164979. lajstromszámú szabadalom • Eljárás benzodiazepin-származékok előállítására mikrobiológiai transzformációval

19 164979 20 szubsztrátként l-metil-5- (2'-fluor-fenil)-7-klór- 1,3-dihidro-2H- 1,4-benzodiazepin-2-ont használva. A kapott fermentlevet az 1. példában leírtak szerint extraliáijuk. A nyers terméket a 2. példában megadott módszerrel tisztítva 1RS l^7

C° olvadáspontú

1-metil-3-hídroxi-5-(2'-fluor-fenil)7-ldór- l,3-dihidro-2H- 1,4-benzodiazepin-2-ont es 193-194 C° oívadáspontú 3-hidroxi-5-(2'-fluor-fenil)-7-klór- l,3-dihidro-2H-1,4-benzodiazepin-2-ont kapunk. A két vegyület súlyaránya 1,2:8,3. A vegyületeket IR-spektroszkópiával azonosítottuk. 12. példa A? 1. példa szerinti fermentációt ismételjük meg, Streptomyces fradiae ÍFO 3360 törzset alkalmazva, szubsztrátként pedig l-(/3-dietilamino-etií)-5-(2'-fluorfenil)- 7-klór- 1,3-dihidro-2H- 1,4-benzodiazepin- 2-ont használva. A kapott fermentlevet az 1. példában leírtak szerint extraháljuk. A keletkezett nyers kristályos anyagot a 2. példában megadottak szerint tisztítva 196-203 C° olvadásion tú 1 -(0-dietilamino-etil)- 3-hidroxi-5-(2'-fluor-fenü) -7-klór-1.3-dihidro -2H- 1,4-benzodiazepin-2-oni es í'^-lWl oívadáspontú 3-hidroxi- 5-(2"-fiuor-fenil)-7-klór- l,3-dihidro-2H- 1,4-benzodiazepin-2-ont kapunk, A két anyag súlyaránya 7,8:0,3. 13. példa Streptomyces griseochromogenes ATCC 14511 törzzsel oltunk be ferde agar-csőröl 500 ml-es, a következő összetételű táptalajt tartalmazó Sakaguchi-lombikot: 1 g glükóz, 1.5 g szójaliszt, 0,5 g NaCl, vízzel 100 ml-re töltve, pH = 7,0. A lombikot reciprok rázógépen 28 C° hőmérsékleten inkubáljuk. 24 órás tenyésztés után tíz, egyenként 100 ml ugyanilyen összetételű táptalajt tartalmazó lombikot oltunk be 2-2%, az előzőkben előállított tenyészettel. További 24 órán át tartó rázatás után minden lombikba 100 mg 5-(2'-fluor-fenil)-7-klór- 1,3- dihidro-2H-benzodíazepin-2-ont adagolunk, 2 ml etanolban oldva. 7 napos inkubálás után a kapott fermentleveket kloroformmal extraháljuk és az extraktumokat vákuumban szárazra pároljuk. A bepárlási maradékot a 2. példában megadott módon tisztítva 193-194 C° olvadáspontú 3-hidroxi-5-(2'-fluorfenil)-7-klór- 1,3-dihidro-2H- 1,4-benzodiazepin-2-ont kapunk. A terméket IR-spektroszkópiával azonosítottuk. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás (II) általános képletű benzodiazepin-származékok mikrobiológiai transzformációval történő előállítására,-ahol a (II) általános képletben R, 10 jelentése hidrogénatom, metil-, ciklopropilmetil- vagy ß-dietilamino etilcsoport, R2 hidrogén-, klór- vagy iluoratomui, R3

pedig klóratomot, nitrocsoportot vagy trifluormetücsoportot jelent, azzal jellemezve. 5 hogy valamely (I) általános képletű vegyületet - mely képletben R,, R2 és R

3

a fent megadott - Streptomyces albidoflavus ATCC 15844, Streptomyces flavus ATCC 3369, Streptomyces griseochromogenes ATCC 14511, Streptomyces roseochromogenes ÍFO 10 3363, Streptomyces fradiae ÍFO 3360, Streptomyces griseus IFO 3102, Streptomyces takarazukaensis FERM-P 943, Streptomyces calvus FERM-P 944, Mreptomyces fimicarius FERM-P 945, Streptomyces chartreusis FERM-P 946, Streptomyces trans-15 formáns FERM-P 947, Streptomyces globisporus FERM-P 948 vagy Streptomyces benzodiazepinicus FERM-P 949 törzzsel fermentálunk, vagy az előzetesen táptalajon tenyésztett, fentiekben említett valamelyik mikroorganizmustörzs nyugvó sejtjeivel 20 kezelünk és a keletkezett (II) általános képletű vegyületet elválasztjuk, illetve R, metil-, ciklopropilmetil- vagy /j-dietilamino-etücsoport jelentése esetén a keletkezett (Ha) és (II) általános képletű vegyületek elegyét - ahol R, jelentése a fenti, és R2 és R

3

a 25 fentiekben megadott - az egyes vegyületekké választjuk szét. 2. Az ]. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, olyan (II) általános képletű vegyületek előállítására, ahol 30 R, hidrogénatom, vagy metilcsoport; R2 az 1. igénypontban megadott, és R3 3b klóratom vagy nitrocsoport, azzal jellemezve, hogy olyan (I) általános képletű vegyületből indulunk ki, ahol R, és R} a fentiekben, R2

pedig az 1. igénypontban megadott. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási 40 módja 1-ciklopropilmetil- 3-hidroxi- 5-fenil-7- klórl,3-dihidro-2H- 1,4-benzodiazepin-2-on és 3-hidroxi-5-fenil- 7-klór- 1,3-dihidro-2H- l,4-benzodiazepin-2-on előállítására, azzal jellemezve, hogy 1-ciklopropilmetil- S-fenil-7-klor- l,3-dihidro-2H- 1.4-benzo-45 diazepin-2-onból indulunk ki. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja 3-hidroxi-5-(2'-fluor-fenil)- 7-klór- 1,3-dihidro-2H- 1,4-benzodiazepin-2on előállítására, azzal jellemezve, hogy 5-(2'-fluor-fenil)- 7-klór- l,3-dihidro-2H-50 1,4-benzodiazepin-2-ónból indulunk ki. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja l-metil-3-hidroxi- 5-fenil-7-klór- 1,3- dihidro-2H- 1.4-benzodiazepin-2-on és 3-hidroxi-5-fenil-7-klór- l,3-dihidro-2H- 1,4- benzodiazepin-2-on elö-55 állítására, azzal jellemezve, hogy l-metil-5-fenil-7-klór- l,3-dihidro-2H- 1,4-benzodiazepin-2-onból indulunk ki. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja l-metil-3-hidroxi-5-fenil-7-nitro- 1,3-dihidro-60 -2H- 1,4-benzodiazepin-2-on és 3-hidroxi-5-fenil-7-nitro- 1,3-dihidro- 2H- 1,4-benzodiazepin-2-on előállítására, azzal jellemezve, hogy l-metil-5-fenil- 7-nitrol,3-dihidro-2H- 1,4-benzodiazepin-2-ónból indulunk ki. 65 7. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja l-metil-3 -hidroxi-5-fenil-7-trifluormetil- 1,3-dihidro-2H- l,4-benzodiazepin-2-on és 3-hidroxi-5-