163787. lajstromszámú szabadalom • Eljárás angiotenzin-I-nok angiotonzin II-vé való inzimes átlakítását akadályozó peptidek előállítására

163787 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30. 31. 32. Thr-Pro Pro-Thr Arg-Pro Pro-Arg' Try-Pro-Glu-Heu Pro-Glu-Thr-Prö Pro-Thr Arg-Pro-Pro-Arg Try-Pro Gly-Pro-Pro-Gly-Arg-Pro Pro-Arg Try-Pro Pyr-Try Pyr-Try Gly-Pro-Pro-Gly-Arg-Pro-Pro-Arg-Try-Pro-Gln-Ileu-Pro-Pro Pro-Gln-Ileu-Pro Thr-Pro-Gln-Ileu Pro-Thr-Pro-Gln-Arg-Pro-Thr-Pro-Pro-Pro Héu-Pro-Pró -GluJleuiPro-Pro -Pro-Glu-Ileu-Pro -Thr-Pro-Glu-Ueu •Pro-Thr-Pro-Glu•Arg-Pro-Thr-Pro•Glu-Ileu-Pro-Pro Pro-Glu-Ileu-Pro•Gly-Pro-Glu-Ileu•Pro-Gly-Pro-Glu•Arg-Pro-Gly-Pro-Pro^Arg-Pro-Thr -Pro-Arg-Pro-Gly Gln-Ileu-Pro-Pro Pro-Gln-Ileu-Pro•Gly-Pro-Gln-Ileu •Pro-Gly-Pro-Gln-Arg-Pro-Gly-Pro•Pro -Pro-Pro Ileu-Pro-Pro •Gln-Ileu-Pro-Pro -Pro -Pro-Pro •Ileu-Pro-Pro -Glu-Ileu-Pro-Pro -Pro -Pro-Pro Ileu-Pro-Pro Glu-Ileu-Pro-Pro -Pro -Pro Pro -Pro-Pro Ileu-Pro-Pro •Gln-Ileu-Pro-Pro A találmány szerinti vegyületek felhasználhatók eredeti alakjukban vagy fiziológiailag elfogadható péptidsóik alakjában. Ilyen sók például a hidrokloridok, hidrobromidok, acetátok és halogénacetátok, mint a trifluoracetát és a diklóracetát. Előállításukra a szabad peptidet a megfelelő savval reagáltatjuk. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek felhasználhatók szabad, azaz nem védett peptidekként vagy olyan védett peptidekként, amelyekben egy vagy mindkét N-terminális aminosav vagy a C-terminális karboxilcsoport védve van. Az aminocsoportot védő csoportot különféle tényezők alapján választjuk meg. Ilyenek például az aminosav vagy peptid N-terminális csoportjához kapcsolni kívánt aminosav vagy peptid természete, a védőcsoport eltávolításának könnyű lehetősége, az oldószer, a hőmérséklet stb. Néhány általánosan használt aminocsoportot védő csoport a következő: 1. aminhidrokloridok 2. p-toluolszulfonil-csoport 3. benziloxikarbonil-csoport 4. szubsztituált benziloxikarbonil- vagy más uretánt védő csoportok 5. trifluoracetil-csoport 6. ftalil-(vagy ftaloil-) csoport 7. difenilmetil-(benzhidril-) és trifenilmetil(tritil-) csoport 8. for mile soport 9. laktámok 10. Schiff-bázisok és enaminok 11. benzilszulfonil-csoport 12. tritilszulfonil- és arilszulfonil-csoport Néhány egyedi védőcsoport a terc-butiloxikarbonil-csoport, az o-nitrofenilszulfonil-csoport és a tozilcsoport. Teljesebb jegyzékek találhatók a peptidszintézissel foglalkozó könyvekben, ilyenek például Bodanszky és munkatársai: „Peptide Synthesis", 4. fejezet, Interscienc e, 1966 vagy Schroder és munkatársai: „The Peptides", 1. kötet, XXIII- XXIX. oldal, Academic Press, 1965. A karboxilcsoportot védő csoportot különféle tényezők figyelembevételével választjuk. Ilyenek 5 például az előállítani kívánt peptid természete, a védőcsoport eltávolíthatósága, az oldószer, a hőmérséklet stb. Néhány általánosan használt aminocsoportot védő csoport a következő: 10 1. sóképző csoportok ; 2. kevés szénatomos alkilészterek 3. fenillel szubsztituált kevés szénatomos alkilészterek, például benzil- és benzhidrilészterek 15 4. p-nitrobenzil-észterek 5. p-metoxibenzil-észterek 6. ftálimidometil-észterek 7. terc-butilészterek 8. ciklopentil-észterek 20 9. metiltioetil-észterek 10. trimetilszilil-észterek 11. hidrazidok Néhány egyedi karboxilt védőcsoport a metil-, etil-, propil-, terc-butil- és benzilcsoport. Teljesebb 25 jegyzék található a peptidszintézissel foglalkozó standard művekben, például Bodanszky és munkatársai és Schroder és munkatársai fenti munkáiban. A találmány szerint előállított vegyületek gátol-30 ják angiotenzin I-nek angiotenzin II-vé való átalakulását. Mintegy 0,05—10 [i,g/ml koncentrációban gátolják 50% angiotenzin I átalakulását, amikor az utóbbi koncentrációja 5 mmól 0,5 — 5 mg/kg adagolási szinten a találmány szerint készült ve-35 gyületek csökkentik a hipertenziót patkányoknál. Erre a célra perorálisan vagy parenterálisan alkalmazhatók egy találmány szerint készült vegyület megfelelő adagjának fiziológiailag elfogadható hordozóval együtt való beadásával. 40 A találmány szerint készült vegyületekben más funkciós csoportok, például hidroxil- vagy guanidino-csoportok, továbbá az N-terminális aminocsoportoktól eltérő aminocsoportok és karboxilcsoportok szabadok, azaz nem védettek, vagy 45 yédőcsoportokkal ismert módon védettek lehetnek (lásd például Bodanszky és munkatársai és Schröder és munkatársai fent említett műveit). A következő példák szemléltetik a találmány szerinti eljárás végrehajtását korlátozás szándéka 50 nélkül. Valamennyi aminosav L-konfigurációjú. A papírkromatográfiai Rf

értékek meghatározására 20:10:11 térfogatarányú etilacetát-piridinvízrendszert használtunk. Kísérleteink során a kitermelés a példák szakaszaiként 20 és 50% között 55 változott. 1. példa Piroglutamil-triptofil-prolil-arginil-prolil-treonü-60 -prolil-glutaminíl-izóleucil-prólil-prólin a) Glutaminil-izoleucil-prolil-prolin A címben megnevezett vegyület előállítására 65 grammonként kb. 0,5 milliegyenérték prolint tar-2