164903. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek előállítására 1-hidroxi- benztriazol- származékok jelenlétében
19 164903 20 b) 2 mőlekvivalens N-hidroxi-szukcinimid adalékanyag jelenlétében A fenti eljárást ismételjük meg azzal a különbséggel, hogy 1-hid roxi-benztriazol helyett 2 mólekvivalens N-hidroxi-szukcinimidet használunk fel. A terméket 61%-os hozammal kapjuk. VI. példa NPS-Asn(Mbh)-Cys(Mmb)-Pro-Lys(BOC)-Gly-NH-Mbh 1. H-Gly-NH-Mbh.HCl a) Z-Gly-NH-Mbh-ból kiindulva: 20 ml jégecetben 2,1 g Z-Gly-NH2 -t és 2,4 g 4,4'-dimetoxibenzhidrolt oldunk. Az oldathoz egy csepp tömény kénsavat adunk, és éjszakán át állni hagyjuk. Az elegyet másnap 40 ml vizzel higitjuk, lehűtjük, és a kivált kristályokat kiszűrjük. A szürőlepényt etilacetátban oldjuk. Az etilacetátos oldatot vizzel egyszer mossuk, nátriumszulfát fölött szárítjuk és bepároljuk. 3,6 (83%) terméket kapunk, op.: 148-150 C° (alkoholból). 44,7 g Z-Gly-NH-Mbh-t 300 ml metanol és 300 ml jégecet elegyében szuszpendálunk, éspalládium- katalizátor jelenlétében hidrogénezünk. A katalizátort kiszűrjük, és a szürletetbepároljuk. A maradékot metanolban oldjuk, és timolkék indikátor mellett metanolos sósavval titráljuk. Az elegyet ismét bepároljuk, és a maradékot éterrel eldörzsöljük. 33,9 g (98%) terméket kapunk, amelyet metanol és éter elegyéből átkristályositunk. 31,7 g terméket kapunk, (91,6%) op.: 202-204 C°. b) Klórecetsav-4,4' -dimetoxi-benzhidrilamidból kiindulva: A Z-Gly-NH-Mbh előállításánál leirt módon 200 ml jégecetben és 0,5 ml tömény kénsavban 18,7 g klórecetsava mid ot és 48 g 4,4'-dimetoxibenzhidrolt reagáltatunk. 45,75 g (72%) terméket kapunk, op.: 125-126 C°. 88,5 g klórecetsav-4,4'-dimetoxi-benzhidrilamid 880 ml metanollal készített oldatához 220 ml folyékony ammóniát adunk, és az elegyet autoklávban 24 órán át 60-70 C°-on tartjuk. Az elegyet bepároljuk, és a maradékot etilacetát és nátriumkarbonát-oldat között megosztjuk. Az etilacetátos fázist vizzel mossuk, nátriumszulfát fölött szárítjuk és bepároljuk. A maradékot metanolban oldjuk, és pH-ját metanolos sósavoldattal 6 értékre állítjuk. Az elegyet bepároljuk és a maradékot éterrel eldörzsöljük. 173-176 C°-on olvadó terméket kapunk. A terméket vizben oldjuk és csontszénnel derítjük. Az átlátszó vizes oldatot bepároljuk, és a maradékot metanol-éter elegyből átkristályositjuk. 59,3 g (63,6%) tiszta terméket kapunk, op.: 197-199 C°. 2. Z-Lys(BOC)-Gly-NH-Mbh 6,1 g (11 mmol) Z-Lys-(BOC)-OH.DCHA-ot 0 C°-on etilacetát és 20 ml 2 n citromsav-oldat között megosztunk. Az etilacetátos fázist 2 n citromsav-oldattal és vizzel mossuk, nátriumszulfát fölött szárítjuk és bepároljuk. A maradékot 20 ml abszolút tetrahidrofuránban oldjuk. Az oldathoz 1,5 g (11 mól) 1-hidroxi-benztriazolt, és 0 C°-on 2,2 g DCC hideg DMF-dal készített oldatát adjuk. Az elegyet 1 órán át 0 C°-on, majd 1 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, ezután az elegyhez 3,4 g (10 mmol) H-Gly-NH-Mbh.HCl-ot és 1,3 ml (10 mmól) N-etil-morfolint adunk. Az elegyet 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük, a csapadékot kiszűrjük, a szürletet bepároljuk, a maradékot meleg etilacetát és nátriumhidrogénkarbonát-oldat között megosztjuk, az etilacetátos oldatot 2 n citromsav-oldattal, telitett nátriumhidrogénkarbonát-oldattal és vizzel mossuk, nátriumszulfát fölött szárítjuk és bepároljuk. A maradékot etilacetát és petroléter elegyéből átkristályositjuk. 6,0c (90,7%) terméket kapunk, op.: 123-125 C°, [cc]^=+8,9° (c = 2, metanol). 3. H-Lys(BOC)-Gly-NH-Mbh.HCl 9,6 g Z-Lys(BOC)-Gly-NH-Mbh-t metanolban szuszpendálunk, és palládium-katalizátor jelenlétében hidrogénezünk. Az elegy pH-ját a reakció közben automata titrálóberendezésből adagolt 1 n metanolos sősavoldattal 5 értéken tartjuk. A katalizátort kiszűrjük, az oldatot bepároljuk, és a maradékot éterrel eldörzsöljük. 7,3 g (89%) terméket kapunk, amely metanol-éter elegyből végzett átkristályositás után 158-160C°-on olvad. [ÖÍ-_1Q2 = = +17,55° (c = 2, metanol). 4. Z-Pro-Lys(BOC)-Gly-NH-Mbh 5 g (20 mmól) Z-Pro-OH, 11,4 g (20 mmól) H-Lys(BOC)-Gly-NH-Mbh.HCL és 5,4 g (40 mmól) 1-hidroxi-benztriazol 60 ml DMF-dal készitett szuszpenziójához 0 C°-on, keverés közben 2,6 ml (20 mmól) N-etil-morf olint és 4,4 g DCC hideg DMF-dal készitett oldatát adjuk. Az elegyet 1 órán át 0 C°-on, majd 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük, a csapadékot kiszűrjük, a szürletet bepároljuk, és e maradékot a VI. 2. példában leirt módon feldolgozzuk, 14 1 g (93%) terméket kapunk, op.: 180-183 C°, [oCJÍj = -27,4° (c = 2, DMF-ban). A termék metanof-viz elegyből nem kristályosítható át. 5. H-Pro-Lys(BOC)-Gly-NH-Mbh.HCl 18,5 g Z-Pro-Lys(BOC)-Gly-NH-Mbh-t a VI.3. példában leirt módon metanolban katalitikusan hidrogénezünk. 15,2 g (100%) amorf, 100 C°-on zsugorodó terméket kapunk. 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 10
