színű csapadékot összegyűjtjük, alkohollal mossuk, szárítjuk és vákuumban tároljuk. Hozam: 2,824 g. A kapott 5,11-metilén-tetrahidrohomofolsav-nátriumsót az alábbi adatok jellemzik: 25 Ultraibolya spektrum: X max X min Xváll pHl 278 255 307 pH 7 303 259 pH 13 295 260 3Q Vékonyréteg kromatográfia cellulózon; oldószer: 0,1 mólos foszfát-pufferoldat, pH 7; 1% merkaptoetanol; Rf.:0,95 Analízis: számított: C = 48,1%; H = 4,58%; N = 18,7%; « talált: C = 48,5%; H = 5,9%; N = 17,8%. 3. példa 40 5,11-Metenil- tetrahidrohomofolsav-nátriumsó elő-^ állítása 2,0 g tetrahidrohomofolsavat oldunk fel 200 ml hangyasavban és argon gáz bevezetése mellett 2 óra 45 hosszat 90° C-on hökezeljük. Ezt követően a reakcióelegyet szobahőmérsékletre hűtjük, és 30° Con csökkentett nyomás alatt bepároljuk. A maradék viszkózus olajat etanollal eldörzsöljük és egy éjjelen át hűtőszekrényben tároljuk. 50 A szuszpenziót jégen 30 percig keverjük, majd Büchner-tölcséren leszűrjük. A kapott szűrőlepényt hideg alkohollal többször átmossuk, vákuumban 2 óra hosszat szívatjuk és vákuumban egy éjjelen át kiszárítjuk. Hozam: 2,441 g. 56 Ultraibolya spektrum: min max min max pHl 266 289 298 324 pH 7 268 283 297 329 pH 13 241 255 60 Vékonyréteg kromatográfia: cellulózon, oldószer: 0,1 mólos foszfát-pufferoldat, pH 7,1% merkaptoetanol; Rf.: 0,60 (sárga fluoreszcencia). Analízis: számított: C = 44,37%; H = 4,54%; N = 16,49%; Na = 65 7,73%; talált: C = 44,44%; H = 5,02%; N = 14,84%; Na = . 4,10%. 4