164918. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dextranáz előállítására

9 164918 10 módon 2,40 g poralaku enzimet kapunk, ami az enzim-aktivitásra számítva 75%-os termelési hányadnak felel meg. Az igy kapott dextranáz-por enzim-aktivitása 30 egység/mg. jük; 3,6 liter kondenzátumot kapunk, ehhez acetont adunk és a kivált terméket elkülönitjük. Acetonnal történő viztelenités és száritás után 96 g poralaku dextranáz-enzimet kapunk, amelynek aktivitása 32 egység/mg. 2. példa Az 1. példában leirt módon dolgozunk, de azzal az eltéréssel, hogy a tápközeghez csupán az 1. példában megadott mennyiség 1/2 részének megfelelő mennyiségű dextránt adunk, emellett 0,5suly% keményitőt is adunk a tápközeghez. Az 1. példában leirttal azonos körülmények között lefolytatott fermentáció termékét az 1. példában leirt módon dolgozzuk fel és igy 140 egység/ mg aktivitású poralaku dextranázt kapunk termékként. 3. példa Az 1. példában leirt eljárás szerint dolgozunk, azzal az eltéréssel, hogy a fermentáció céljaira alkalmazott tápközeghez 1 suly% burgonyakeményitőt is adunk. A leirt módon történő feldolgozás után 250 egység/ml enzim-aktivitásu tiszta fermentlevet kapunk. 4. példa Egy fermentorba 20 liter 8,5 pH-értékü, alábbi összetételű folyékony tápközeget viszünk be: d extrán 1 suly% burgonyáké ményitő 1 suly% polipepton 1 suly% élesztőkivonat 0, 05 suly% kálium-dihidrogénfos zfát 0, ,1 suly% dikálium-hidrogénfoszfát 0, ,1 suly% magnézium-szulfát -heptahidrát 0, ,1 suly% mangán-szulfát-hexahidr át 0, ,05 suly% kalcium-klorid 0,02 suly% Ezt a tápközeget 120°C hőmérsékleten 30 perce gőzöléssel sterilizáljuk, majd lehűlés után beoltjuk 1 liter inokulummal, amelyet Brevibacterium fuscum var. dextranlyticum FERM-P513 törzs ugyanilyen összetételű táptalajon 26°C hőmérsékleten 20 óra hosszat történő tenyésztése utján állítottunk elő. A steril körülmények között végzett beoltás után a fermentációt 26 C hőmérsékleten, percenként 300 fordulattal történő keverés és percenként 20 liter levegővel történő szellőztetés közben 60 óra hosszat folytatjuk. Ezután a mikroorganizmus-testeket centrifugálással eltávolítjuk és igy 18,2 liter tiszta fermentlevet kapunk, amelynek dextranáz-aktivitása 220 egység/ml. A fenti módon kapott tiszta fermentlevet csökkentett nyomáson, óránként 10 liter folyadék elpárologtatásának megfelelő sebességgel betöményit-10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5. példa 80 g "Biogel P-30" adszorbenst desztillált vízben duzzasztunk, majd betöltjük egy 3,2 cm belső átmérőjű oszlopba. 1 g poralaku enzimet (amelyet az 1. példában leirt módon állítottunk elő) 10 ml desztillált vizben oldunk és ezt az oldatot az említett módon előkészített oszlop felső részére öntjük, majd a szokásos módon lefolytatjuk az oszlop-kromatográf iát. Az oszlopról távozó oldatot 5 ml-es frakciókban fogjuk fel és e frakciók dextranáz-aktlvitását az előzőkben ismertetett módon mérjük. Azt találjuk, hogy a dextranáz-enzim a 33.-42. frakcióban jelenik meg. Ezeket az enzimben dus frakciókat egyesítjük és liofilizáljuk. Ily módon 63 mg poralaku enzimet kapunk, amelynek aktivitása 455 egység/mg; ez az aktivitásra számítva 95,5%-os hozamnak felel meg. 6. példa Az 1. példában leirt módon folytatjuk le a dextranáz-enzimet termelő fermentációt, azzal az eltéréssel, hogy az ott emiitett dextrán helyett azonos mennyiségű burgonyákéményitőt adunk a tápközeghez. A leirttal azonos mód on lefolytatott fermentáció termékeként kapott és centrifugált lé 11 egység/ml dextranáz-aktivitást mutat. 7. példa Az 1. példában leirt módon folytatjuk le a fermentációt, azzal az eltéréssel, hogy az ott emiitett dextrán helyett azonos mennyiségű maltózt alkalmazunk a tápközegben. Az igy kapott és centrifugált tiszta fermentlé dextranáz-aktivitása 10 egység/ml. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás dextranáz előállítására, azzal jellemezve, hogy a Brevibacterium fuscum var. dextranlyticum FERM-P 513 mikroorganizmus törzset asszimilálható szénforrást és nitrogénforrást tartalmazó tápközegben vagy tápközegen tenyésztünk és a dextranázt a fermentlé bői elkülönitjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja, azzal jellemezve, hogy a fermentációhoz szénforrásként dextránt alkalmazunk. 2 lap, 4 rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 75-1106 — Dabasi Nyomda, Budapest - Dabas