164882. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-acilamino- 3-szubsztituált -tiometil- cefalosporánsav- származékok előállítására
164882 9 10 (vízben ) Xmax=271 nni ( =30 600), optikai forgatóképesség \af^=-+ 52° ±1° (c=0,9 vízben). A kiindulási anyagot a következőképpen állíthatjuk elő: 3,9 g 7-brómacetilaminocefalosporánsavat oldunk 20 ml metanolban 1,7 ml N,N-diizopropiletilamin hozzádaása közben. Ezután 0,94 g 4-aminopiridint adunk a reakcióelegyhez és 12 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután lassan etilacetátot adagolunk az elegyhez, és így amorf por alakjában nyerjük a 7-[(para-aiTánopiridinium)-acetilamino]-cefalosporánsavat. Az anyagot melegen 1 :1 arányú metanol-víz elegyben oldjuk, lehűtve színtelen lemezes, kristályos anyagot kapunk, amely 120°-on olvadás nélkül bomlik. Szilikagélen végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat során a kimutatást jódgőzzel végezve a következő Rf-értékeket kapjuk: Rf52A= 0,10, Rí" ioi=0,25, RfloiD =0,37. 3. példa 3,95 g 7-[(paraarranopiridinium)-acetÜamino]-cefalosporánsavat 195 ml 6,7 pH-jű 5%-os foszfátpufferoldatban oldunk kb. 30°-on. Ezután 2,56 g szilárd 5-merkapto-2-metil-l,3,4-tiadiazolt adunk hozzá, majd a pH-t 20 ml 10%-os dikáliumhidrogénfoszfátoldat hozzáadásával 6,5-re állítjuk, eközben az összes anyag oldatba megy. A reakcióelegyet ezután 6 órán át nitrogénatmoszférában 60°-on keverjük. Az oldatot ezután 0°-ra hűtjük le és intenzív keverés közben 2 liter 0°-ra hűtött metanolt adunk hozzá. Még fél órán át keverjük 0°-on, majd a kristályos foszfátot kiszűrjük. A szűrletet először vákuumban kb. 50 ml-re pároljuk be, majd a víz eltávolítása céljából kétszer 1,2—1,2 liter abszolút metanolt adunk hozzá és vákuumban 200 ml-re pároljuk be. Végül 300 ml etilacetátot adunk az elegyhez és egy órán át 0°-on állni hagyjuk, szűrjük és a szűredéket etilacetáttal mossuk, így egy, még foszfáttartalmú nyersterméket kapunk (6,04 g). Ezt a terméket feloldjuk 40 ml vízben és egy 1500 ml Sephadex® G 10-zel töltött oszlopon (oszlopátmérő 4,7 cm) szűrjük. Az első 880 ml eluátumot eldobjuk, az ezt követő 330 ml eluátum tartalmazza a reakcióterméket. Ez utóbbit vákuumban óvatosan kb. 100 ml térfogatra pároljuk be, ezután 100 ml metanolt adunk hozzá, aktívszénnel kezeljük, majd vákuumban kb. 30 ml térfogatra pároljuk be. így a 7-[(para-arninopiridinium)-acetila mi n o ] -3-(2-metil-l ,3,4-tiadiazol-5-il-tio)-metil-cef-3--em-4-karbonsavat kapjuk színtelen, tűs kristályú anyag alakjában, bomláspont 170° (vákuumban megolvad). Kitermelés: 1,57 g. Vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat, szilikagélen: Rf51A=0,07,Rf10 i=0,35 és Rf 110 =0,05 (kimutatás jód-spray-yel). Ultraibolya abszorpciós spektrumban (metanol-víz 2:1 elegyben) Xmax =272nm ( o =36 200). Az optikai forgatóképesség [a]2 °=+3° ±1° (c=l,2, metanol-víz 2 : 1 elegyben). A kiindulási anyagot a 2. példában leírt eljárás szerint állíthatjuk elő. 4. példa 8,13 g 7-[(para-aminopiridinium)-acetilamino]-cefalosporánsavat