164014. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, adrenokortikotróp hatású 'béta-ala 1-oktadekapeptidamidok előállítására
7 164014 8 115-ös rendszer: jégecet-piridin-hangyasav-víz (63:21:10:6) 2. példa: Szuszpenziót állítunk elő az alábbi összetevőkből: 1. példa: H-ß-Ala-Tyr-Ser-Met-Glu-His-Phe-Arg-Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys-Lys-Lys-NH2 előállítására 10 200 mg Bok-/3-Ala-Tyr-Ser-Met-Glu(OBut)-His-Phe-Arg-Tyr-Gly-Lys(Bok)-Pro-Val-Gly-Lys(Bok)Lys(Bok)-Lys(Bokj-Lys(Bok)-NH2-ot 6 cm 3 9Ó%os trifluorecetsavba viszünk, a rendszert 90 percig 15 25 C°-on állni hagyjuk, majd az oldatot 250 cm3 jéghideg, peroxidmentes éterbe öntjük és a kivált csapadékot nuccson leszűrjük. Éterrel alaposan kimossuk, szárítjuk. Az ecetsavas só előállítása céljából 5%-os ecetsavban oldjuk és gyengén bázisos 20 ioncserélőgyantából álló oszlopon (Merck No. II. acetát alak) szűrjük. 5%-os ecetsavval mossuk az oszlopot, egyesítjük az eluátumokat és liofilizáljuk. fl-Ala'-Lys17 ' 18 -^" 18 -kortikotropin-Lys18 -amid-acetát ZnCl2 Na2 HP0 4 -2H 2 0 NaCl benzilalkohol 0,6 n NaOH pH = desztillált víz ad 3. példa: 8,6-ig 1,0 mg 5,25 mg 1,05 mg 2,0 mg 10,0 mg 1,0 cm3 A szabad oktadekapeptidamid cellulózrétegen végzett vékonyréteges kromatográfiája alapján Rfl0l= 0,38: „Alox" alumíniumoxidon (a Camag cég gyártmánya), RfioiB= 0,33 (adszorbens: alumíniumoxid). Hozam: 137 mg. 25 30 Szuszpenziót állítunk elő az alábbi összetevökből: ß-Ala1 -Lys 17 ^-ß 1 " 18--kortikotropin-Lys18 -amid-acetát 0,5 mg ZnCl2 5,25 mg nátriumpolifoszfát (közepes lánchossz = 26) 1,00 mg NaCl 2,00 mg benzilalkohol 10,0 mg 0,6 n NaOH pH = 8,5-ig desztillált víz ad 1,0 cm3 A kiindulási állítjuk elő: terméket a következőképpen példa. 1,5 g Bok-0-Ala-Tyr-Ser-Met-Glu(OBut)-His-Phe-Arg-Tyr-Gly-OH. 4H20-t (Ann. 726, 185 (1969) 35 finoman elporítunk. Hozzáadunk 60 cm3 dimetilformamidot, majd 1,8 g H-Lys(Bok)-Pro-Val-Gly-Lys(Bok)-Lys(Bok)-Lys(Bok)-Lys(Bok)-NH2 -t (v. ö. 1 164 807 sz. nagy-britanniai szabadalmi leírás). Ezután hozzáadunk 1,0 n sósav-oldatot és 300 mg 4n N-hidroxiborostyánkősavimidet, a rendszert 45 C°-ra melegítjük és hozzáadunk 300 mg diciklohexilkarbodiimidet. A rendszert nitrogénlégkörben 22 órán át keverjük 45 C°-on, majd 0 C°-ra 45 hűtjük és a reakciókeveréket 1 liter peroxidmentes, jéghideg éterbe visszük. 18 órán át 0 C°-on hagyjuk állni, majd a csapadékot a nuccson szűrjük, vákuumban 35 C°-on szárítjuk, tisztítás céljából dimetÜformamid-ecetészter elegyből kétszer 50 kicsapjuk, szárítjuk, majd metilalkohol-víz elegyből újból kicsapjuk. Az így kapott Bok-/3-Ala-Tyr-Ser-Met-Glu(OBut> Hi s-Phe-Arg-Tyr-Gly-Lys(Bok)-Pro-Val-Gly-Lys(Bok)- 55 Lys(Bok)-Lys(Bok)-Lys(Bok)-NH2 „Alox" alumíniumoxid-lemezeken elvégzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálata szerint (a Camag cég terméke): Rf 115 =0,75. Analóg módon állítható elő a H-ß-Ala-Tyr-Ser- 60 Met-Glu-His-Phe-Arg-Tyr-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys-Orn-Orn-NH2 is. E termék cellulózon elvégzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálata szerint RflOl = 0,34, alumíniumoxidon pedig Rf 10iB=0,28. 65 Szuszpenziót állítunk elő az alábbi összetevőkből: ß-Ala'-Lys17 ' 18 -/? 1 ~ 18--kortikotropin-Lys18 -amid-acetát 1,0 mg ZnCl2 5,25 mg CalgonR 322 2,0 mg NaCl 1,0 mg benzilalkohol 10,0 mg 0,5 n NaOH pH = 8,2-ig desztillált víz ad 1,0 cnr 5. példa: Injekciós oldatot állítunk elő az alábbi összetevőkből: 0-Ala1 -Lys 17 > ,8 -0 1 ~ 18 -kortikotropin-Lys18 -amid-acetát 0,5 mg jégecet 1,22 mg nátriumacetát 0,607 mg nátriumklorid 8,1 mg desztillált víz ad 1,0 cnr 6. példa: Porampullát állítunk elő az alábbi összetevőkből: ß-Ala'-Lys17 ' 18 -/? 1 " I8--kortiktropin-Lys18 -amid-acetát mannit 1,0 mg 10,0 mg 4
