166211. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-(halogénfenil- tioacetamido)- CEF-3-EM-4-karbonsav-származékok előállítására
5 166211 6 baktériumtenyészetet vihetünk. Ha a növekedés gátlásának pontos helye nem határozható meg, úgy a gátlási zóna kezdőpontja és a növekedési szakasz végpontja közötti távolság felezőpontját vesszük alapul. A vizsgálat során különböző mennyiségű antibiotikumot tartalmazó Petri-csészéket haszna- 5 lünk. 10 1. táblázat Koncentráció Petri-csésze jug/ml száma 200 1.és2. 100 3. és 4. 50 5. és 6. 20 7. és8. 10 9. és 10. 1 11. és 12. 15 20 A fent ismertetett módon előnyösen vizsgálhatjuk a penicillinek és cefalosporinok baktériumellenes hatását. A rezisztens Staphylococcus-ok ellen aktivitással rendelkező vegyületek vizsgálatakor, minden esetben, penicillint és stafcülint vagy prosztaflint, 25 vagy más kontroli-antibiotikumot tartalmazó kontroli-csészéket is vizsgálunk. A fent ismertetett gradiens-módszerrel az antibiotikumok között olyan különbségeket vehetünk észre, amelyek más, egyszerű szűrővizsgálattal nem derülnek 30 ki. Az antibiotikumok hatása között megfigyelt különbségek azután például az állat-terápiás vizsgálatok során igaznak bizonyultak. Ugy gondoljuk, hogy az agar-grádiens módszer alkalmasabb a hasonló antibiotikumok között fennálló különbségek kimuta- 35 tására mint az egyéb módszerek, és a Petri-csészékről készített fényképek megőrizhető bizonyítékokat jelentenek. A módszer különböző célokra, például kereszt-grádiens-mődszerré módosítható. A találmány szerinti eljárás kivitelezésére például a 40 következőkben felsorolt vegyületeket használhatjuk. A vegyületek neve után zárójelek között adjuk meg a fentiekben ismertetett módszerrel, meticiŰin-rezisztens Staphylococcus aureus-szal szemben meghatározott, jug/ml-ben megadott legkisebb növekedésgátló 45 koncentrációkat (vérszérum jelenléte nélkül 20% vérszérum jelenléte mellett). 3-karboniloximetil- 7-[2'(2",5"-diklórfenil-tio)acetamido]-3-cefém-4-karbonsav (4,1/1,7), Kn 3-[5'- (p-metoxifenil-l",3",4"-oxadiazol- 5"-il)- ÖU tiometil]-7- [2'-(2", 5"-diklórfeniltio)- acetamido]-3-cefém-4-karbonsav-nátriumsó (4,4/halvány gátlási gyűrűk), 3-[5'- (p-nitrofenil)- l",3",4"-oxadiazol- 2"- il-tio- Rt . metil]-7-[2'- (2",5"-diklórfeniltio). acetmaido]- 3-cefém-4-karbonsav- nátriumsó (3,9/>20); 3-(5' -fenil-l'^',4'-oxadiazol- 2'-iltíometil)-7-[2'-(2", 5"-diklórfeniltio)- acetamido]-3-cefém-4-karbonsav-diciklohexilaminsó(0,6/>l); Rn 3<1'- metü-l'H-tetrazol.5'-ütiometü)-7-[2'<3",5' ,,-diciklofeniltio) -acetamido]- 3-cefém-4-karbonsavdiciklohexilaminsó) (2,2/halvány gátlási gyűrűk); 3-[ 1 '-metil 1 *H-tetrazol-5 , -il-tiometil]-7-[2'(2',5'-diklórfeniltio) -acetmaido]- 3-cefém-4~karbon- g5 sav-diciklohexüaminsó (2,3/halvány gátlási gyűrű); HV- metil- lW-tetrazol-S'-il-tiometil)- 7-[2'(3,4-diklórfeniltio)- acetamido]-3-cefém- 4-karbonsav-diciklohexilaniinsó (2,4/>20); 3<1'- metil-1 *,H-tetrazol-5'-il- tiometil)- 7-[2'-2" ,4"-dikIór- 