162872. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a 6-dezoxi-5-oxitetraciklin észtereinek előállítására

162872 rokonszerkezetű Doxycylin, azaz a-6-dezoxi-5--oxi-tetracdklin. A vegyületek tetraciklin-reziszitens törzsekkel szemben kifejtett hatását in vitro körülmények között vizsgáltuk; összehasonlító anyagként Doxycylint alkalmaztunk. Az 1. táblázatban a tetraciklin-rezisztens Staphylococcus aureus ATCC 12 715 törzsön meghatározott minimális gátló koncentráció-értékeket (MGK) közöljük. A „minimális gátló koncentráció" kifejezésen azt a legkisebb hatóanyagkoncentrációt értjük, amely a vizsgált mikroorganizmus kifejtődését in vitro körülmények között teljes mértékben meggátolja. 1. táblázat Vegyület MGK /xg/ml a!6-dezoxi-5-oxi-rtetraciklin , (Doxycylin) 20,0 a-6-dezoxi-5-acetiloxá-tetraciklin 5,0 10 15 20 zöljük. A kísérlethez 12 egérből álló állatcsoportokat használtunk fel. Az egereket imitraperitoneálisan gram-nagatív Salmonella abortivo equina baktériumtörzzsel megfertőztük, majd az állatoknak a megfertőzés után 4, 24,, 48 illetve 72 órával orálisan beadtuk a vizsgálandó antibiotikumot. 3. táblázat Pusztulás Vegyület Dózis «/„ PDM mg/kg Kontroll Doxycyclin a-6-dezoxi-5-formil-50 25 50 100 25 75 0 40 25 /S-S-dezoxi-S^aoetJiloxi^tetraciklin; 20,0 25 a-fr-dezoxi-ö-id^-klór-propionilj-oxirtetraciklán 5,0 A 2. táblázatban a Doxycyclinnel és az KZ-6- 30 -dezoxi-$-foamuloxi-tetracikldnnel végzett in vitro kísérletek, eredményeit közöljük. A kísérlethez 12 egérből álló állatcsoportokat használtunk fel. Az állatokat intraperitoneáiisan Staphylococcus aureus PV törzzsel fertőztük 35 meg, majd az állatoknak a megfertőzés után 4, 24, 48, illet 72 órával orálisan beadtuk a vizsgálandó antibiotikumot. A" táblázatban a PD50 érték az esetek 50%-ában védőhatást kifejtő dózisértéket jelenti. 4» 2. táblázat oxi-tetraciklin 25 50 Vegyület Pusztul;-; Dózis % a 1 * mg/kg nan >n A 4. táblázatban a Doxycyclin és az ar6-dezoxi-5-foirmiloxi-tetraciklin akut toxicitás-adatait közöljük. Az LD50 értékeket 10—10 egérből álló állatcsoportokon határoztuk ímeg, orális adagolás esetén, 4. táblázat LD50 Vegyület g/íteatsúly kg Határértékek Doxycyclin 2,140 2,09—2,20 a~6-de'f;oxi-5-formiloxi-tetraciklin 4,68 3,92—5,57 A ta iá irr, äny szerinti eljárást az oltalmi kör korlá'oxása nélkül az alábbi példákban részletesen ismertetjük. i. példa. Kontroll Doxycyclin Gt-6-dezoxi-5-fo!fi oxi-tetracikjir. 100 50 0 25 16 12,5 58 6,25 100 50 0 25 0 12,5 16 6,25 58 15 7,5 . táblázat adataiból megállapítható, hogy alrnány szerint előállított vegyület PDso-ércke a Doxycyclin PDi» értékének a fele. A 3. 'táblázatban a fenti két vegyülettel végzett további ín vivo kísérletek eredményeit kö-50 55 60 65 6-Dezoxi -5- formiloxi-^tatraciklin 30 mi vízmentes fluorhidrogénsavban 1,0 g a-6-dezoxi-5-hidroxi-*tetraciklin-hidrokloridot és 10 ml hangyasavat oldunk. A reakcióelegyet 115 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd fluorhidrogénsavat nitrogén árammal kiűzzük. Az oldatot 300 ml etiléterbe öntjük, és a kivált sárga szilárd terméket kiszűrjük, A szilárd terméket 1100 ml Mcllvain-pufferoldat (pH = 4,6), 480 ml metilizobutilketon, 480 ml etilacetát és 200 ml butanol elegyébŐl álló kétfázisú oldószerelegy alsó fázisában oldjuk. Az oldáshoz a lehető legkisebb mennyiségű oldószert használjuk fel. A bázist felszabadítjuk a souol, és az oldószerelegy felső fázisával háromszor extaaháljuk. Az oldószerelegy felső fa-