163588. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A 7béta- (D-5-amino-5-karboxi-valeramido) -3-(karbamoiloximetil)-7-metoxi-CEF-3-AM-4-karbonsav antibiotikum előállítására
163588 3 4 zisztensek. Ezek az új termékek emellett hatásosak mind Gram-negatív, mind Gram-pozitív baktériumok ellen, aktivitásuk mértéke, valamint az általuk leküzdhető mikroorganizmusok köre azonban eltérő a különböző vegyületek esetében. A 842A antibiotikumot a Gram-negatív mikroorganizmusok elleni fokozott aktivitás jellemzi. A C-cefalosporinnal ellentétben, amelynek baktériumellenes aktivitása viszonylag csekély, ez az új termék in vivo igen jelentős hatást mutat Gramnegatív baktériumokkal szemben, hatásossága általában a cefalotin hatásosságát is felülmúlja. Aktivitása in vivo kiterjed a Proteus morgana baktériumra is; így ez az antibiotikum elsősorban a következő Gram-negatív baktériumok ellen hatásos: Escherichia coli, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Proteus morganii, Salmonella schottmuelleri, Klebsiella pneumoniae AD, Klebsiella pneumoniae B, és Paracolobactrum arizoniae. A találmány szerinti eljárással tehát a 842A antibiotikumot állítjuk elő. Ezt az antibiotikumot a Gram-negatív baktériumok elleni megnövelt hatásosság és a cefalotinénál nagyobbfokú aktivitás, valamint a cefalosporináz enzimekkel szembeni ellenállóképesség mellett csekély toxikusság is jellemzi; további előnye, hogy igen hamar éri el a gyógyászati alkalmazás során a hatásos vérszintet. A beadás után 6 órán belül a beadott antibiotikum megközelítőleg 100%-a távozik a vizelettel. Emellett az enzimes lebontás elleni általános ellenállóképessége jóval nagyobb a C-cefalosporinénál, a mikroorganizmusok rezisztenciája ezzel az antibiotikummal szemben igen lassan alakul ki és az antibiotikum baktericid hatását huzamos alkalmazás esetén is megtartja. Ez az új antibiotikum orális beadás esetén védelmet nyújt a Paracolobactrum arizoniae 3270, Proteus vulgaris 1810 és Salmonella schottmuelleri 3010 baktériumok általi fertőzéssel szemben; szubkután beadás esetén hatása a kétszerestől tízszeresig múlja felül az ugyanilyen módon beadott cefalotin hatását. A 842A antibiotikumot termelő mikroorganizmus egy eddig ismeretlen Actinomyces-törzs; ezt a törzset eredetileg egyetlen kolóniaként különítettük el egy talajmintából, ferde ágár-táptalajon és az alábbi összetételű „B" tápközegben tenyésztettük. „B" tápközeg: élesztőkivonat 10,0 g glükóz 10,0 g foszfát-puffer 2,0 ml MgS04 .7H 2 0 0,05 g desztillált víz 1000,0 ml pH-érték 6,5 A fenti tápközegben alkalmazott foszfát-puffer összetétele: KH2 P0 4 Na2 HP0 4 desztilállt víz 91,0 g 95,0 g 1000,0 ml 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 tói; e különbségek a különféle biológiai és kémiai vizsgálati módszerekkel mutathatók ki. A 842A antibiotikumnak más, ismert antibiotikumokkal az említett vizsgálatok keretében való összehasonlítása arra az eredményre vezetett, hogy a 842A antibiotikum új, eddig nem ismert termék: A 842A antibiotikumot termelő törzs taxonómiája: A 842A antibiotikumot termelő MA^2908 törzset új Actinomyces-törzsként azonosítottuk. Az e meghatározás során alkalmazott taxonómiai módszert a Bergey's Manual of Determinative Bacteriology 7. kiad., valamint S. A. Waksman a The Actinomycetes c. mű 2. kötetében, a „Classification, Identification and Description of Genera and Species" c. részben (1961) ismerteti. E módszer alkalmazásával azt találtuk, hogy ez a törzs a Streptomyces fajhoz tartozik és az ismert Streptomyces fradiae mikroorganizmus számos jellemző tulajdonságát mutatja. Biokémiai szempontból a megegyezés teljes volt, morfológiai szempontból azonban számos fontos eltérés mutatkozott. így pl. a Streptomyces fradiae légmicéliuma tengerikagylóhéj-rózsaszín árnyalatú, míg az MA—2908 törzsé rendszerint krémszínű. A vegetatív fejlődésben is mutat eltéréseket az MA—2908 kultúra a különféle tápközegeken képezett oldható pigment szempontjából, emellett a szokásos taxonómiai táptalajokon az MA—2908 mikroorganizmus nem mutatott sporulációt. E különbségek alapján az MA—2908 mikroorganizmusnak az új Streptomyces lactamdurans species-nevet adtuk. Az alábbi táblázatban összehasonlítva ismertetjük a Streptomyces lactamdurans és az ismert Streptomyces fradiae biokémiai jellemző sajátságait. A táblázatban szereplő valamennyi adat — kivéve ha kifejezetten más van megadva — 28 C° hőmérsékleten történő háromheti inkubáció utáni állapotra vonatkozik. Az e kísérletek során alkalmazott tápközegek pH-értéke megközelítőleg semleges, tehát 6,8—7,2 volt. A fiziológiai vizsgálatokat 7 nap és 21 nap után végeztük. Összehasonlító biokémiai adatok A kultúra néhány napi fejlődése után azt tapasztaltuk, hogy sporuláció nem mutatkozik. A mikroorganizmus egy olyan antibiotikumot termel, amely határozottan különbözik az ismert antibiotikumok- 65 Streptomyces Streptomyces lactamdurans fradiae légmicélium egyenes, néegyenes, elágazó mi elágazásszálakkal sal konidiumok nem láthatók pálcaalakúak oldható pigment nincs nincs optimális hőmérsékl . 28 C 25 C invertáz negatív negatív nitrát-redukció negatív negatív zselatin-elfolyósítás pozitív pozitív cellulóz-haszno sítás negatív negatív lakmusztej alkalikus alkalikus peptonizálás peptonizálás A 842A antibiotikumot termelő törzs morfológiája. A kultúra morfológiai sajátságainak vizsgálatára alkalmazott, alább felsorolt táptalajok egyikén 2
