164957. lajstromszámú szabadalom • Eljárás indolvázas alkaloidok kinyerésére és/vagy tisztítására

164957 a szűrt fermentléhez vagy.a vizes oldathoz jódoldatot adunk, a keletkezett jódkomplex csapadékot elkülönítjük, majd vízzel nem elegyedő vagy részben elegyedő szerves oldószerben feloldjuk, az oldott jódkomplexeket redukálószer hozzáadásával megbontjuk, majd 5 a szerves oldószeres fázisból az alkaloidokat kinyerjük, kívánt esetben önmagában ismert módon tisztítjuk. A találmány értelmében oly módon járunk el, hogy az indolalkaloidokat tartalmazó szűrt fermentlé- 10 hez, vágy a vizes oldathoz keverés közben vízzel elegyedő szerves oldószeres jód oldatot (vagy 10% jódot tartalmazó jód-jódkálium oldatot) adunk mindaddig, amíg az oldatból csapadék válik le. Gyorsan ülepedő, sötétbarna színű csapadékot nyerünk, amely 15 az indolalkaloidoknak az irodalomból eddig nem ismert, új jódkomplexei. A csapadékot elkülönítjük, majd vízzel nem elegyedő vagy részben elegyedő szerves oldószerben — célszerűen benzolban, diklóretánban vagy etilacetátban - oldjuk. A komplexet 20 tartalmazó oldathoz ezután intenzív keverés közben a felhasznált jód mennyiségével sztöchiometrikus, vagy ennek 5-szöröséig terjedő mennyiségű olyan redukálószert — célszerűen nátriumtioszulfát, nátriumbiszulfit, aszkorbinsav, vagy hidrazin stb. gyengén lúgos oldatát 25 vagy nátriumhidroxid oldatot - adunk, amelynek normál redox-potenciálja ajodid-jód rendszerénél alacsonyabb. A pillanatszerűen lejátszódó redukció befejezése után a keverést megszüntetjük, a két fázist elválni hagyjuk, a szerves fázisból, amely a indolalka- 30 loidokat oldva tartalmazza, ismert módon, pl. bepárlással, sóképzéssel, vagy egyéb módszerekkel az alkaloidokat kinyerjük, és szükség esetén tovább dolgozzuk a kapott terméket. A leválasztáshoz használt jódot, amelyet a vizes oldatban az eljárás során alkalmazott redukció következtében jodidsó alakjában nyerünk, oly módon regeneráljuk, hogy a két fázis elválasztása során nyert vizes-lúgos jodidoldathoz keverés és hűtés közben lassú ütemben mindaddig oxidálószert — célszerűen füstölgő salétromsavat — adagolunk, amíg az oldatból elemi jód válik ki. Ezután a keverést megszüntetjük, a kivált jódkristályokat ülepedni hagyjuk, majd a kristályokról az oldatot dekantáljuk, és az így nyert regenerált jódot ismételten felhasználhatjuk. A találmány szerinti eljárás előnyei az alábbiakban foglalható össze: a) az indolalkaloidokat híg szűrt fermentleveikből, illetve vizes oldataikból egy művelettel csapadék alakjában kvantitative nyerjük ki, a szennyezések nem válnak le, azaz az eljárással nemcsak dúsítást, hanem egyúttal tisztítást is elérünk. b) az ismert módszerekkel szemben a találmány szerinti eljárás alkalmazása esetén az indolalkaloidok kinyerése nem jár bomlás okozta veszteséggel, így a kitermelés lényegesen növekszik. A találmány szerinti eljárás előnyeit a 151.784 számú szabadalmi leírásban ismertetett eljárással szemben azonos Vinca minor L. drogot alkalmazva, számszerűen az alábbi táblázatban foglaljuk össze: Táblázat Eljárás Kapott vinkamin nyers vinkamin kristály g/10 kg drog g/10 kg drog találmány szeirnti 151.784 számú szabadalmi leírás szerinti 1,66 1,48 1,29 1,00 A táblázatból kitűnik a találmány szerinti eljárás előnye, elsősorban az a tény, hogy az extraktumból 12%-al több vinkamin nyers kristály nyerhető és mintegy 30%-al több végtermék, jelezvén azt, hogy egyrészt a találmány szerinti eljárás kíméletesebb az eddig ismert eljárásokkal szemben, másrészt szelektívebb is azoknál. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módjait az alábbi példák szemléltetik: 1. példa Lizergsavamid kinyerése. 10 liter 1500 gamma/ml lizergsavamidot tartalmazó Claviceps paspali tenyészet szűrt fermentlevéhez szobahőmérsékleten keverés közben 100 ml 20% káliumjodidot és 10% jódot tartalmazó vizes oldatot adunk. A képződött sötétbarna színű csapadékot száVjük, majd 1 liter kloroformban oldjuk. A lizergsavamid-jódkomplex-oldatot ezután 500 ml 5% nátriumhidroxidot és 10% nátriumtioszulfátot tartalma-45 zó vizes oldattal rázzuk össze. A szerves fázist elkülönítjük és vízmentes nátriumszulfáttal szárítjuk, majd csökkentett nyomás alatt kristályosodásig bepároljuk. A kristályos nyersterméket szűrjük, mossuk, szárítjuk, majd metanolból átkristályosítjuk. Kiterme-50 lés 9,75 g lizergsavamid (65%) 20 [a] Ü° = + 0,5° (c = 0,5, piridin) 2. példa 55 Elimoklavin és agroklavin kinyerése. 12 liter 2900 gamma/ml elimoklavint és agrokla vint tartalmazó Claviceps fusiformis tenyészet szűrt fermentlevét, az 1. példa szerint dolgozzuk fel. 23,8 g nyers 3:1 arányú elimoklavin és agroklavin 60 izomorf kristályelegyet kapunk. Kitermelés: 68,3%. 2