165268. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-(alfa-amino-alfa-fenil- acetilamino)- 3-metil-CEF-3-ÉM-4-karbonsav előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1972. III. 21. Elsőbbsége: Japán, 1971. III. 25. (46-16886) Közzététel napja: 1974. II. 28. Megjelent: 1977. VH.8. (TO-868) 165268 Nemzetközi osztályozás: C 07 d 99/24 C 12 d 13/10 Feltaláló: Abe Jinnosuke vegyész, Ohito-cho, Shizuoka-ken Watanabe Tetsuo vegyész, Yokohama-shí, Kanaga wa-ken Yamaguchi Tsutomu biokémikus, Ohito-cho, Matsumoto Kunio biokémikus, Nkayama-cho, Shizuoka-ken, Japán Tulajdonos: Toyo Jozo Kabushiki Kaisha cég, Ohito-cho, Shizuoka-ken, Japán Eljárás 7-(a-amino-a-fenil-acetüamino)- 3-metil-cef-3-ém-4-karbonsav előállítására 1 A találmány tárgya enzimes eljárás 7-(a-aminoa-fenil-acetilamino)- 3-metil-cef- 3-ém- 4-karbonsav- a továbbiakban „cefalexin" — előállítására egy I általános képletű 7-(a-amino- acetilamino)- 3-metil-cef-3-ém- 4-karbonsavból és egy II általános képletű fenüglicin-származékból Bacillus megaterium B—400 5 FERM—P748 mikroorganizmustörzsből származó enzim segítségével. Ezekben a képletekben A fenilacetil- vagy fenoxiacetil-csoportot M hidrogén- vagy alkálifématomot jelent, és R jelentése metil-, etü-, amino- vagy glicilcsoport. 10 Az I általános képletű vegyületek előállítását a 3 275 626 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás, a II általános képletű vegyületek előállítását a J. Am. Chem. Soc. 42* 2264 (1920) és az Org. Synth. _223L23 (1942) ismerteti. 15 Cefalexin előállítására már korábban ismeretes volt a 3 507 861 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban közölt eljárás, amelyben kiindulási anyagként egy 6-acilamido- szubsztituenst tartalmazó penicillinből indulnak ki, azt például metaper- 20 jódsawal oxidálják, majd a keletkezett szulfoxidot ecetsavanhidriddel vagy kénsawal melegítik. Kísérleteink szerint így 38% kitermelés érhető el. Az eljárás kiindulási anyaga eltér a találmányunk szerinti eljárásétól. 25 A 747 119 számú belga szabadalmi leírás szerint 2,2,2-triklóretil- 6/?-(N-terc-butoxikarbonil -D-aaminofenüacetilamino)- penicillanátot átrendeznek 2,2,2-triklóretil-7/3- (N-terc-butoxikarbonil-D-a -aminofenilacetilamino)- 3-metil-cef- 3-ém- 4- kar- 30 boxiláttá mintegy 25% kitermeléssel. A kiindulási anyag itt is már, mint a találmány szerinti eljárásban. A 747 118 számú belga szabadalmi leírás szerint 7/3-acilamino-3-metil-cef- 3-ém-4-karbonsav állítható elő mintegy 40% kitermeléssel 6ß -acilamino-penicillánsav-N-oxidból. Ezekkel az ismert eljárásokkal szemben a találmány szerinti eljárás nagyüzemi megvalósítása során eddig 65—75% kitermelést sikerült elérni. A reakció folyamán felszaporodó, az acilező reakciót visszaszorító fenilecetsav és fenoxiecetsav eltávolításával fokozódik a cefalexin kitermelése. A találmány szerinti eljárásban használt Bacillus megaterium B-400 FERM-P-748 törzs morfológiai jellemzői (ferde húsléagaros tenyészet, 30 €*-on 18 vagy 24 óra alatt): Pálcika alakú, 2,0—3,5 (x hosszú, 1,2—1,5 ß vastag sejtek, főleg hosszú láncok lekerekített végekkel burok nélkül. Mozgékony ostorok a vegeken. Gram-pozitív. A spórák (szójabab-agáron 30 C°-on 5 nap alatt) ovális alakúak, méretük 1,0-1,2 x-1,5—2,0 p helyzetük centrális vagy paracentrális, spóratartók nem duzzadtak. A mikroorganizmus aerób, 5 és 10, előnyösen 7,0 és 8.0 pH között, 7 és 45, előnyösen 28 és 35 C° között tenyészik, savállósága gyenge, 5,0 pH alatt nem tenyészik. Anaerob körülmények között nem nő glukózos táptalajon. Indolt nem termel, hidrogénszulfidot fejleszt. Denitrifikációs reakció: nem fejlődik gáz. A nitrátokat redukálja. Kataláz és ureáz képződés pozitív. Keményítőt hidrolizál. Citrátokat hasznosít. Lakmuszt elszintelenít, metilénkéket redu-165268
