162764. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-amiono-cefalosporánsav-származékok előállítására
162764 9 10 kb. 10 ml térfogatra bepároljuk. 15 ml pentán hozzáadásával enyhén színezett nyers csapadékot kapunk. Ezt tovább tisztítjuk kromatográfiásan 10 g.szilikagélt tartalmazó oszlopon {0 = = 2 cm); az anyagot kevés acetonban oldjuk 5 és 0,5 g szilikagélen adszorbeáltatjuk. Ez,t az oszlopra töltjük, majd kloroform és aceton (2 : : 1) keverékével eluálunk. Az első 40 ml-es eluátum tartalmazza a 7-[di-(metoxikarbonil)^cetilamino]-3-(l-metil-tetrazol-5-Utio)-metücef- 10 -3-em-4-karbonsavat, melyet színtelen porként különíthetünk el. Az ultraibolya-spektrumban (0,1 m—nátriumbikarbonát-oldatban) kmax = = 256 m/t. Kitermelés: 67 mg. Vékonyréteg-kromatogram szilikagélen Rf52A = 0,26 (kiindulóanyag: 0,34), Rf10 i == 0,55, Rfiio = 0,39 (kiindulóanyag: 0,47), 5. példa: Aceton-szárazjég-fürdő isegítségével keverővel ellátott 200 ml-es szulfuraló lombikban kb. 6,5 g (0,064 mól) foszgént kondenzálunk. Ezután nitrogén-atmoszféra alatt és keverés közben —10°-on 5,45 g (0,035 mól) szilárd malonsavdimetilészter-imononátriumot adagolunk és 1/2 órán át —10°-on reagáltatjuk. A feleslegben levő foszgént szobahőmérsékleten elpárologtatjuk és a maradékot rövid evakuálás után 16 ml metilénkloridban oldjuk. Ezután 10,5 g (0,032 mól) 7-amino-3-(l^metil-tetrazol-5-iltio)-metil-cef-3-em-4-karbonsav és 8,95 ml (0,64 mól) trietilamin 70 ml dimetilformamidos oldatát —50°-on gyorsan hozzácsepegtetjük és 50 percig —10°-on keverjük. Ezt követően az oldószert először yízsugárszivattyús, majd nagyvákuumban elpárologtatjuk (a vízfürdő hőmérséklete 20°). Az olajos terméket azonnal felvesszük 100 ml 6,5 pH-jú foszfátpuffarrel és 100—100 ml etilacetáttal kétszer extraháljuk. A szerves fázisokat eldobjuk. A vizes fázisra 250 ml etilacetátot rétegzünk és jól keverve, 2 n sósav hozzáadásával 2,4 pH-ra állítjuk be. Az ennek során jelentkező barna csapadékot centiifugálással eltávolítjuk. Ezután a két fázist szétválasztjuk, a vizes fázist konyhasóval telítjük és 250—250 ml etilacetáttal még kétszer extraháljuk. A szerves kivonat-oldatokat egymás után 50—50 ml telített konyhasó-oldattal kétszer mossuk, nátriumszulfáttal szárítjuk és vákuumban szárazra pároljuk. A gyantás maradékot (6,45 g) 35 ml metanolban oldjuk és jégfürdőben hűtve 8,4 ml 3 mólos metanolos nétrium-«-etil-hexanoát-oldattal_ elegyítjük. 400 ml abszolút éter gyors hozzáadásával intenzív keverés közben a nátriumsót kicsapatjuk (4,8 g). A nátriumsó vizes oldatának pH-2,5-re való megsavanyításával és etilacetáttal végzett extrahálással visszanyerjük a savat (4,3 g). Ezt 8 ml acetonban oldjuk, 16 ml kloroformmal hígítjuk és 200 g-os szilikagél-oszlopon (magasság: átmérő = 8:1) kloroform/aceton 2:1 keverékével gyorsan kromatografáljuk. Az első 460 ml eluátum kis mennyiségű olajos szennyezéseket tartalmaz, az ezt követő 400 ml oldószerrel a 7-[di- (metoxikarbonil)-acetilamino] -3-i( 1 -metil-t etrazol-5-.iltio)-metil-cef-3-em-4-karbonsavat eluáljuik. Tiszta alakban etilacetátból kristályosítva kapjuk. Ultraibolya^spektrum: Amax = 253 m/*, £ = = 30 800 (0,1 mólos nátriumkarbonát-oldatban). Optikai forgatóképesség: íf a] 20 D = —7° ± 1° (0,1 mólos nátriumbikarbonát-oldatban). Vékonyréteg-kromátogramban szilikagélen: Rf52A=0,26 (brómacetil-7ACA = 0,40; 7-[di-(metoxilkarbonil)-aaetilamino]--cef alosporán = 0,34) Rfno =0,39 (brómacetil-7ACA = 0,52; 7-,[di-i(metoxikarbonil)-acetilamino]-cefalosporánsav = 0,47) Rfioi =0,55 (ceporin = 0,39) RfioiA = 0,42 (ceporin = 0,23) Rf az etilacetát-jégecet-rendszerben (9 :1) (15 25 cm futtatási szakasz) •= 0,25 (brómaeetil-7ACA-ra = 0,40). 15 20 30 6. példa: Aceton-szárazjég-fürdő segítségével keverővel ellátott 350 ml-es szulfuráló lombikban kb. 14 g (0,14 mól) foszgént kondenzálunk. Ezután nitrogén-atmoszférában és keverés közben 35 —10°-on 11,6 g (0,075 mól) szilárd malonsavdimetilészter-mononátriuimot adagolunk és 1/2 órán át —10°-on reagáltatjuk. A feleslegben levő foszgént szobahőmérsékleten elpárologtatjuk és a maradékot rövid evakuálás után 40 40 ml metilénkloridban oldjuk. Ezután 23,5 g (0,068 mól) 7-tamino-3-(2-metil-l,3,4-tiadiazol-5--iltio)-metiloef-3-em-4-karbonsav és 18,9 ml trietilamin 140 ml dimetilformamidos oldatát —50°-nál gyorsan hozzácsepegtetjük és 45 percig 45 —10°-on keverjük. Ezt követően az oldószert először vízsugárszivattyús, majd nagyvákuumban elpárologtatjuk (a vízfürdő hőmérséklete 20°). Az olajos terméket azonnal felvesszük 200 ml 6,5 pH-jú foszfát-pufferrel és 200—200 ml 50 etilacetáttal kétszer extraháljuk. A szerves fázisokat eldobjuk. A vizes fázisra 500 ml etilacetátot rétegezünk és erősen keverve, 2 n sósav hozzáadásával 2,4 pH-ra állítjuk be. Az ennek során jelentkező barna csapadékot centri-55 fugálással eltávolítjuk. Ezután a fázisokat szétválasztjuk, a vizes fázist konyhasóval telítjük és 500—500 ml etilaoetáttal még kétszer extraháljuk. A szerves kivonat-oldatokat 80—80 ml telített konyhasó-oldattal kétszer mossuk" egy-60 más után, nátriumszulfáttal szárítjuk és vákuumban szárazra pároljuk. A gyantás maradékot (10,85 g) 100 ml acetonban oldjuk és* intenzív keverés közben 14,1 ml 3 mólos metanolos nátrium-ű-etil-hexanoát-oldattal elegyítjük. 65 Ennek során a nátriumsó színes, nyers kristá-5
