165992. lajstromszámú szabadalom • Eljárás izotiazol-származékok előállítására
5 165992 6 A terméket kloroformból átkristályosítva az olvadáspont nem változik. Analízis: C9 Hi 4 N 2 0 2 S képletre (Ms = 214,29) számított: talált: C = 50,44%, H = 6,6%, N = 13,0%, C = 50,5%, H = 6,8%, N = 12,9%. 3. példa 3-(N-metil-karbamoiloxi)-5-metil-1,2-tiazol. 29 g 3-hidroxi-5-metil-l,2-tiazolt, 0,2 g diazabiciklooktánt és 90 ml metilizocianátot adunk 290 ml tetrahidrofuránhoz. Szobahőmérsékleten az elegyet 2 óra hosszat keverjük. A képződött csapadékot szűréssel elkülönítjük, az anyalúgot beszárítjuk, a maradékot a fentiekben kinyert kristályokkal elegyítjük, majd az egészet izopropanolból átkristályosítjuk. Ily módon 33 g nyers 3-(N-metil-karbamoiloxi)-5-metil-l ,2-tiazolt kapunk (87% karbamát). A nyers terméket szilikagélen kromatografáljuk. Az eluáláshoz benzol-aceton-kloroform 1:1:1 arányú elegyét alkalmazzuk. (Op.: 153 C°). Analízis: C6 H 8 N 2 0 2 S képletre (Ms =172,21) C = 41,85%, N = 16,27%, C = 41,4%, N = 15,9%, H = 4,69%, S = 18,62%, H = 4,8%, S = 18,2%. számított: talált: 4. példa 3-(N-metfl-N-acetü-karbamoiloxi)-5-metil•1,2-tiazol. 20 g trietilamint, 23 g 3-hidroxi-5-metü-l,2--tiazolt, majd 27,2 g N-metil-N-acetü-karbamoilkloridot oldunk 100 ml tetrahidrofuránban. Az elegyet 15 percig keverjük, majd a keletkező trietilamin-hidroklorid csapadékot szűréssel elkülönítjük. A szűrletet csökkentett nyomás alatt bepároljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk. Az eluáláshoz metilénklorid-etilacetát 8 :2 arányú elegyét alkalmazzuk. 25 g cím szerinti vegyületet kapunk. (Op.: 130 C°). Analízis: C8 H, 0 N 2 O 3 képletre (Ms = 214,25) számított: C = 44,84%, H = 4,70%, N = 13,07%, S = 14,96%, talált: C = 45,9%, H « 5,0%, N = 13,4%, S = 14,3%. A 3-(N-metil-karbamoiloxi)-5-metil-l,2-tiazol (A vegyület) biológiai tulajdonságainak vizsgálata. La) Bakteriosztatikus hatás vizsgálata Aerobacter aerogenes alkalmazásával. A vizsgálathoz használt baktériumokat táptalajon szaporítjuk, amelyhez A vegyületet vagy egy kontroll vegyületet adunk. A bakteriosztatikus hatást értékeljük. Táptalajként húslevest alkalmazunk. A hatóanyagot 100, 75, 50, 40, 30 és 20 ppm 5 koncentrációban adagoljuk. A táptalajba Aerobacter aerogenes szuszpenziót oltunk le, és minden koncentrációértéknél két párhuzamos vizsgálatot végzünk. A tenyészetet 48 óra hosszat 37 C°-on termosz-10 táljuk, majd a baktériumszámot leolvassuk és ennek értékét a kezeletlen kontrollal összehasonlítjuk. A vizsgálatot párhuzamosan egy ismert biociddal, a Prosan-nal is elvégezzük (ez nátriumdimetil-15 ditiokarbamát és nátriumetilén-bisz-ditiokarbamát elegye). b) Baktericid hatás vizsgálata Aerobacter aerogenes alkalmazásával Egy baktériumtenyészetet 48 órás időtartamra 20 a vizsgálati anyaggal együtt termosztálunk, majd a baktericid hatást értékeljük. Szilárd táptalajra, különféle koncentrációban a vizsgálati anyaggal készült fenti oldatot visszük fel. 25 48 óra hosszat 37 C°-on inkubáljuk a baktérium tenyészetet, a baktériumnövekedés elmaradása igazolja a baktericid hatást. c)Az Aerobacter aerogenessel végzett bakteriosztatikus és baktericid hatás vizsgálatának 30 eredményei. hatóanyag ppm-ben bakteriosztatikus 35 hatás %-ban (A vegyület) Baktericid hatás %-ban (A vegyület) 40 bakteriosztatikus hatás %-ban (Prosan) 45 baktericid hatás %-ban (Prosan) 100 75 50 40 30 100 100 0 100 100 0 100 100 0 100 100 0 Il.a) Baktericid hatás vizsgálata Aerobacter aerogenes alkalmazásával (Papír-péppel végzett vizs-50 gálát). A papírpéppel együtt tenyésztett baktériumtenyészethez adva a vizsgálati anyagot, értékeljük ennek baktericid hatását. 55 12,5 g/l koncentrációjú, mechanikus megmunkálással előállított vizes papírpép szuszpenziót enywel elegyítünk. A szuszpenzióhoz Aerobacter aerogenes tenyészettel oltjuk be, majd 20 óra hosszat 60 37 C°-on inkubáljuk. A szuszpenzióból mintát véve megállapítjuk a ml-kénti csíraszámot. A szuszpenziót elosztva az egyes részletekhez 200, 100, 50 és 12,5 ppm koncentrációban adjuk a vizsgálati anyagot. Az elegyet ismét 37 C°-on 65 termosztátba helyezzük. Ezt követően 1, 4 és 7 3
