164816. lajstromszámú szabadalom • Eljárás anyarozs-alkaloidok, főként ergokriptin és ergokornin fermentációs előállítására

7 164816 8 magnézium szül fát káliumdihidrogénfoszfát nátriumklorid ammóniumhidroxid ad pH 5,2 ad 1000,0 ml víz A tenyésztést rázóasztalon 24 C -on 6 napig folytatjuk, majd a 400 ml tenyészettel 10 literes laboratóriumi fermentorban 6 liter SB 103 jelű táptalajt oltunk. Az SB 103 táptalaj összetétele az alábbi: szacharóz 100,0g borostyánkősav 10,0 g nátriumklorid 10,0 g ammóniumnitrát 3,0 g kalcium nitrát 1,0 g káliumdihidrogénfoszfát 0,5 g magnéziumszulfát 0,3 g ammóniumhidroxid ad pH 5,6 víz ad 1000,0 ml A fermentlevet 25 C° mellett percenként 240 fordulattal keverjük és 0.5 l/l/perc levegő bevezetése mellett a fermentációt 5 napon át végezzük. A kapott fermentlé szárazanyagtartalma 3,14%, a mért alkaloidmennyiségek összege az 1. példában leírt módon meghatározva 1046 gamma/ml, ebből ergometrin 310 gamma/ml, ergokornin és ergokriptin 636 gamma/ml. A fermentlé feldolgozását az 1. példában megadott módon végezzük. 3. példa Az 1. példa szerinti törzzsel SB 010 jelű szilárd táptalajon 30 napos inkubálással micélium réteget növesztünk. Az SB 010 jelű táptalaj összetétele a következő: 0,3 g A tenyészetet az agar felületéről leválasztjuk és a 0,5 g 2. példa szerinti módon SC 100 jelű táptalajon 10,0 g oltótenyészetet készítünk. A 6 napon a rázott tenyészetek 400—400 ml-ével 10 literes fermentorok-5 ban sterilezett 6-6 liter SB 101 jelű táptalajt oltunk és a tenyésztést a 2. példában megadott körülmények között 5 napon át folytatjuk. Ekkor a tenyészetekből 18 litert oltókannában egyesítünk és azzal félüzemi 300 literes fermentorban 200 liter SC 101 jelű folyékony táptalajt oltunk. A táptalaj szálas agart nem tartalmaz, egyebekben a leírásban megadott összetételnek felei meg. A fermentlevet percenként 300 fordulatszámmal keverjük és 9 köbméter/óra levegő bevezetése mellett a fermentációt 25 C°-on 6 napig végezzük. Az 55-60. órától kezdve a tenyészet pH értékét ammóniumhidroxid adagolásával pH 4,5 értékben tartjuk. A tenyésztés 6. napján a fermentlé szárazanyagtartalma 3,42% összalkaloid tartalma 1246 gamma/ ml, ebből ergometrin 202 gamma/ml, ergokornin és ergokriptin 646 gamma/ml. A fermentlé feldolgozását az 1. példában megadott módon végezzük. 10 15 20 25 szacharóz borostyánkősav ammóniumnitrát kálciumnitrát káliumdihidrogénfoszfát magnézi um szulfát ammóniumhidroxid ad pH 5,2 szálas agar víz ad 1000,0 ml 30 35 40 45 100,0 g 10,0g 10,0 g 1,0 g 0,25 g 0,25 g 25,0 g 50 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás anyarozs-alkaloidok, főként ergokriptin és ergokornin előállítására Claviceps purpurea törzzsel szacharózt és szervetlen nitrogént, valamint egyéb önmagukban ismert adalékot tartalmazó folyékony táptalajon történő levegőztetett fermentáció útján, azzal jellemezve, hogy mikroorganizmusként az OKI 88/1972 szám alatt letétbe helyezett Claviceps purpurea törzset alkalmazzuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a törzs fenntartásához és/vagy tenyésztéséhez szervetlen nitrogénforrásként 0,1%—1,0% mennyiségben valamely nitrát sót, előnyösen ammóniumnitrátot tartalmazó táptalajt alkalmazunk. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a törzs fenntartásához és/vagy tenyésztéséhez adalékanyagként 0,03%-0,08%, előnyösen 0,05% káliumdihidrogénfoszfátot tartalmazó táptalajt alkalmazunk. A kiadásért felel: A Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 750109, OTH, Budapest