165094. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tio-citidin- és ditio-uridin-származékok előállítására
165094 9 10 teg-kromatográfiás vizsgálattal követjük. 2,5 óra elteltével a 2-tio-uridin-4-szulfonát-5'-difoszfát-nátriumsót tartalmazó reakcióelegyhez 1 ml 0,2 mólos ammóniumklorid-oldatot (pH = 8,5) adunk, és az elegyet 1 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A reakcióelegyet feldolgozzuk. 2-Tio-citidin-5'-difoszfát-dinátriumsót kapunk. Hozam: 42—54%; UV-spektrum (vízben, pH = 7,0): Xmax. 247 nm, váll 272 nm-nél; AM7 /A 272 = 1,23; foszfátelemzés: 1:1,92. Hasonlóan állítjuk elő poli-2,4-ditio-uridin-5'-foszfátból a poli-2-tio-citidin-5'-foszfátot. Hozam: 48%; S20 ,w érték: 5,2 S UV-spektrum (vízben, pH = 7,0): Xmax =244 nm > váll 270 nm-nél; A244 /A 270 = 1,25. 2. példa 0,1 mmól 4-metütio-2-tio-uridin-5'-difoszfát-trietilammóhiumsó (UV-spektrum, vízben, pH = 5,5): Xmax. = 286 nm és 340 nm; A^/A^Q =11; foszfátelemzés: 1:1,95; 4-metiltio-2-tio-uridin-5'-foszfát-trietilammóniumsóból az 1. példában leírt módon előállított termék) 10 ml metanollal és 1 ml trietilaminnal készített oldatát szobahőmérsékleten kénhidrogénnel telítjük, és az elegyet 15 órán át állni hagyjuk. Az oldatot szárazra pároljuk, a maradékot 1 ml metanolban oldjuk, és az így kapott oldatot 10 ml 1%-os acetonos nátriumperklorát-oldathoz adjuk. A kivált 2,4-ditio-uridin-5'-difoszfát-dinátriumsót centrifugálással elkülönítjük és 15 Hgmm nyomáson szárítjuk. Hozam: 61%; UV-spektrum (vízben, pH = 5,5): Xmax = 280 nm és 340 nm; foszfátelemzés: 1:2,15. Hasonlóan állítjuk elő 4-metiltio-2-tio-uridin-5'-trifoszfát-trietilammóniumsóból a 2,4-ditio-uridin-5'-trifoszfát-trinátriumsót. Hozam: 55%; UV-spektrum (vízben, pH = 5,5): X max. = 280 nm és 340 nm; A280/A34O = 1,85; foszfátelemzés: 1:3,1. 3. példa 0,1 mmól 4-metiltio-2-tio-uridin-5'-difoszfát-trietilammóniumsó 10 ml metanollal készített oldatát szobahőmérsékleten ammóniával telítjük, és az elegyet 15 órán át állni hagyjuk. A reakcióelegyet szárazra pároljuk, a maradékot 0,5 ml metanolban oldjuk, és az így kapott oldatot 10 ml 1%-os acetonos nátriumperklorát-oldathoz adjuk. A kivált 2-tio-citicun-5'-dtfoszfát-dinátriumsót centrifugálással elkülönítjük és szárítjuk. Hozam: 72%; UV-spektrum (vízben, pH = 7,0): Xmax . = 247 nm, váll 272 nm-nél; A247 /A 272 = 1,23; foszfátelemzés: 1:2,01. Hasonlóan állítjuk elő 4-metiltio-2-tio-uridin-5'-trifoszfát-trietil-ammóniumsóból a 2-tio-citidin-5'-trifoszfát-trinátriumsót. Hozam: 60%; UV-spektrum (vízben, pH = 7,0): Xmax- = 247 nm, váll 272 nm-nél; A247 /A 2 7 2 = 1,30;foszfátelemzés: 1:3,0. 4. példa 0,2 mmól bisz-trietilammónium-2,4-ditio-uridin-5'-foszfát 1 ml piridinnel készített oldatához 145 mg (0,44 mmól) ciklohexilammónium-(2-cián-etil)-a-piridil-foszfátot adunk, és az elegyet 3 napon át fénytől védve 30 C°-on rázzuk. Az elegyet 3 ml 2 n ammóniumhidroxid-oldattal hígítjuk, és szárazra pároljuk. A szirupszerű maradékot 0 C°-on 3 ml 2 n nátriumhidroxid-oldatban oldjuk, az oldatot 30 percig 0 C°-on tartjuk, majd 3 ml vízzel hígítjuk, és savas ioncserélő gyantával semlegesítjük. Az ioncserélő gyantát kiszűrjük, vízzel alaposan mossuk, és a vizes oldatot kis térfogatra bepároljuk. Az oldatból az 1. példa a) lépésében leírt módon elkülönítjük a 2,4-di-5 tio-uridin-5'-difoszfátot. Hozam: 69%; UV-spektrum (vízben, pH = 5,5): Xmax.