165926. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nigericin-tartalmú fermentlé előállítására mikrobiológiai úton
5 165926 6 A táptalajba a fentieken kívül a következő komponenseket mértük be: glicerin 150g CaC03 25 g NaCl 15 g FeCl3 0,29 g KH2 P0 4 3g polipropilén--glikol habgátló 3g deszt. víz 5000 ml pH 7,0-7,2 sterilezés előtt, a percenkénti fordulatszám 500. Az átáramoltatott levegőmennyiség 7 l/perc. A habzás gátlására polipropilénglikol-alapú habzásgátlót alkalmazunk. A fermentáció hőmérséklete 28 C°. Az 1,0% nitrogénforrást tartalmazó tenyészetekben a 20. órától kezdve erős növekedés figyelhető meg, ami a 60. óra körül éri el a maximumot. Ezután a micélium fragmentálódik és gyenge szekunder növekedés következik, ami egybeesik a táptalaj felhasználható nitrogénforrásának kimerülésével. Az antibiotikum termelése az 50. és 60. óra között kezdődik. Ezt biológiai értékméréssel követjük, a szokásos módon, Bacillus subtilis ATTC 6633 jelű tesztorganizmussal szemben mérve. A termelés maximuma a 140. óra körül mérhető. 2. példa Az 1. példában leírt módon készült rázott lombikos tenyészettel 100 liter hasznos térfogatú 15 saválló fermentort oltunk, majd 25—35 órát fermentálunk. Az inokulum ellenőrzése után 100 és 1000 liter hasznos térfogatú saválló acél fermentort oltunk. Az inokulum térfogata a főfermentációs táptalaj 5%-a. A főfermentációs 20 táptalaj szerves nitrogénforrás- és Co++ -ion-összetételét a 2. táblázatban adjuk meg. Ugyanitt jelezzük a 100, illetve 1000 literes készülék maximális nigericin-koncentrációját. 2. táblázat Kísérlet Szerves nitrogénforCo*+ -kon-Fe++ -kon-Nigeri cinsorszáma rás-koncentráció centráció centráció koncentráció % gamma/ml gamma/ml gamma/ml 100 üt. 1000 lit. 1. 1,0 20,0 1540 2240 2. 1,5 20,0 1240 1980 3. 2,0 20,0 1080 1220 4. 3,0 20,0 75 5. 1,0 3,2 20,0 2200 3210 40 A táptalaj további összetétele: glükóz 3,0% KH2 P0 4 0,1% CaC03 0,5% pálmaolaj 0,1% NaCl 0,3% > A pH-t sterilezés előtt 7,0-7,2-re állítjuk be. 45 A sterilezést 40 percen át, 122 C°-on célszerű végezni. A glükóz külön sterilezendő. Habzásgátióként pálmaolajat használunk. A keverést és a levegőztetést úgy kell beállítani, hogy a szulfitoxidációs érték a fermentáció egész ideje alatt í0 2,0 mM/02 /l/perc körül legyen. Amennyiben a pH 7,8-7,9 fölé emelkedik, a további emelkedést steril glükóz adagolásával akadályozzuk meg. Szabadalmi igénypont: Eljárás nigericin-tartalmú fermentlé előállítására mikrobiológiai úton, ahol a fermentációt előfermentáció közbeiktatása után, komplex fehérjét, szerves szénforrást és szervetlen sókat tartalmazó táptalajon, Streptömyces albus (MNG-105) törzzsel aerob körülmények között végezzük, azzal jellemezve, hogy a fermentációt 0,8—1,4%, előnyösen 1,0-1,2% komplex fehérjét és 1-6 gamma/ml, előnyösen 3,0—3,5 gamma/ml Co++-iont tartalmazó táptalajon végezzük. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 766005 - Zrínyi Nyomda
