165408. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-helyettesített 7béta-(D-5-amino-5-karboxi-vaIeramido)-7-metoxi-cef-3-em-4-karbonsav-származékok előállítására

165408 létű antibiotikumok elegyének termelésére; ezeket a kultúrákat, az említett MA—2837 kultúrával együtt, az alábbiakban, a leírás „mikroorganizmusok" c. fejezetében részletesen ismertetjük. Az alábbiakban az (I) antibiotikumok elegyét, amely a fent említett két vegyületet tartalmazza, röviden 810A antibiotikumként fogjuk említeni. Az új antibiotikumok aktivitása A baktériumellenes terápiában igen komoly nehézséget képez a legtöbb antibiotikum esetében az antibiotikumnak az enzimek lebontó hatásával szembeni érzékenysége. Így pl. a G-penicillin számos Gram-pozitív és Gram-negatív mikroorganizmus ellen hatásos, de a penicillináz enzim jelenlétében oly alakokra bomlik, amelyek a legtöbb patogén mikroorganizmus ellen hatástalanok. E nehézség megoldásának egyik útját az olyan új antibiotikumok kifejlesztése képezte, amelyek a C-cefalosporinra jellemző cefem-magot tartalmazzák. A C-cefalosporiij rezisztens a penicillináz enzim lebontó hatásával szemben, ugyanakkor pedig hatásos Gram-negatív és Gram-pozitív baktériumok ellen; ez a vegyület azonban csupán mérsékelt aktivitással rendelkezik és léteznek olyan, a penicillináztól különböző enzimek, amelyek aktivitását lerontják. Ezeket az enzimeket cefalósporináz enzimeknek nevezik. A találmány szerinti eljárással előállítható (í) általános képletű antibiotikumok nemcsak a penicillináz, hanem a cefalósporináz enzimekkel szemben is rezisztensek. Ezek az új termékek emellett hatásosak mind Gram-negatív, fniiid Gram-pozitív baktériumok elleti, aktivitásuk mértéke, valamint az általuk leküzdhető mikroorganizmusok köré azonban eltérő a különböző vegyületek esetében. A 810A äritibiotikuih széles spektrumú hatóanyag, amely megközelítően egyenlő mértékbén hatásos Gram-negatív és Gram-pozitív baktériumok ellen. A szer in vivo aktivitása kiterjed pl. a következő Gram-negatív mikroorganizmusokra: Proteus vulgaris, Proteus mi räbilis, Salmonella püllofüm, Escherichia coli és ffifebsiéíla pneumoniae; ugyancsak in vivo hatásos a következő Gram-pozitív mikroorganizmusok elléh is: Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes és Diplöcoccus pneumoniae. A 8HOA antibiotikumot alkotó vegyületek sorában különösen előnyös a 7/^-(Ö-5-amlno-5--karboxí-valeramido)-3-(a-metoxi-p-szUÍfoxi-binnaimoiloximetil)-7-métoxi-céf-3-etia-4-karbonsav, vagyis az R helyén «-metoxi-p-szulfoxi-cinnamoiloxi-csoportot tartalmazó (I) képlétű vegyület, valamint énnek sói, pl. a nátriumsó. 35 vegyület szerkezeti képletét a csatölt rajz szerinti (Ic) képlet szemlélteti. E vegyületnek a cefalósporináz enzimekkel szembeni éllenállőképessége nagyobb a celálotinénál, emellett az (Ic) képletű vegyület egéren csekély toxikusságot mutat. Az enzimes lebontással szembeni ellenállóképessége felülmúlja a C-cefalosporinét is, emellett előnyös baktericid hatása van. Orális beadás esetén védelmet nyújt a Proteus vulgaris baktérium általi fertőzéssel 5 szemben; szubkután beadás esetén számos Gram-negatív és Gram-pozitív mikroorganizmus általi fertőzéssel szemben nyújt védelmet. iő Mikroorganizmusok A „810A" antibiotikumot termelő kultúra: A 810A antibiotikumot termelő mikroorganizmust eredetileg egyetlen kolónia alakjában különítet-15 ttik el égy talajmintából. Ezt a kolóniát az alábbi összetételű táptalajt tartalmazó lemezre vittük: 20 25 „A" tápközeg: élesztőkivonát dextróz agar desztillált víz 40 10,0 g 10,0 g 20,0 g 1000,0 ml, Néhány napi fejlődés után a mikroorganizmus a 81OA antibiotikumot termeli. Ezt az antibio-30 tikum-termelést ezután rázópalackokban is reprodukáltuk, és a termelt antibiotikumot különféle biológiai és kémiai vizsgálatok alapján jellemeztük, és megkülönböztettük az ismert antibiotikumoktól. A kapott vizsgálati adatoknak 35 az ismert antibiotikumok megfelelő adataival való összehasonlítása arra a megállapításra vizetett, hogy a 81ÖA antibiotikum új, eddig le ném írt anyag. A 810A antibiotikumot térrhélÖ törzs taxonómiája és morfológiája: A 8H0A antibiotikumot termelő mikroorganíz-45 must (MA—2837 kultúra) a Streptomyéfes griseus mikroorganizmus egy törzséként azonosítottuk. Az e meghatározás során alkalmazott tax*nőmíát a „Sergey's Mamiai of Determinative Bacteriology" 7. kiad., valamint S. A. Waksmah 30 „The Actinomycetes" c. művének (1961) 1 köteté ismerteti. Az e Művekben leírt módszert követve azt találtuk, hogy az MA—2837 törzs a Streptomyces griseus mikroorganizmusnak egy oly törzse, amely külső mejelenése, melänin-55 termelése és Szénforrás-hasznosítása szempontjából nagyon hasonlít a Streptomyces griséirius mikroorganizmusra, amint azt az „International Journal of Systemic Bacteriology" 7. kiad. (1957) isMérteti, minthogy két évvel e mű megjelenése 60 Után, 1959-ben a Streptoítiyees griseus kultúrákat két csoportra osztották. Azonban mind Waksmah szerint, mind pedig az „International Journal of Systemic Bacteriology" szerint a Streptomyces griseinus mikroorganizmus ,.a 65 Streptomyces griseus grizeint termelő törzse"