= 280 és 340 nm; foszfátelemzés: 1:1,97. A fenti eljárással 0,2 mmól bisz-trietilammónium-2,4-ditio-uridin-5'-foszfátot 5 ml dimetilformamidban 10 0,8 mmól (0,3 g) P1 P 2 <2)-ciánetil-pirofoszforsav-imidazolidát-diciklohexü-ammóniumsóval reagáltatunk. Amorf 2,4-ditio-uridin-5'-trifoszfát-trinátriumsót kapunk. Hozam: 38%; UV-spektrum (vízben, pH = 5,5): Xmax. = 280 nm és 340 nm; A280 /A34o = 1,85; 15 foszfátelemzés: 1:2,9. 5. példa 0,5 mmól 3',2'-0-diacetil-2,4-ditio-uridin-5'-difoszfát-dinátriumsót 50 ml tömény vizes ammónia-oldat-20 ban oldunk, és az oldatot 2 órán át 20 C°-on tartjuk. Az elegyet 15 C°-on, csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot vízmentes etanollal többször eldörzsöljük, az etanolt dekantálással elválasztjuk és elöntjük. Az etanolnedves maradékot acetonban 25 szuszpendáljuk, és a szuszpenziót centrifugáljuk. A kapott amorf 2,4-ditio-uridin-5'-difoszfát-dinátriumsót 15 Hgmm nyomáson szárítjuk. Hozam: 81—85%; UV-spektrum (vízben, pH = 5,5): X max. = 280 nm és 340 nm; foszfát-elemzés: 1:2,1. 30 Ha a fenti eljárásban N4 -acetil-2-tio-citidin-5'-difoszfát-dinátriumsóból indulunk ki, 2-tio-citidin-5'-difoszfát-dinátriumsót kapunk. Hozam: 76%; UV-spektrum (vízben, pH = 7,0): Xmax. = 247 nm, váll 272 nm-nél; A247 /A 272 = 1,23; foszfátelemzés: 1:1,93. 35 A kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk elő: 2,4-ditio-uridint vízmentes piridinben p,p'-dimetoxi-tritilkloriddal reagáltatunk, és a kapott 5'-0-(p,p' -dimetoxi-tritü)- 2,4-ditio-uridint vízmentes piridinben ecetsavanhidriddel acetilezzük. A kapott termé-40 ket ecetsavval kezeljük, és az így kapott 2',3'-0-diacetil-2,4-ditio-uridint piridines közegben foszforoxikloriddal foszforlilezzük. A kapott 3',2'-0-diacetil-2,4-ditio-uridin-5' -monofoszfátot bisz-trietil-ammóniumsójává alakítjuk, és a kapott vegyületet az la. példá-45 ban leírt módon 3',2'-diacetil-2,4-ditio-uridin-5'-difoszfát-dinátriumsóvá alakítjuk. 6. példa 50 0,5 mmól 3',2'-0-etoximetilén-2,4-ditio-uridin-5'difoszfát-dinátriumsót 50 ml 80%-os vizes ecetsavban oldunk. Az oldatot 5 órán át 20 C°-on tartjuk, majd 25 C°-on csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot 50 ml acetonban szuszpendáljuk, az amorf 55 2,4-ditio-uridin-5'-difoszfát-dinátriumsót centrifugálással elválasztjuk és 15 Hgmm nyomáson szárítjuk. Hozam: 52%; UV-spektrum (vízben, pH = 5,5): Xmax. = 280 nm és 340 nm; foszfátelemzés. 1:2,1. A kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk 60 elő: 2,4-ditio-uridint p-toluolszulfonsav jelenlétében fölöslegben vett trietil-ortoformiáttal reagáltatunk, és a kapott 2',3'-0-etoximetilén-2,4-ditio-uridint piridines közegben foszforoxikloriddal foszforilezzük. A kapott terméket ezután az la. példában leírt módon 65 imidazolidátjává alakítjuk, majd trisz-(tri-n-butil-am-5