5"- fluorfeniltio)- acetamido] -3-cefém-4-karbonsav- diciklohexilaminsó (1,9/>20); 3<5'-metil-l'34'-tiadiazol-2'-il-tiometíl)-7-[2>(3»5»-á^klórfeniltio)-acetamido]-3-cefém4-karbonsav-nátriumsó (4,5/>20); 3<5'- metil-l-',3',4'-tiadiazol-2-ü- tiometü)- 7-[2'(2",5"- diklórfeniltio)- acetamido]- 3-cefém4-karbonsav-nátriumsó (1,8Í>1); 3-(5'- metil-l, ,3 , ) 4'-tiadiazol-2-il-tiometü)- 7-[2'(3",4"- diklórfeniltio)- acetamido]- 3-cefém-4-karbonsav- diciklohexilaminsó (l,2/>20); 3-(N- metflkarbamÜoximetil)-7- [2'<2",5"-diklórfeniltio)- acetamido]- 3-cefém4-karbonsav (5,5/18,2); Fentieken kívül a következő vegyületeket használhatjuk: 3<N- piridinometil)-7- [2'<2",5"-diklórfeniltío)acetamido]-3-cefém- 4-karbonsav, 3<N- piridinometil)- 7-[2'-(3"-fluor4"-klórferultio)- acetamido]-3- cefém4-karbonsav, 3<N- piridinometü)-7- [2'<3",5"-diklórfeniltio)acetamido]-3-cefém- 4-karbonsav, 3-azidometil -7- [2'-(2",5 "-diklórfeniltio)- acetamido]-3-cefém- 4-karbonsav, 3-azidometil -7- [2'<3",4"-diklórfeniltio)- acetamido ]-3-cefém-4- karbonsav, 3<aminotiokarboniltiometil) -7- [2'<2",5"-diklórfeniltio)- acetamido]- 3-cefém4-karbonsav, 3-(aminotiokarboniltiometil)- 7- [2'-(2",5"-diklófeniltio)- acetamido] -3-cefém-4-karbonsaY és 3-O'H- tetrazol-5'-il- tiometil)-7-[2, -(2",5"-diklórfeniltio)- acetamido]-cefém-4-karbonsav (6,8/>l), és ezek gyógyszerészeti szempontból elfogadható sói. A találmány szerinti eljárás során használt vegyületeket ismert eljárásokkal állíthatjuk elő. Az előállítás során kiindulási anyagként fermentációs úton előállított cefalosporin C-t használhatunk. A cefalosporin C-t ismert módon kezelve 7-aminocefalosporánsavat (7 ACA), az egyik úgynevezett cefalosporin alapvegyületet kapjuk. Ezt az alapvegyületet (7—ACA) a 7-aminocsoporton ismert eljárásokkal olyan acilezőszerekkel kezeljük, amelyek az előnyös, a 7-acfl-oldalláncban kialakítandó csoportokat tartalmazzák. A szokásosan használt acilezőszerek közül megemlítjük a megfelelő acilkloridot vagy acilbromidot és a reakcióelegyben a reakció pillanatában keletkező (in situ) alkil- vegyesanhidrideket. Az acilezési eljárások közül néhányat a következő példákban részletesen ismertetünk. Az acilezési reakciók reakciókörülményeit a 3 335 136 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban részletesen ismertetik. A fentiek szerint előállított halogénfeniltioacetamidocefalosporánsavat 60 C° hőmérsékleten 5 órán át visszacsepegő hűtő alkalmazása mellett melegítjük, amikor a megfelelő 3-(N— piridinometil)- származékot kapjuk, ezt például a 3 449 538 vagy 3 577412 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban megadott eljárás szerint különíthetjük el a reakcióelegyből. A halogénfenil-tioacetamido-cefalosporánsavat szerves oldószeres oldatában pH 7-en nátriumaziddal reagáltatva a megfelelő 3-azidometilszármazékká alakíthatjuk. A reakcióelegy pH-jának biztosítására dMtriumfoszfátból készült puffert használunk. Hasonlóképpen, a halogénfeniltioacetamidocefalosporánsav meleg oldatát nátriumditiokarbamát-3
