162943. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyógyszerkönyvi tisztaságú neomicin-szulfát előállőállítására, tisztítással
7 162943 8 60 C° hőmérsékleten vákuumszárítószekrényben szárítottuk. így 1740 g Ph.Hg.VI. minőségű neomicin-szulfáthoz jutottunk, amely mennyiség a savanyú szűrtlé hatóanyagtartalmára vonatkoztatva 75%-os 5 kitermeléssel volt nyerhető. 2. példa: 10 Az 1. példában ismertetett úton nyert neomicin tartalmú savanyú szűrtlé 500 literes részletének pH-ját tömény ammónium-hidroxiddal 8,5-re állítottuk be, majd két sorbakapcsolt, egyenként 10-10 liter előzőleg NH+ 4 -ciklusba hozott 15 WOFATITCP kationcserélő gyantát tartalmazó — ioncserélő oszlopon vezettük keresztül 40 liter/ óra sebességgel. Az ioncsere után a fermentlétől kimostuk az 20 ioncserélő oszlopokat ionmentes vízzel, és a megkötött neomicint 1%-os ammónium-hidroxiddal eluáltuk. Az 1930 g neomicint tartalmazó eluátum extinkciója: 0,650 volt. Ezt ammóniamentesítés céljából vákuumban 36 literre bepároltuk, majd a 25 sűrítményt 10 n kénsawal pH = 2,0-ra savanyítottuk. Az 1,350 extinkciójú savas oldatot 60C°-ra felmelegítve, térfogatára számolt 20%-nyi mennyiségű, előzőleg aktív formába hozott - WOFATIT EZ színtelenítő gyantát tartalmazó ioncserélő oszlopon 30 15 liter/óra sebességgel színtelenítettük. Derítés után — kénsawal pH = 2,0-ra savanyított ionmentes vízzel — kimostuk az oszlopból a neomicint. így 53 liter 0,500-as extinkciójú oldatot kaptunk, melynek hőmérsékletét továbbra is 60 C°-on tartva, 35 pH-ját 5,2-re állítottuk be dietil-aminnal. Ezután intenzív keverés közben, kb. 40 perc alatt 280 g NORIT-A aktívszenet adtunk az oldathoz, mintegy 8 részletben. Az utolsó részlet beadagolása után még 10 percig kevertettük az oldatot, majd mele- 40 gen SEITZ K-5 lapon leszűrtük és 15 C°-ra visszahűtöttük. A 0,023 extinkciójú oldat 1850 g neomicint tartalmazott. Ezt az oldatot keverés közben 270 liter 15C°-os metanolba csurgatva 35 perc alatt kicsaptuk, majd újabb 30 perces keverés után 45 a csapadékot kiszűrtük, 20 liter friss metanollal átmostuk, és 60 C° hőmérsékletű vákuumszárítószekrényben szárítottuk. A kapott termék súlya: 1830 g volt. 50 Ezt a nyersterméket állandó keverés közben feloldottuk 5000 ml desztillált vízben. Oldás után az oldat extinkciója: 0,305 volt. Az oldatot felmelegítettük 60C°-ra. A hőmérséklet állandó értéken tartása mellett — intenzív keverés közben — 180 g 55 NORIT-A aktívszenet adtunk az oldathoz, mintegy 8 részletben, kb. másfél óra alatt, majd még 15 percig kevertettük a meleg oldatot. Ezután a szenes oldatot melegen sterilre és szálmentesre szűrtük és visszahűtöttük 15C°-ra. Az oldat extinkciója: 60 0,039 volt. A fenti oldatot 25 liter előzőleg sterilre és szálmentesre szűrt metanolba csurgatva 40 perc alatt kicsaptuk, intenzív keverés közben. Még további 30 perc kevertetés után a csapadékot kiszűr- 65 tük, 5 liter fenti tisztaságú és hőmérsékletű metanollal mostuk, majd 60 C°-on vákuumszárítószekrényben Szárítottuk. így 1740 g Ph.Hg.VI. minőségű neoniicin-szulfátot kaptunk, amely mennyiség a savanyú szűrtlé hatóanyagtartalmára vonatkoztatva 75%-os hozamú. 3. példa: Az 1. példában ismertetett úton nyert neomicin tartalmú savanyú szűrtlé 500 literes részletét 60C°-ra felmelegítve átvezettük két sorbakapcsolt ioncserélő oszlopon, melyek egyenként 25—25 liter, előzőleg aktív formába hozott WOFATIT EZ színtelenítő gyantát tartalmaztak. Ezután ugyancsak 40 liter/óra sebességgel, — a kénsawal pH = 2,5-re savanyított ionmentes vízzel —, kimostuk az oszlopokból a neomicint. így olyan derített levet kaptunk, melynek extinkciója 0,247 volt. Ezt a derített savanyú szűrtlevet 10 liter tömény ammónium-hidroxiddal pH = 8,5-re állítottuk be, ekkor az extinkció: 0,330 volt. A neutrális derített szűrtlevet két sorbakapcsolt, egyenként 10-10 liter előzőleg NH% -ciklusba hozott WOFATITCP kationcserélő gyantát tartalmazó -ioncserélő oszlopon vezettük keresztül, lebegőágyban, 40 liter/óra sebességgel. A gyantaoszlopok a derített neutrális szűrtlé neomicin tartalmának 95%-át megkötötték. Az ioncsere után a gyantaoszlopokat ionmentes vízzel kimostuk a fermentlétől, és a megkötött neomicint 1%-os ammónium-hidroxiddal eluáltuk, melynek eredményeként 2113 g neomicint tartalmazó 70 liter eluátumot kaptunk, 0,490 extinkciós értékkel. Ezen eluátumot 45 C°-on, vákuumban 30 literre bepároltuk. Bepárlás után az ammóniát már nem tartalmazó oldatot 10 n kénsawal pH = 2,0-ra savanyítottuk, 1,650 volt az oldat extinkciója. Ezt a neomicin oldatot térfogatára számolt 20%-nyi mennyiségű, — előzőleg aktív formába hozott — WOFATIT EZ gyantát tartalmazó ioncserélő oszlopon direktágyban 15 liter/óra sebességgel színtelenítettük. Derítés után —kénsawal pH = 2,0-ra savanyított ionmentes vízzel —, kimostuk az oszlopból a neomicint. így 50 liter 0,460 extinkciójú oldatot kaptunk, melynek pH-ját dietil-aminnal 5,l-re beállítva, hirtelen felmelegítettük 60 C°-ra. Ezután 310 g NORIT-A aktívszenet adtunk az oldathoz, 7 részletben, állandó keverés közben, az oldat hőmérsékletének állandó értéken tartása mellett, kb. 40-45 percen keresztül. A szenes oldatot SEITZ K-5 lapon melegen leszűrtük, majd 15 C°-ra visszahűtöttük, amelynek eredményeként olyan neomicin oldatot nyertünk, amelynek extinkciója: 0,018 volt. Ezt az oldatot 250 liter 15C°-os metanolban 30 perc alatt, állandó keverés közben kicsaptuk, majd újabb 30 perces kevertetés után a csapadékot kiszűrtük, friss metanollal átmostuk, és 60 C°-on vákuumszárítószekrényben szárítottuk. A kapott termék súlya: 1980 g volt. 4
