164979. lajstromszámú szabadalom • Eljárás benzodiazepin-származékok előállítására mikrobiológiai transzformációval

13 164979 14 A fenti adatok alapján az egyes törzseket a következők szerint azonosítottuk: 1 S3 (FERM PNo 943) A spóratartók a légmicéliumokról örvös elágazások- 5 Kai «ueikeduek ki, spirálokat alkotnak, melanin nem keletkezik, Ezen tulajdonságok alapján az S-3 jelű törzs a Streptomyces kentuckensis Barr and Carman, 1956 törzshöz hasonló, de attól a következőkben különbözik: a fenti törzs a tejet peptonizálja, a 10 zselatint elfolyósítja, spórái ovális vagy elliptikus alakúak. Fentiek alapján az S-3 jelű törzs új törzsnek tekinthető, és Streptomyces takarazukaensis S—3-nak neveztük el. 15 2. S-4 (FERM-P No. 944) Az S--4 jelű törzs az ismert fajok közül a Streptomyces calvus Backus és mti. 1957 jelű törzzsel mutat több közös tulajdonságot, de attól a zselatin 20 elfolyósítási -képességében, a tej koagulálásában és a raffinóz, illetve az arabinóz felhasználási-képességében különbözik. Így az S—4 jelű törzs a Streptomyces calvus új variánsának tekinthető. 25 3. S-l2 (FERM-P No. 945) Több jellemző tulajdonság alapján az S —12 jelű törzs a Streptomyces fimicarium Waksman and Henrici, 1948 törzzsel mutat rokonságot, de attól 30 például a spórák alakjában, és a szervetlen sókat tartalmazó agáron megfigyelt növekedésben különbözik, így az S-l2 jelű törzs a Streptomyces fimicarium új variánsának tekinthető. 35 4. S-19 (FERM-P No. 946) Az S-19 jelű törzs keményítős-agáron, ásványisóagaron, burgonyás-agáron oldható színanyagot nem termel. Az oldható pigmentanyag termelésén kívül az S-19 törzs más jellemző tulajdonságai is a 40 Streptomyces chart re usis Calhoun and Johnson. 1956 törzs tulajdonságaihoz hasonlóak. Így az S-19 törzs új törzsnek tekinthető és Streptomyces chartreusis S-19-nek neveztük el. 45 5. S-60 (FERM-P No. 947) A spórák spóratartókban helyezkednek el, amelyek örvösen elágazóan kiemelkednek a légmicéliumok közül. Tirozín-tartalmú agáron melanin-termelés figyelhető meg. 50 A szubsztrátmicélium színe barna, a légmicélium fehér vagy szürke színű. Fenti tulajdonságok alapján az S-60 jelű torzshoz a Streptomyces griseochromogenes Fukunaga és mti. 1955 jelű organizmus áll igen közel. Ugyanakkor a 55 két törzs a következő tulajdonságokban különbözik egymástól: a szacharóz-tartalmú agáron a szubsztrát-és légmicéliumok színe, az aszparaginos agáron a légmicélium fejlettsége, az ásványi sókat tartalmazó agáron megligyelhetú légmicélium-fejlettség és az 50 oldható színanyag színe, a zselatin elfolyósítása, a tej koagulálása és peptonizacioja, es végűi a aitrat redukciója nitritté. A fenti megfigyelések alapján az S-60 jelű 65 organizmus új fajnak tekinthető, amit Streptomyces transformans S-60-nak neveztünk el. 6. S-120 (FERM-P No. 948) Az S-120 jelű törzs több szempontból hasonlóságot mutat a Streptomyces globisporus Waksman törzshöz. Ugyanakkor nem termel oldható színanyagot szacharóz-tartalmú agáron és peptonglükóz-agaron és ezeken a Waksman törzs szubsztrátmicéliumának színe színtelen vagy zöldes. Ezen tulajdonságok alapján az S-120 jelű orpnizmus a Streptomyces globisporus-szal rokon új törzsnek tekinthető. 7. S-145 (FERM-P No. 949) Az organizmus spóratartói örvösen elágazva és tömött spirálokat alkotva emelkednek ki a légmicéliumok közül. Melanin-termelés nem figyelhető meg, a szubsztrátmicélium színe sárgás és szürke, a légmicélium fehér vagy rózsaszín színű. Az ismert fajok közül az S—145 leginkább a Streptomyces hachijoensis Yamaguchi, 1954 és a Streptomyces matensis Margalith és mti., 1959 jelű törzsekhez hasonlít. Ugyanakkor a Streptomyces hachijoensis szubsztrát micéliumai szacharóz-agáron fehér vagy rózsaszínűek, csupaszok, ásványi sókat tartalmazó agáron vattaszerű légmicéliumok fejlődnek és a törzs a zselatint gyorsan elfolyósítja. Másrészről a Streptomyces matensis szacharóz-agáron kékes színű oldódó színanyagot termel, ásványi sókat tartalmazó agáron pedig fehér színű légmicéliumok fejlődnek. Fentiek alapján az S—145 jelű törzs a fenti két organizmustól megkülönböztethető. Így az S—145 új törzsnek tekinthető, amit Streptomyces benzodiazepinicus S—145-nek neveztünk el. A találmány szerinti eljárás előnyös megvalósítási változatai keretében a következő benzodiazepin származékokat állíthatjuk elő: 3-hidroxi- S-fenil-7-klór- 1,3-dihidro-2H- 1,4-benzodiazepin-2-on, 3-hidroxi- 5- fenil-7-nitro- 1,3-dihidro-2H- 1,4-benzodiazepin-2-on, 3-hidroxi- 5-fenil-7 trifluormetil- l,3-dihidro-2H~ 1,4-benzodiazepin-2-on, 3-hidroxi- 5-(o-klórfenil)-7-klőr- 1,3-dihidro-2H 1,4-benzodiazepin-2-on, 3-hidroxi- 5-(o-klórfenil)-7- nitro- l,3-dihidro-2H-1,4-benzodíazepin-2-on, 3- hidroxi-5-(o-fluorfenil)-7-klór- l,3-dihidro-2H-1,4-benzodiazepin-2-on, 3-hidroxi- 5-(o-fluorfenil)- 7-nitro- l,3-dihidro-2H-1,4-benzodiazepin-2-on, 1- metil- 3-hidroxi-5-fenil- 7-klór- l,3-dihidro-2H-1,4-benzodiazepín-2-on, 1-metil- 3-hidroxi-5-(o-klórfenil)-7-klór- 1,3-dihidro-1,4-benzodiazepin-2-on, 1-metil- 3-hidroxi- 5-(o-fluorfenil)-7-klór- 1,3-dihidro- 2H- l,4-benzodiazepin-2-on, 1-metil- 3-hidroxi-5-(o-klórfenil)- 7-nitro- 1,3-díhidro-2H- l,4-benzodiazepin-2-on, 1-metil- 3-hidroxi-5-fenil- 7-nitro- l,3-dihidro-2H-benzodiazepin-2 -on, 1-metil- 3-hidroxi-5-fenil- 7-trifluormetil- 1,3-dihidro-2H- 1,4-benzodiazepin-2on, 1-ciklopropilmetil- 3-hidroxi-5-fenil- 7-klór- 1,3-dihidro-2H- l,4-benzodiazepin-2-on, 1- ciklopropilmetil-3-hidroxi-5-(o-klórfenil)- 7-klór- l,3-<iihiclro-2H- 1,4-benzodiazepin-2-on,