165659. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kanamycin származékok előállítására

5 165659 6 anhidrideket, így a sav, alkil- és arilszulfonsavak és gátolt savak, így difenilecetsav rövidszénláncú alifás monoésztereiből készített vegyes anhidrideket. Ezen kívül valamely savazidot vagy valamely tioészter aktív észterét (például p-nitrofenollal, 5 2,4-dinitrofenollal, tiofenollal, tioecetsawal képezett észterét) is használhatjuk vagy magát a szabad savat kapcsolhatjuk a XV általános képletű kanamycin-származékkal, miután először a szabad savat N,N'-dimetilkloroformíniumkloriddal reagál- 10 tattuk (1008170 számú Nagy-Britannia-i szabadalmi leírás és Novak és Weichet, Experientia XXI/6, 360 /1965/) vagy enzimek vagy N,N'-karbonüdiimidazol vagy N,N'-karbonilditriazol [Sheehan és Hess, J. Amer. Chem. Soc, 77, 15 1067 (1955)] vagy. alkinilamin-reagens [Buijile, R. és Viehe, H. G.: Angew. Chem., International Edition 3, 582 (1964)] vagy keténimin-reagens [Stevens, C. L. és Monk, M. E.: J. Amer. Chem. Soc. 80, 4065 (1958)] vagy valamely izoxa- 20 zoliumsó-reagens [Woodward, R. B., Olofson, R. A. és Mayer, H.: J. Amer. Chem. Soc, 83, 1010 (1961)] alkalmazásával. A savkloriddal egyenértékű ezenkívül a megfelelő azolid is, azaz a megfelelő sav olyan amidja, ahol az amid nitrogénatomja 25 valamely kváziaromás öttagú, legalább 2 nitrogénatomot tartalmazó gyűrű tagja, azaz imidazol, pirazol, triazol, benzimidazol, benztriazolgyűrű és azok szubsztituált származékainak tagja lehet. Valamely azolidot például úgy állíthatunk elő, 30 hogy N,N'-karbonildiimidazolt ekvimoláris arányokban szobahőmérsékleten valamely karbonsavval hozunk reakcióba tetrahidrofuránban, kloroformban, dimetilformamidban vagy valamely hasonló közömbös oldószerben, így gyakorlatilag 35 kvantitatív hozammal kapjuk a karbonsavimidazolidot széndioxid és 1 mól imidazol felszabadításával. A dikarbonsavak diimidazolidokat adnak. Az imidazol melléktermék leválik és elkülöníthető és az imidazolid kinyerhető, ezt a műveletet 40 azonban nem szükséges elvégezni. Ezek a reakciók jól ismertek az irodalomból (3 079 314, 3 117 126 és 3 129 224 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás és 932 644, 957 570 és 959 054 számú Nagy- 45 Britannia-i szabadalmi leírás). Az A) lépésben a 6'-helyzetben védett aminocsoportot tartalmazó kanamycint előnyösen úgy állítjuk elő, hogy 1 mól 6'-helyzetben védett aminocsportot tartalmazó kanamycinre számítva 1 50 mól vagy annál kevesebb acilezőszert alkalmazunk. Ha az acilezőszer arányát növeljük, a kívánt közbenső terméket alacsonyabb hozammal kapjuk, mert meggyorsulnak a mellékreakciók, amelyek poliacil-származékot vagy származékokat hoznak 55 létre mint szennyezéseket. Mint a legtöbb kémiai reakciónál, itt is alkalmazhatunk a fentiekben megadott hőmérséklettartománynál magasabb vagy alacsonyabb hőmérsékleteket is. Abban az esetben azonban ha 60 50C°-nál lényegesen magasabb hőmérsékletet alkalmazunk, csökken a kitermelés, mert nagyobb mértékűek a mellékreakciók. A IVb képletű vegyület, az l-(L-)-(-7-amino-ahidroxibutiril)-kanamycin A, kitűnő antibakteriális 65 aktivitással rendelkezik, amely felülmúlja a kanamycin A hatását. Az alábbi két táblázatban a kanamycin A és a IVb (BB-K8) képletű vegyület számos gram-pozitív és gram-negatív baktériummal szemben mutatott minimális gátló koncentrációját adjuk meg a Steers-féle agar-hígításos módszerrel (I. táblázat) és a kétszeres hígításos módszerrel (II. táblázat) mérve. Az I. táblázatban megadott eredményeket Mueller—Hinton-féle agar-közegben és a II. táblázatban megadott eredményeket szívinfúzió-közegben kaptuk. I. Táblázat Minimális gátló koncentráció (mg/ml) KanaIVb képMikroorganizmus mycin A letű ve(6-gyület -8198) (BB-K8) l.Alk.faecalis A-9423 16 8* 2. Alk. faecalis A-20648 125 125 3. Ent. cloacae A-9656 4 4 4. Ent. species A-20364 125 2 5. Ent. hafniae 1 A-20674 1 1 6. E. coli A-0636 2 1 7. E. coli A-20664 16 4 8. E. coli A-20665 125 1 9. E. coli A-20507 32 2 10. E. coli A-20520 125 4 U.E. coli A-20365 125 1 12. E. coli A-20684 2 2 13. E. coli A-20682 125 2 14. E. coli A-20683 125 8 15. E. coli A-20681 125 2 16. E. coli A-I 5119 4 4 17. K. pneumoniae A—9867 4 4 18. K. species A-20328 125 2 19. K. species A-20330 32 32 20. K. species A-20634 125 4 21. K. pneumoniae A-20680 125 4 22. K. pneumoniae A-9977 1 1 23. Pr/ mirabilis A-9900 2 2 24. Pr. morganii A—15153 2 2 25. Pr. vulgaris A-9555 2 1 26. Pr. rettgeri A-9636 0,25 0,25 27. Pr. mirabilis A-20645 4 4 28. Pr. mirabilis A-20454 2 2 29. Providencia stuartii 2 1 A-20615 30. Providencia alkalifaciens 1 1 A-20676 31. Ps. aeruginosa A-20229 32 2 32. Ps. aeruginosa A-9843A 125 16 33. Ps. aeruginosa A-20653 125 32 34. Ps. species A-20601 125, 63 16 35. Ps. species A-20621 125 125 36. Ps. maltophilia A-20620 32 125 37. Sal. enteritidis A-9531 1 0,5 38. Sal. derby A-20087 125 1 39. Ser. marcescens A-20019 2 4 40. Ser. marcescens A-9933 4 8 41. Ser. marcescens A-20460 125 4 2 42. Ser. marcescens A—20459 4 16 3