164073. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pirogénmentes plazmapótló előállítására - hidroxietilkeményítő alapú km
164073 10 szert, például Raney-nikkelt. Ezt a keveréket leszűrtük, és a víztiszta szűredéket desztillált vízzel feltöltöttük 200 ml-re. Kevés nátriumkloridot, káliumkloridot, kalciumkloridot, nátriumlaktátot és glukózt hozzáadva izotonikus oldatot készítettünk. A kapott oldatot zárt edényben 1 óra hosszat 100 C°-on melegítve sterilizáltuk. 4. példa: 14 g hidroxietilkeményítőt (SF: 0,5-0,6: belső viszkozitás: 0,30) 50 C°-on keverés közben feloldottunk 140 ml desztillált vízben. Ehhez az oldathoz 3,26 ml 0,5 n sósavat adtunk, 1 óra hosszat 100C°-on tartottuk, és lehűtöttük. Szükség esetén a keveréket aktívszénnel kezeltük. Lehűlés után a keverék pH-ját n nátriumhidrogénkarbonáttal vagy n nátriumhidroxiddal beállítottuk 7,0-7,4 értékre, majd hozzáadtunk 1,0 g nátriumkloridot, 0,06 g káliumkloridot, 0,04 g kalciumklorid-dihidrátot, 0,448 g nátriumlaktátot és 2g glukózt. Szükség esetén hozzáadtunk 1-50 mg Raney-nikkelt pirogénmentesítő szerként, és 30 percig 90-100 C°-on melegítettük, majd hozzáadtunk aktívszenet, felkevertük, és leszűrtük. Az így kapott oldatot desztillált vízzel feltöltöttük 200 ml-re, és a pH-ját beállítottuk 6,2 + 0,5-re. Az oldatot víztisztára szűrtük, edénybe töltöttük, és lezártuk. A készítményt 1 óra hosszat 100 C°-on melegítve sterilizáltuk. 5. példa: Hidroxietilkeményítőt az 1. példában leírt módon sósavval hidrolizálva a 2. táblázatban megadott turbiditású és viszkozitású hidroxietilkeményítő-oldatokat kaptunk. 2. táblázat Hidroxietilkeményítő-oldat sósavtartalmának, turbiditásának és viszkozitásának összefüggése Sósavtartalom Turbiditás Viszkozitás mg/liter cp 0,00625 n 22,6 4,64 0,01250 n 18,0 3,11 0,01875 10,5 2,34 0,02500 n 8,0 1,87 0,03125 n 4,0 1,57 0,03750 n 4,3 1,57 (1) A turbiditást nefelométerrel mértük. (2)' A viszkozitást rotációs viszkoziméterrel mértük. 6. példa: Hidroxietilkeményítőt (SF: 0,54: belső viszkozitás: 0,30: molekulasúly: 232 000) az 5. példa 10 15 20 25 30 35 40 szerint 0,0125 n sósavval kezeltünk az 1. példában leírt módon. Az így kapott hidroxietilkeményítőoldat víztiszta volt 0,54 SF értékkel, 0,101 belső viszkozitással és 6,0 mg/liter turbiditással. Az oldatot gél-szűrtük Sephadex G-200 műgyantán, 2,5 cm x 40 cm méretű oszlopot használva. Az eluálást emelkedő módszerrel végeztük 0,2-0,3 ml/perc (0,048-0,061 ml/cm2 • perc) sebességgel. A vizsgálatra használt térfogat 0,25 ml (2,5 mg) volt. Szacharid-meghatározást végeztünk az Anthron-módszerrel, az eredményeket a 12. ábra mutatja. A szaggatott vonal kezeletlen hidroxietilkeményítőre (SF: 0,55: belső viszkozitás: 0,30), a folytonos vonal hidroxietilkeményítő-készítményre (SF: 0,55: belső viszkozitás: 0,10) vonatkozik. Az ábrából kitűnik, hogy a polimer a savkezelés hatására 40%-kal eltolódott a kisebb molekulaméret irányában. A hidroxietilkeményítő belső viszkozitásából az utóbbi oldatban mintegy 40 000 kCzepes molekulasúly adódik. 7. példa: Hidroxietilkeményítőt (SF: 0,5-0,6: előnyösen: 0,55: belső viszkozitás: 0,3) az 1-5. példák szerint kezeltünk. A kapott hidroxietilkeményítő-oldat SF értéke: 0,55 és belső viszkozitása: 0,08-0,14 (előnyösen 0,10) volt. Az oldatot beállítottuk 6,2±0,5 pH-ra, és feltöltöttük 100 ml-re. így 6% hidroxietilkeményítőt, 0,5% nátriumkloridot, 0,03% káliumkloridot, 0,02% kalciumkloriddihidrátot, 0,224% nátriumlaktátot és 1% glukózt tartalmazott. A kissé zavaros oldatot víztisztára szűrtük, palackokba töltöttük, és lezártuk. Ez a hidroxietilkeményítőkészítmény 100Cc -on 1 óra hosszat sterilizálva felhasználható plazmapótlóként. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás pirogénmentes plazmapótló előállítására azzal jellemezve, hogy 0,5—0,6 (előnyösen 45 0,55) SF értékű és 0,28-0,30 belső viszkozitású hidroxietilkeményítőnek savas kezeléssel csökkentjük a molekulasúlyát és beállítjuk a hidroxietilkeményítőt 0,55 SF értékre és 0,08-0,14 belső viszkozitásra, adott esetben depirogénezőszerként 50 Raney-nikkelt adunk hozzá, és injekcióra alkalmas desztillált víz hozzáadásával 6% hidroxietilkeményítőt tartalmazó oldatot készítünk, és ehhez előnyösen különféle sókat, előnyösen 0,5% nátriumkloridot, 0,03% káliumkloridot, 0,02% kalcium-55 kloriddihidrátot, 0,224% nátriumlaktátot és 1% glukózt adunk, majd az oldat pH-ját beállítjuk 6,2±0,5 értékre, és adott esetben aktívszénnel kezeljük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási 60 módja azzal jellemezve, hogy a hidroxietilkeményítőnek vizes oldatban kismennyiségű savval való hidrolizálással csökkentjük a molekulasúlyát, pirogénmentesítő anyag hozzáadásával eltávolítjuk a pirogén anyagot, és az oldatot aktívszénnel kezelve 65 víztiszta oldatot állítunk elő. 5
