164639. lajstromszámú szabadalom • Eljárás többszálú, interferon- indukáló hatású poliriboinozinsav-poliribocitidilsav komplexek előállítására
164639 2. példa Az 1. példában ismertetett eljárással előállított, részben lebontott. rIn iC n komplex termékek (relatív viszkozitás: 1,05-2,1) interferon-indukáló hatását a kezeletlen rIn xC n komplex (relatív viszkozitás: 3,9) aktivitásával hasonlítjuk össze. Megvizsgáltuk a vegyületek nyúlon kifejtett interferon-indukáló hatását, élő sejttenyészetekben egér-pneumónia vírusfertőzés ellen kifejtett védőhatását és egerek pneumonia vírusfertőzésével szemben kifejtett védőhatását. Az eredményeket a 2. táblázatban közöljük. Megjegyzések a 2. táblázathoz: 10 xAz rI n iC n komplex beadása után 2 órával az állatok vérszérumából mintát veszünk, és hígításos módszerrel megvizsgáljuk az interferon mennyiségét. Gazdasejtként elsődleges nyúl-vesesejteket, fertőzést kiváltó vírusként hólyagos szájnyálkahártya-gyulladás vírust használunk. AAz egereket intranazálisan 0,3 ml rInxC n oldattal kezeltük, majd a kezelés után 3 órával az állatokat 30LDS0 mennyiségű egér-pneumónia vírussal megfertőztük. A 2. táblázat adataiból kitűnik, hogy a 4,2-7,8» 106 átlag-molekulasúlyú rI n iC n polimerek mutatnak az egér pneunfcnia-vírussal szemben kedvező hatást. 2. táblázat Felhasznált rIn iC n polimer Interferon-indukáló hatás PVM elleni védőhatás nyúlon sejttenyészeten; besugárzás relatív átlagos dózis interferon legkisebb hatásos perc viszk. mol. súly Mg/nyúl faktor* dózisig/ml 0,5 2,1 4,2-10* 1,0 1,7 2,3-10* 3,0 1,4 1,2-106 4,0 12,0 16,0 1,3 7,4-10 s 1,1 4,6-10 s 1,05 2,8-105 5 1 >640,320 5, 80 0,008 Egér védelme PVM-mel szemben dózisTM túlélők %o& Mg/egér növekedése 0 3,9 7,8-10« 5 >640,320 0,002-0,004 1 160,320 4,0 94 1,0 80 0,25 60 4,0 90 1,0 75 0,25 60 4,0 47 1,0 55 0,25 20 4,0 75 1,0 42 0,25 20 4,0 50 1,0 45 0,25 5 4,0 30 1,0 15 0,25 5 4,0 24 1,0 12 0,25 20 Kontroll <5 <5 0,0 3. példa 55 Előzetesen hangbesugárzással kezelt, körülbelül 1,3 relatív viszkozitású, 1 mg/ml koncentrációjú rIn :rC n komplex oldatot 4% gyöngy-agarózzal (Sepharose B) töltött oszlopra viszünk fel, és a 60 polimert az oszlop üres V0 (V 0 = oszlop-térfogat - gyöngy-térfogat) térfogatánál nagyobb térfogatú foszfát-konyhasó-pufféroldattal (0,006 mól nátriumfoszfátot és 0,15 mól nátriumkloridot tartalmazó oldat, pH = 7) eluáljuk. Kilenc eluátum- 65 frakciót gyűjtünk össze. Az rIn iC n komplex átlag-molekulasúlya az egyes frakciókban 6,0« 104 és >106 között változott. Megvizsgáltuk az egyes frakciók nyúlon kifejtett interferon-indukáló hatását és elsődleges nyúl-vesesejt-tenyészeten egérpneumónia vírusfertőzés ellen kifejtett védőhatását. Az eredményeket a 3. táblázatban ismertetjük. Az adatokból kitűnik, hogy az alacsony átlagmolekulasúlyú tartományban (<10s ) az egérpneumónia vírus elleni aktivitás csökken. 3
