162942. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-[D-(alfa-amino-alfa-fenilacetamido)]-3-(5-metil-1,3,4-oxadiazol- 2-iltiometil)-cef-3-ém-4-karbonsav előállítására
7 162942 8 szárítjuk,. A kitermelés: 191g. Op.: 252° (bomlik). [a]2 2 D C° = +207° (C = 1 % H2 0). 2-Merkapto-5-metil-l,3,4-oxadiazol Irodalmi hivatkozás: E. Hoggarth: J. Chem. Soc. 4811-17 (1952). 14,8 g (0,4 mol) ecetsav-hidrazidot, 45,6 g (0,6 mol) széndiszulfidot és 33,6 g (0,6 mol) káliumhidroxidot 200 ml 100%-os etilalkoholban elegyítünk és az elegyet 2 1/2 órán át 38 C°-on, majd 18 órán át szobahőfokon keverjük. A terméket szűrjük és 100%-os etilalkoholból kevés víz hozzáadásával átkristályosítjuk. Kitermelés: 38 g 2-acetilditiokarbazin-káliumsó. 38 g (0,2 mol) acetilditionkarbazin-káliumsót adunk 100 ml száraz piridinhez és az elegyet 18 órán át visszafolyatás alkalmazása közben forraljuk. Ezután 300 ml vizet adunk az elegyhez és koncentrált sósav-oldattal az oldat pH-ját 2-re állítjuk be. Hűtés után az elegyet szűrjük, a szűrletet 7 órán át etiléterrel folyamatosan extraháljuk. Az éteres oldatot nátriumszulfát felett szárítjuk és vákuumban történő bepárlással kapjuk a terméket. Ezt benzol-„Skellysolve B" elegyből átkristályosítjuk, 78-79°-on olvadó színtelen lemezeket kapunk. Kitermelés: 17 g. Analízis: C3 H 4 N 2 OS-re számítva számított: C=31,02: H=3,47: N=24,12: S=27,61%: mért: C=31,05: H=3,46: N=24,27: S=26,94%. 7-Amino-3-(5-metil-l,3,4-oxadiazol-2-il-tiometil)-cef-3-ém-4-karbonsav [(II) képletű vegyület] 24 g (0,09 mol) 7-ACA-t 450 ml 0,1 mólos 6,4 pH-ju foszfát-pufferben oldunk, majd hozzáadunk 15 g (0,18 mol) nátriumhidrogénkarbonátot. Ezután 9,5 g (0,09 mol) 2-merkapto-5-metil-1,3,4-oxadiazolt adunk az elegyhez és lassú keverés közben 60°±0,5°-ra melegítjük. Az elegy pH-ját 60° -on ellenőrizzük és további nátriumhidrogénkarbonát adagolásával a pH-t 6,4 értéken tartjuk. Az oldatot 4 órán át 60°±0,5°-on keverjük. Ezután hozzáadunk 18 g „Darko KB"-t és még 15 percig folytatjuk a keverést. Az elegyet melegen szűrjük és átlátszó oldatot nyerünk. 3 n sósav-oldattal a szűrlet pH-ját 4,5-re állítjuk. Miután az elegyet 1 órán át jégfürdőben 0°-on hűtöttük, a terméket szűrjük és hideg vízzel mossuk. Levegőn való szárítás után 5,1 g anyagot kapunk, op.:240° (bomlik). Analízis: CnH^^C^Sj-re számítva számított: C=40,23: H=3,70: N=17,06%: mért: C=39,60: H=4,18: N=15,85%, javítás: 0,7% H2 0 tartalom. Az infravörös és mágneses magrezonancia spektrumok megegyeznek a várt termék kémiai szerkezetével. 7-(I>a-Arrúno-a-fenilacetamido)-3--(5-metil-l,3,4-oxadiazol-2-il-tiometil)-cef-3-ém-4-karbonsav [(I) képletű vegyület] 5 6,25 g (0,023 mol) D-a-[(l-karbometoxipropen-2-il)-amino]-fenilecetsav-nátriumsó, 70 ml acetonitril és 2 csepp N,N-dimetilbenzilamin elegyével készített, jól kevert szuszpenziójához -10°-on 3 g (0,027 mol) klórhangyasav-etilésztert adunk és foly-10 tatjuk a keverést —10°-on 15 percig. Ezt követően 7,54 g (0,023 mol) 7-amino-3-(5-metil-l,3,4-oxadiazol-2-il-tiometil)-cef-3-ém-4-karbonsav 30 ml acetonitril, 330 ml víz és 3,4 ml (0,024 mol) trietilamin elegyével készített oldatát 0°-ra előhűtjük és az 15 egészet egyszerre keverés közben hozzáadjuk az előző elegyhez, majd folytatjuk a keverést 0°-on 30 percig. Az oldatot fölös mennyiségű nátriumkloriddal 15 percig telítjük, a szerves fázist elkülönítjük és 25 ml vizet adunk hozzá. A keletkezett 20 oldatot vákuumban 22°-on 35 ml-re töményítjük. Ehhez a vizes oldathoz hozzáadjuk 9 ml 90%-os hangyasav és 75 ml MIBK (metil-izobutil-keton) oldatát és az elegyet 30 percig keverjük. 4 g szilárd anyagot szűrünk le, melyet levegőn szárítunk. Ezt 25 az anyagot 35 ml víz és 5 ml 40%-os foszforsav elegyében felszuszpendáljuk és 15 percen át keverjük, majd szűrjük és a szűrletet 2 g „Darko KB" típusú aktívszénnel további 15 percen át keverjük, ismét szűrjük és végül nátriumhidrogénkarbonáttal 30 az oldat pH-ját 3,2-re állítjuk be. A kevés kristályos anyagot leszűrjük és félretesszük. A szűrletet enyhe körülmények között, vákuumban, 22°-on betöményítjük, ekkor gumiszerű szilárd anyag válik ki. Az elegyet 50°-ra melegítjük, miáltal a szilárd 35 anyag rohamosan kezd kristályosodni. Miután az elegyet lassan szobahőfokra hűtöttük, 1,24 g fehér kristályos anyagot kapunk, mely 165°-on bomlik. A 7 - [D-(a-amino-a-fenilacetamido)]-3-(5-metiI-40 1,3,4-oxadiazol-2-il-tiometil)-cef-3-ém-4-karbonsav (új vegyület) 5%-os nátriumhidrogénkarbonát-oldatban feloldva, majd táptalajjal hígítva a következő minimum inhibitor koncentrációkat (M.I.C.) mutatta mg/ml-ben a feltüntetett mikroorganizmusokkal 45 szemben, mely adatokat egy éjjelen át 37°-on történő inkubálás után határoztunk meg. Az eredményeket négy ismert vegyülettel összehasonlítva adjuk meg. 7-[D-(a-amino-a-fenilacetamido)]-3-5-metil-l,3,4-oxa-55 diazol-2-il-tiometil)-cef-3-ém-4-karbonsav-nátriumsó 7-[D-(a-amino-a-fenilacetamido)]-3-(5-metil-l,3,4--oxadiazol-2-il-tiometil)-3-cefém-4-karbonsav ikerionos alakjának vizes szuszpenziójához keverés közben 60 szobahőmérsékleten addig adagolunk normál nátrium: hidroxid-oldatot, míg éles oldatot nyerünk (pH: 10,8). Ezt az aldatot azonnal liofílizáljuk, és így nyers szilárd 7-[!>{a-arninc)-o-fenilacetamido)]-3-(5-metil-l,3,4-oxadiazol-2-il-tiometil)-cef-3-ém-4-karbonsav-nátriumsót 65 nyerünk. 4
