165152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás baktérium-táptalajok és reagensek előállítására

165152 9 10 0,02 ml-nyi cseppjét adjuk a vizsgálandó baktériumszuszpenzió 0,1 ml-éhez. 5. példa Táptalaj kénhidrogén-képződés mikrodiágnosztikus módszer szerinti kimutatására. Az 1. sz. példa szerinti módon készített táptalaj 100,0 ml-éhez 1,5 ml 1%-os steril vizes ólomacetátot, 3,0 ml 20%-os vizes steril nátriumszulfit-oldatot, 0,3 ml 10%-os vizes steril nátriumszulfid-oldatot, 12,0 ml 20%-os vizes steril nátriumtioszulfát-oldatot, 1,5 ml 15%-os vizes steril ferroammóniumszulfátot, 1,5 ml 15%-os ferriammóniumcitrátot, 25,0 ml 2%-os vizes steril ferroszulfátot, 0,8 g steril dl-cisztein-port adunk, s az egészet steril desztillált vízzel 250,0 ml térfogatra egészítjük ki. A táptalaj pH-értékét steril módon 7,4—7,6 közöttire állítjuk be. E táptalajt — célszerűen műanyagampullába — töltjük. E táptalaj 0,02 ml-nyi cseppjét adjuk a vizsgálandó baktériumszuszpenzió 0,1 ml-éhez, amely szuszpenziót a gyakorlati bakteriológiai diagnosztikában szokásos és ismert módon ferde agáron, illetve érzékeny baktériumok esetén ferde csokoládé-agáron, vagy ferde véresagaron 4-16 óráig 37 C°-on előtenyésztett kultúrának 2—5 ml kútvízzel történő lemosásával kapunk, úgy, hogy a szuszpenzió opálos legyen. 6. példa Táptalaj indolképzés kimutatására. Az 1. sz. példa szerint készült táptalajból 100,0 ml-hez 2,0 g dl-triptofánt és 5,0 ml n nátronlúgoldatot adunk. Az oldatot a triptofán teljes feloldódásáig melegítjük. Az így készült anyag pH-értékét 8—8,5-re állítjuk be, majd steril desztillált vízzel 200,0 ml-re egészítjük ki, s 10,0 percig arnoldozzuk. E táptalajt -célszerűen műanyagampullába — letöltjük. E táptalaj 0,02 ml-nyi cseppjét adjuk a vizsgálandó baktériumszuszpenzió 0,1 ml-éhez. 7. példa Indol-reagens készítése. 150,0 ml metanolban 50,0 g p-dimetilamino-benzaldehidet oldunk, s az oldatot 100,0 ml tömény foszforsav-oldattal (puriss.) egészítjük ki és célszerűen műanyagampullába töltjük. Az oldattal 12 mm átmérőjű szűrőpapír-korongokat itatunk át, s e szűrőpapírt még nedvesen — indikátorként — a 6. példa szerinti mikrokultúrára helyezzük. 8. példa Táptalaj nitritképzés kimutatására. Az 1. sz. példa szerinti táptalaj 175,0 ml mennyiségéhez 12,5 g dextrózt, 25,0 ml steril, 10%-os vizes nátriumnitrát-oldatot és 25,0 ml 10%-os steril vizes káliumnitrát-oldatot adunk, majd az egészet steril desztillált vízzel 250,0 ml térfogatra egészítjük ki. Az így készült táptalajt 10 percig arnoldozzuk. E táptalajt — célszerűen műanyagampullába — töltjük. E táptalaj 0,02 ml-nyi cseppjét adjuk a vizsgálandó baktérium-szuszpenzió 0,1 ml-éhez. 9. példa Reagens nitritképzés kimutatásához 1,0 g a-naftilamint, 10,0 g szulfanilsavat, és 89,0 g borkősavat porítva összekeverünk. E por mintegy 0,01 g-ját 0,5 ml desztillált vízben feloldjuk és ezen oldat 0,02 ml-t (azaz: 2 cseppjét) adjuk a 8. példa Jsáérinti mikrokultúrához. « •-'• v\ • i • »'•. •" - •* • 5 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás baktérium-alaptáptalaj-koncentrátumok, illetve friss tenyésztő, dúsító, differenciáló -10 különösen politrop-, valamint különféle szubsztrát — továbbá elektív táptalajok és/vagy reagensek előállítására, az érzékeny baktériumok növekedéséhez szükséges növekedési faktorokként B-vitaminkomplex, X-faktor, glutaminsav, nikotinsav, valamint olaj-15 sav, továbbá nyomelemként jód, réz-ionokat és mangán-ionokat tartalmazó vegyületek felhasználásával, azzal jellemezve, hogy a táptalajt 30-38%-os töménységben, 10—25% szárazanyag-tartalommal készítjük el, s kívánt esetben ezen univerzális alaptáp-20 talaj-koncentrátumból a reakció, illetve a friss táptalaj jellegének megfelelő szubsztrát-anyagokat és indikátorokat is beépítve készítünk vizes hígítással friss tenyésztő, dúsító, differenciáló és elektív táptalajokat, mimellett kívánt esetben a táptalaj—koncentrátu-25 mot vagy a friss táptalajt műanyagampullákba töltjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja kiegészítő vizsgálatok részére alkalmas koncentrált alaptáptalaj, illetve friss differenciáló politrop táptalaj készítésére azzal jellemezve, hogy agárból — 30 célszerűen tablettázott agárból vagy agarporból -továbbá ismert kén-, és szénforrásokból készítünk 30-38% töménységű, 10-25% közötti szárazanyagtartalmú táptalajt, amelyből adott esetben kb. tízszeres mennyiségű vízzel hígítva készítünk firss differen-35 ciáló politrop táptalajt. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, primer baktérium-tenyészet előállítása céljára, illetve kiegészítő morfológiai vizsgálatok és/vagy szerológiai reakciók céljára alkalmas differenciáló táp-40 agar készítésére, azzal jellemezve, hogy 70 C° hőmérsékletű, 1—2%-os steril vizes agaroldatot kb. egyötöd mennyiségének súlyban megfelelő univerzális táptalaj-koncentrátummal keverünk össze, majd autoklávozzuk, végül Petri-csészékbe vagy kémcsövekbe 45 öntjük ki és merevítjük. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás változata táptalaj-koncentrátum előállítására, azzal jellemezve, hogy a hőre és esetleges oxidációra érzékeny táptalaj-komponenseket minimálisan a kisózás határán levő kon-50 centrációban tartalmazó vizes oldatot készítünk, ezt száraz agar-porra permetezzük, s az így kapott anyagot a nem érzékeny komponensekhez keverjük, végül porítjuk és homogenizáljuk. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás változata tápta-55 laj-koncentrátum előállítására, azzal jellemezve, hogy a hőre és oxidációra érzékeny komponenseket, illetve az ezeket oldatban tartalmazó frakciót kíméletes módon, célszerűen fagyasztva szárítással vagy porlasztásos módszerrel szárítjuk, s a nem érzékeny anyagok-60 hoz keverjük. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja friss differenciáló szubsztrát-táptalaj előállítására, azzal jellemezve, hogy az univerzális táptalaj -koncentrátumból vízzel hét-tízszeresre hígítással a 65 biológiai bontásra kerülő, azaz subsztrát-anyag fel-5