165612. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mikroorganizmusok termelésére
7 165612 8 3. példa Ps. extorquans jellegzetes folytonos tenyésztése formaldehides sterilizálás alkalmazásával 5 A 2. példában használthoz hasonló fermentációs edényben 4 liter D2 közeget sterilizáltunk 120C°-on 20 percen át. A közeghez lehűlése után sterilis metanolt adtunk l,0súly/térf.% 1° koncentráció eléréséig. Ezután a táptalajt beoltottuk Ps. extorquans NCIB No. 9399 48-órás tenyészetének 20 ml-ével, és a közeget stacionárius állapot eléréséig (32 órán át) inkubáltuk. Ezután az edénybe folytonosan adagoltunk l,0súly/térf.% 15 metanolt és 0,25 súly/térf.% formaldehidet tartalmazó D2 közeget 50 ml/óra sebességgel. A fermentáció folyamán a tenyészet térfogatát 4 liter értéken, a hőmérsékletet 30C°-on a pH-t 1-mólos nátriumhidroxid-oldat hozzáadásával 6,4-es 20 értéken tartottuk. A közeget percenként 1300 fordulattal kevertük, és 3,5 l/perc sebességgel levegőt adagoltunk be. 2,4 g/l száraz súlyra számított sejtkoncentrációnak megfelelő állandó állapotot értünk el és 25 tartottunk fenn 1000 órán keresztül. Ez idő alatt a tenyészet nem szennyeződött, ami azt mutatja, hogy a formaldehid felhasználható arra, hogy a közeget sterilis állapotban tartsa jelentős időtartamokon keresztül. 30 4. példa Metán-hasznosító mikroorganizmus folytonos 35 tenyésztése formaldehides sterilizálás alkalmazásával S A metán-hasznosító Methanomonas sp. mikroorganizmus folytonos tenyészetét hoztuk létre D2 40 közeget tartalmazó 2-literes fermentációs edényben az alábbi körülmények között: 45 hőmérséklet 34 C° keverési sebesség 1200 ford./perc pH 6,7 1:1 arányú metán/levegő elegy adagolása 2 l/perc a D2 közeg adagolása 30 ml/óra A tenyésztés lefolyását az optikai sűrűség rendszeres mérése útján követtük. A kapott eredményekét a 2. ábrán mutatjuk be. Az ábrán az ordináta az optikai sűrűséget, az abszcissza napokban a tenyésztési időt adja meg. 4 napig tartó folytonos tenyésztés után a közeget kicseréltük olyan D2 közegre, amely 0,1 súly/térf.% formaldehidet tartalmazott (az ábrán D pont), és további két és fél nap eltelte után a közeg adagolási sebességét 46 ml/óra értékre növeltük (az ábrán E pont)." A 2. ábra alapján egyértelműen megállapítható, hogy a metán-fogyasztó mikdroorganizmusok folytonos tenyészetének közegéhez adagolt formaldehid nem gyakorol hátrányos hatást a tenyésztésre, és így a formaldehid-adagolás megfelelő módszert nyújt ilyen tenyészetek közegének sterilizálásához. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás egy szénatomot tartalmazó szerves vegyületet hasznosító mikroorganizmusok termelésére, ahol asszimilálható nitrogénforrásokat és lényeges ásványi sókat tartalmazó sterilis folyékony táptalajt beoltunk a mikroorganizmus tenyészetével, a mikroorganizmust egy szénatomot tartalmazó szerves vegyület és adott esetben gázalakú oxigénforrás jelenlétében tenyésztjük, és a mikroorganizmus növekedése közben friss sterilis táptalajt adunk a beoltott közeghez, azzal jellemezve, hogy friss táptalajként 0,1—10 súly/térf.% koncentrációban formaldehidet tartalmazó táptalajt használunk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosításí módja, azzal jellemezve, hogy metán- vagy metanol-fogyasztó mikroorganizmust termelünk. 3. A 2. igénypont szerinti eljárás fogynatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a mikroorganizmus Mathanomonas sp. vagy Pseudomonas extorquans NCIB No. 9399. 2 rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 4 756388 - Zrínyi Nyomda
