164094. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az EM-49 antibiotikum és összetevői előállítására

MAGTAB NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1972. IV. 26. (MU-483) Amerikai Egyesült Államok-beli elsőbbségei: 1971. IV. 27. (137 894), 1972. IV. 07. (242 047) Közzététel napja: 1973. VII. 28. Megjelent: 1975. V. 31. 164094 Nemzetközi osztályozás: C 12 d 9/20 Murao Sawao vegyész, Sakai-shi, Osaka, Japán, Meyers Edward vegyész, East Brunswick, Parker William Lawrence vegyész, North Brunswick, New Jersey, Amerikai Egyesült Államok Eljárás az EM—49 antibiotikum és összetevői előállítására 1 2 A találmány tárgya eljárás az EM-49 elnevezésű új antibiotikum előállítására és az EM-49-a, EM-49-a, EM-49^y, EM-49-Ő, és EM-49 SMF jelű összetevőire való szétválasztására. Az új antibiotikumot úgy állítjuk elő, hogy a 5 Bacillus circulans ATCC 21656 mikroorganizmust asszimilálható szénforrást és nitrogénforrást tartalmazó vizes táptalajban süllyesztett aerob körülmények között addig tenyésztjük, amíg a fermentlé antibiotikus hatása jelentékennyé válik. 10 A fermentlevet ekkor megsavanyítjuk, a szilárd anyagokat szűréssel elválasztjuk, vízzel mossuk és a mosóvizet hozzáadjuk a szűredékhez. Az egyesített mosóvizet és szűredéket vízzel nem elegyedő alkohollal, előnyösen n-butanollal extraháljuk. Az 15 alkoholos kivonatokat koncentráljuk, és az antibiotikumot szerves oldószerrel, például etilacetáttal, acetonitrillel, éterrel vagy előnyösen acetonnal kicsapjuk. Ä terméket víz-alkohol-szerves sav rendszerben, például n-propanol-n-butanol-víz-ecet- 20 sav rendszerben végzett ellenáramú megoszlással vagy heliantát sóvá alakítva és a sóból ismét felszabadítva tovább tisztíthatjuk. Ezekkel a műveletekkel az EM—49 antibiotikumot a fermentlé megsavanyítására használt savnak 25 megfelelő sóként különítjük el. A sót egy bázissal, például ammóniumhidroxiddal, nátriumhidroxiddal, báriumhidroxiddal közömbösítve és a terméket vízzel nem elegyedő alkohollal, például n-butanollal extrahálva a szabad bázishoz juthatunk. 30 Az így kapott EM^49 antibiotikum hatásos mikrobák ellen. Hatékonyságát alább ismertetjük. A későbbiekben leírt finomabb elválasztási módszerekkel ez az antibiotikum négy olyan frakcióra különíthető el, amelyek szerkezetileg rokon hatóanyagokból állnak, továbbá egy olyan ötödik frakcióra, amelynek szerkezete még nincs pontosan felderítve. Az 1. ábra az EM-49 antibiotikum hidrokloridjának infravörös spektrumát mutatja KBr-ben. A 2. ábra az EM-49 antibiotikum hidrokloridjának 100MHz-es NMR spektrumát mutatja dimetilszulfoxid-d6 -ban. A 3. ábra az EM—49 antibiotikum infravörös spektrumát mutatja KBr-ben. A 4. ábra az EM-49 antibiotikum 60MHz-es NMR spektrumát mutatja dimetilszulfoxid-d6-ban. Az 5. ábra az EM—49-a antibiotikum infravörös spektrumát mutatja KBr-ben. A 6. ábra az EM-49-0 antibiotikum infravörös spektrumát mutatja KBr-ben. A 7. ábra az EM-49-7 antibiotikum infravörös spektrumát mutatja KBr-ben. A 8. ábra az EM-49-6 antibiotikum infravörös spektrumát mutatja KBr-ben. A 9. ábra az EM-49-SMF antibiotikum infravörös spektrumát mutatja KBr-ben. 164094