163626. lajstromszámú szabadalom • Eljárás L-triozin-O-szulfát-csoportot tartalmazó oktapeptidek előállítására

163626 kot szűréssel elválasztjuk, szárítjuk, majd 50 ml forrásban levő etanolból átkristályosítjuk. Súlya 300 mg. Olvadáspontja 190—192°. b) terc-Butoxikarbonil-L-metionil-glicil-L-triptofil-L-leucil-L-aszparagil-L-fenilalanin-amid terc-Butoxikarbonil-L-metionil-p-nitrofenilésztert az 1. példa b) szakaszában leírt módon glicil-L-triptofil-L-leucil-L-aszparagil-L-fenilalanin-amiddal reagáltatva a címben megnevezett hexapeptidet kapjuk. Olvadáspontja 70%-os etanolból átkristályosítva 195—197°. c) terc-Butoxikarbonil-L-aszparagil-L-tirozil-L-metionil-glicil-L-triptofil-L-leucil-L-aszparagil-L-fenilalanin-amid terc-Butoxikarbonil-L-aszparagil-L-tirozin-hidrazidot az 1. példa c) szakasza szerint L-metionil-glicil-L-triptofil-L-leucil-L-aszparagil-L-fenilalanin-amiddal reagáltatva a címben megnevezett oktapeptidet kapjuk. Olvadáspontja 70%-os etanolból átkristályosítva 192—193°. d) L-Aszparagil-O-szulfato-L-tirozil-L-metionil-glicil-L-triptofil-L-leucil-L-aszparagil-L-fenilalanin-amid 320 mg (0,28 mmól) c) szakaszban kapott oktapeptidet feloldunk 17 ml vízmentes dimetilformamid és 17 ml frissen desztillált piridin elegyében. Az oldathoz hozzáadjuk 875 mg piridin-kéntrioxid komplexnek 17 ml dimetilformamiddal készült oldatát. A kapott oldatot 17 óra hosszat szobahőmérsékleten tartjuk, majd vákuumban bepároljuk. A száraz maradékot több ízben 15—15 ml vízzel mossuk, és vákuumban szárítjuk. Kitermelés 350 mg. A nyers vegyülethez 5 ml trifluorecetsavat adunk, majd 20 perc múlva a savat vákuumban eltávolítjuk, a trifluoracetátot dietiléterrel digeráljuk, és szárítjuk. A nyers oktapeptid-szulfátot 0,1 mólos ammóniumkarbonát oldatban oldjuk, és DEAESephadex A-25 oszlopon kromatografálva tisztítjuk. Az 1,5 cm átmérőjű 15 cm magas oszlopot 10 15 20 25 30 35 40 350 ml 0,1 mólos és 350 ml 1,5 mólos ammóniumkarbonát oldatokból készült lineárisan fokozódó koncentrációjú 5 ml-es oldat adagokkal eluáljuk, a 7 ml-es frakciókat gyűjtjük, és megállapítjuk az ultraibolya abszorpciójukat 253 m^-nál. A 10—15. frakciókat egyesítjük, és liofilizálva 45 mg terméket kapunk. Savas hidrolízissel kapott aminosav-összetétele: Asp (1,91); Gly(l,0); Met (0,75); Leu(1,01); Tyr (1,17); Phe (1,08); Ultraibolya spektrum: Amax288 mii (E 3840). A három példában használt kiindulási vegyületeket a következő folyóiratcikkek ismertetik: L-triptofil-L-leucil-L-aszparagil-L-fenilalanin-amid (1. és 3. példa): Morley és Smith, J. Chem. Soc. 1968 C, 726. terc-butoxicarbonil-L-aszparagil-L-tirozin-hidrazid (1., 2. és 3. példa): Experientia 23, 699 (1967). glicil-L-triptofil-L-metionil-L-aszparagil-L-fenilalanin-amid (2. példa): Experientia 23, 701 (1967) és Tetrahedron, Suppl. 8, Part I, 50 (1966). Szabadalmi igénypont Eljárás az S08

H L-Asp-L-Tyr-R-Gly-L-Try-R-L-Asp-L-Phe-NHa általános képletű, L-Tyr-O-szulfát-csoportot tartalmazó új oktapeptidek és savaddíciós sóik előállítására — ebben a képletben az egyik R jel L-metionilcsoportot, a másik R jel L-leucilcsoportot jelent, vagy mindkét R jel L-leucilcsoportot jelent — azzal jellemezve, hogy egy terminális aminocsoportján védett L-Asp-L-Tyr-R-Gly-L-Try-R-L-Asp-L-Phe-NH2 általános képletű oktapeptidet — ebben a képletben R a fenti jelentésű — piridin-kéntrioxid komplexszel reagáltatunk, a védőcsoportot ismert módon eltávolítjuk, majd adott esetben a kapott terméket savval reagáltatva átalakítjuk savaddíciós sójává, és/vagy a kapott terméket ismert módon elkülönítjük. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 4 75-5266 — Szegedi Nyomda