oldunk 350 ml 6,7 pH-jú, 5,7%-os foszfátpufferben 30°-on. Ezután 4,73 g szilárd 2-merkapto-l,3,4-tiadiazolt adunk hozzá, és a pH-t 100 ml 10%-os dikáhumhidrogénfoszfátoldat hozzáadásával 6,5-re állítjuk, eközben az összes anyag oldatba megy. Ezután a reakcióelegyet nitrogénatmoszférában 6 órán át 60°-on keverjük, majd 0°-ra hűtjük le az oldatot, és erős keverés közben 4 liter 0°-os metanolba folyatjuk. Az elegyet fél órán át keverjük 0°-on és a kikristályosodott foszfátot leszűrjük. A szűrletet vákuumban kb. 800 ml-re pároljuk be és a víz eltávolítása céljából összesen 3 liter etanolt adunk hozzá folyamatosan egy kapillárison át és vákuumban 400 ni végtérfogatra pároljuk be. Végül 600 ml etilacetátot adunk hozzá, egy órán át 0°-on állni hagyjuk, szűrjük, a szűredéket etilacetáttal mossuk, így egy még foszfáttartalmú nyersterméket kapunk (11,39 g). Ennek a terméknek 3 g-ját 20 ml vízben oldjuk és 350 ml Sephadex® G 10-zel töltött oszlopon (oszlopátmérő 3,5 cm) szűrjük. Az első 210 ml eluátumot elöntjük, az ezt követő 90 ml eluátum tartalmazza a reakcióterméket. Ezt a 90 ml eluátumot vákuumban óvatosan 25 ml térfogatúra pároljuk be, 25 ml metanolt adunk hozzá, aktívszénnel derítjük, és vákuumban kg. 10 ml-re pároljuk be. Ehhez az oldathoz erős keverés közben először 20 ml etanolt, majd még 60 ml étert adunk. Dy módon közel színtelen csapadékot kapunk, amely a 7-[(para-arrrinopiridinium)-acetílamino]-3--(l,3,4-tiadiazol-2-il-tío)-metil-cef-3-em-4-karbonsav, amely 180°-on bomlik barna elszíneződés közben. Vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat, szilikagélen: Rf52A=0,ll, Rf,01 =0,31 és Rf! io=0,06 (a kimutatást káliumjodidos jódoldattal végezzük). Ultraibolya abszorpciós spektrumban (víz-metanol 2 :1 elegyben) Xmax=269 nm ( =34 200). Az optikai forgatóképesség [af° =+26° ±1° (c=0,89 metanol-víz 2 :1 elegyben). 5. példa 8,13 g 7-[( para-arrdnopiridinium)-acetilamino]-cefalosporánsavat oldunk 350 ml 5,7%-os 6,7 pH-értékű foszfátpufferoldatban 30°-on. Ezután 4,65 g szilárd 5-merkapto-2-metil-l,3,4-oxadiazolt adunk hozzá és a pH-t 110 ni 10%-os dikáliumhidrogénfoszfátoldat hozzáadásával 6,5-re állítjuk, eközben az összes anyag oldatba megy. A reakcióelegyet ezután 6 órán át nitrogénatmoszférában 60°-on keverjük és 0°-ra történő lehűtés után intenzív keverés közben 4 liter 0°-ra hűtött metanolba folyatjuk. Egy fél órán át keverjük még 0°-on, majd a kikristályosodó foszfátot leszűrjük. A szűrletet vákuumban a víz eltávolítása céljából összesen 3 liter abszolút alkohol folyamatos, kapillárison át történő hozzáadása közben 400 ml térfogatra pároljuk be. Végül 600 ml etüacetátot adunk hozzá, egy órán át 0°-on állni hagyjuk, szűrjük és a szűredéket etilacetáttal mossuk, így egy, még foszfáttartalmú nyersterméket kapunk (5,19 g). Ezt 25 ml vízben feloldjuk és 750 ml Sephadex® G 10-zel töltött oszlopon (oszlopátmérő 4,5 cm) szűrjük át. Az első 350 ml eluátumot eldobjuk, az ezt követő 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5
