165152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás baktérium-táptalajok és reagensek előállítására

3 165152 4 járó kezelés — pl. autoklávozás — eltolja a táptalaj pH-ját, megsemmisíti redoxrendszerét. Ezért nem „poríthatók" jól a „politrop táptalajok", a „szubsztrát táptalajok" stb. (Irodalom: OTTE. Hans Jürgen: Leitfaden der medizinischen Mikrobiologie, 3. Aufl., Stuttgart, 1965; ALFÖLDI-IVÁNOVICS-RAUSS: Orvosi mikrobiológia és immunitástan, Medicina, 1969; 148.679 sz. magyar szabadalmi leírás; Bergey'-s Manual of Determinative Bacteriology, 7th Ed., 1957; SOLOMONS, G.L.: Materials and Methods in Fermentation, Academic Press, New York, 1969; GASIDA,L.E.: Industrial Microbiology, Wiley, New York, 1968; WILDFÜHR: Medizinische Mikrobiologie, Immunologie und Epidemiologie, a. Thieme Verlag, Leipzig, 1959). A jelenlegi portáptalajok választéka tehát nem kielégítő és annak ellenére, hogy egyébként jól tárolhatók, egyszerűen és könnyen felhasználhatók, alkalmatlanok az igényes baktériumok tenyésztésére. Nem lebecsülendő hátrány végül az, hogy a friss táptalajok kisforgalmú vagy hiányosan felszerelt (kórházi, rendelőintézeti, állategészségügyi), illetve különleges feladatú (tábori és állategészségügyi) laboratóriumokban, továbbá a jól ellátott és stabil laboratóriumokban, ha azok rendkívüli (földrajzi, közlekedési, klimatikus) viszonyok, vagy rendkívüli körülmények (háború, katasztrófa) között működnek, már nem megfelelően, vagy nem biztonságosan készíthetők el. A bakteriológiai laboratóriumi diagnosztikus munka könnyítésére és gyorsítására célul tűztük ki ipari méretben reprodukálható és általánosan használható (univerzális) alap-táptalaj-koncentrátumok készítését. Ugyancsak célul tűztük ki friss tenyésztő, dúsító, differenciáló táptalajok előállítását, főleg politrop, továbbá teszt-(szubsztrát)-táptalajok és reagenciák előállítását is. Ezekkel egyszerűsíthető és gyorsítható a bakteriológiai diagnosztikus .munka, s a biokémiai vizsgálatok mostoha körülmények között működő laboratóriumokban is nagy biztonsággal elvégezhetők. Alkalmazásuk a diagnózis idejét 2-4 napról 8—10 órára csökkenti. Végül készítettünk a találmány szerinti táptalajokból általánosan használható szárított, illetve porított „konzerv"-eket is. A találmány szerinti táptalajokat az érzékeny baktériumok növekedéséhez szükséges növekedési faktorok: B-vitaminkomplex, X-faktor, glutaminsav, nikotinsav, valamint olajsav; továbbá nyomelemek: jód, réz-ionokat és mangán-ionokat tartalmazó vegyületek felhasználásával készítettük el. A találmány szerinti eljárással az univerzális alaptáptalajt 30—38%-os töménységben, 10—25% szárazanyag-tartalommal készítjük el, s kívánt esetben ezen univerzális alaptáptalaj-koncentrátumból a reakció, illetve a friss táptalaj jellegének megfelelő szubsztrátanyagokat és indikátorokat is beépítve készítjük vizes hígítással a friss tenyésztő, dúsító, differenciáló és elektív táptalajokat. Rendkívül előnyösnek találtuk, ha a találmány szerinti táptalaj-koncéntrátumokat vagy a friss táptalajokat műanyagampullákba töltjük, s közvetlenül így használjuk fel, vagy a további felhasználásig így tároljuk. Koncentrált táptalajunk önmagában is használható, pl. kataláz és oxidáz képzés kimutatására. A táptalaj-koncentrátumból kívánt esetben kb. tízszeres vizes hígítással, a friss táptalaj jellegének megfelelő szubsztrát-anyagok és indikátorok segítségével gyakorlatilag az összes szükséges friss tenyésztő, dúsító, differenciáló és elektív táptalaj gyorsan és egyszerű 5 módon előállítható, minden egyéb kisegítő művelet (pl. szűrés, mérés, stb.) nélkül. Kiegészítő vizsgálatok részére alkalmas találmány szerinti koncentrált alaptáptalajt, illetve friss differenciáló politrop táptalajt úgy is készítünk, hogy agárból 10 — célszerűen tablettázott agárból vagy agarporból —, továbbá ismert kén-, és szénforrásokból készítünk 30-38% töménységű, 10-25% közötti szárazanyagtartalmú táptalajt, amelyből adott esetben kb. tízszeres mennyiségű vízzel hígítva készítünk friss differen-15 ciáló politrop táptalajt. Primer baktérium-tenyészet előállítása céljára, illetve kiegészítő morfológiai vizsgálatok és|vagy szerológiai reakciók céljára alkalmas differenciáló tápagart a találmány szerint úgy készítünk, hogy 70 C° 20 hőmérsékletű, 1— 2%-os steril vizes agar-oldatot kb. egyötöd mennyiségének súlyban megfelelő fenti univerzális táptalaj -kon centrátummal keverünk össze, majd autoklávozzuk, végül Petri-csészékbe vagy kémcsövekbe öntjük ki és merevítjük. 25 A tájékozódó biokémiai reakciók céljára ismert módon „magas-ferdére" merevített politrop táptalajt használunk úgy, hogy a táptalaj ferde felületén szétszélesztve és a magas rész aljáig leszúrva végezzük az inokulációt. E politrop táptalaj kitűnően jelzi a 30 pH-változásokat 5—9,5 érték között, továbbá a kénhidrogén-képzést, a gázképződést, s a növekedés aerob vagy anaerob jellegét, a színeződések rétegződésével a folyamatok oxidatív jellegét, s a pigment-képződést is. Rendkívüli előnye, hogy 37 C° hőmérsék-35 léten az összes banális baktériumra 6—12 órás inkubálás után értékelhető reakciót ad Ez az idő a (ritka) igényes baktériumok esetén sem haladja meg a 24 órát. A találmány szerinti egyik eljárásváltozat szerint 40 táptalaj-koncentrátumot univerzális alaptáptalajunkból oly módon készítünk, hogy a hőre és esetleg oxidációra érzékeny táptalaj-komponenseket (pl. karbamid, indikátorok, stb.) a lehető legnagyobb koncentrációban — ennek alsó határa a kisózás megindu-45 lása - tartalmazó vizes oldatot készítünk, ezt teljesen száraz agar-porra permetezzük, s az így kapott anyagot a nem érzékeny komponensekhez keverjük, végül a keveréssel, illetve utólagos szárítással kapott anyagot porítjuk, majd homogenizáljuk. 50 Porított táptalaj-koncentrátum ugyancsak találmány szerint másik készítésmódja szerint univerzális alaptáptalajunk, a politrop, valamint a találmány szerinti összes teszt-táptalajok előállíthatók oly módon, hogy a hő-, és oxidáció-érzékeny komponen-55 seit, illetve az ezeket oldatban tartalmazó frakciót kíméletes módon, célszerűen fagyasztva-szárítással vagy porlasztásos módszerrel (nirózással) szárítjuk, s a nem érzékeny anyagokhoz keverjük, majd kívánt esetben tovább homogenizáljuk az anyagot. 60 A szubsztrát táptalajok közül a karbamid, szénhidrátok és alkoholok bontásának kimutatására úgy készítünk friss differenciáló szubsztrát-táptalajt, hogy a találmány szerinti univerzális táptalaj-koncentrátumot kb. 7-10-szeresre hígítjuk, s így a biológiai 65 bontásra kerülő (szubsztrát-) anyagból kb. 10% 2