162758. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-alfa-ciano- acilamino-cefalosporánsavszármazékok előállítására
162758 15 16 adunk, mire egy csapadék válik ki. Egy oran at 0'°-on állni hagyjuk, majd a csapadékot leszívatjuk, és először etilacetát-hexán (1:1) eleggyel, majd hexánnal mossuk. 3,66 g így nyert csapa-5 dékot acetonos oldatból 30 g szilikagélen adszorbeálunk. A száraz adszorbeátumot egy 400 g szilikagéllel töltött oszlopra (0 5,75 cm, h = 35 cm) visszük fel és kloroform-aceton (2:1) eleggyel eluáljuk. Az első 1,7 liter eluátumot el-10 öntjük, a következő 1,5 liter tartalmazza a reakcióterméket. Ezt vákuumban szárazra pároljuk, a maradékot kevés etilacetáitban felveszszük ós az oldatot bepárolva egy szolvatizált színtelen kristályos alakot nyerünk. Ezt a még 15 csak megközelítőleg tiszta anyagot 20-szoros mennyiségű metanolban szuszpendáljuk, 1,3 térfogatrész 3 m metanolos nátrium-a-etil-hexánoátoldat hozzáadásával oldatba visszük, és az oldatot vákuumban bepárolva kapjuk a kristályos 20 7-ciánacetilamino-3-(l ,3,4-tiadiazol-5-iltio) -metilcef-3-em-4-karbonsavat — (2,48 g) —. 1,5 liter etilacetáttal extraháljuk. A szerves fázisokat kétszer 20—20 ml pH 6,5 pufferrel visszaextraháljuk és elöntjük. Az egyesített vizes fázisra 2 liter etilacetátot rétegezünk, és intenzív keverés mellett a pH-t 4 n sóisavoldattal 2,5-re állítjuk. Az ekkor kivált barna csapadékot szűréssel eltávolítjuk. A fázisokat szétválasztjuk, a vizes oldatot konyhasóval telítjük, és először 1,5 liter, majd kétszer 1 liter etilacetáttal utánaextraháljuk. A szerves fázist kétszer 100—100 ml telített konyhasóoldattal mossuk, nátriumszulfát felett szárítjuk, majd vákuumban kb. 200 ml-re pároljuk be, miközben csapadék keletkezik. Ehhez erős keverés közben 200 ml hexánt adunk és 1 órán át hidegben tartjuk. Ezután leszívatjuk és a maradékot etilacetát-hexám (1:1) eleggyel mossuk. A szürletet elöntjük. A maradékot acetonos oldatból 30 g semleges szilikagélen adszorbeáljuk. A száraz adszorbeátumot egy 570 g semleges szilikagéllel töltött oszlopra visszük fel (0 =5,75 cm, h= 47 cm), és kloroform-aceton (2:1) rendszerrel eluáljuk. Az első két liter eluátumot elöntjük, a következő két liter tartalmazza a reakcióterméket. Ezt a két litert vákuumban szárazra pároljuk, majd kevés etilacetátban felvesszük. Így a savforma színtelen, erősen szolvatált kristályait kapjuk. Ezt 40 térfogatrész acetonban oldjuk, 10 térfogatrész metanolt adunk hozzá, és 1,3 térfogatrész 3 m metanolos nátrium-ct-etil-hexanoátoldat hozzáadásával, majd az oldatot lassan bepárolva a kristályos 7-ciánaceu tilamino-3-(2-metil-l,3,4-oxadiazol-5-iltio)-metilcef-3-em-4-karbonsav nátriumsóját — (4,45 g) — kapjuk. UV-spektrumban Imax — 268 nm (s = 10 500); (ct)20 D = — 57°+1° (c = 0,9 vízben). Szilikagélen végzett vékonyrétegkromatogramon Rf52A = 0,27, RfioiA = 0,38, RÍKBA = 0,65, etilacetát-jégecet (9:1) rendszerben Rf=0,18. 8. példa 6,4 g 7-ciánacetil-ammocefalosporánsav nátriumsó 140 ml pH 6,7 (10%-os) foszfátpufferes oldatában 2,7 g l,3,4-tiadiazolin-5-tiont szuszpendálunik. Ezután intenzív keverés közben 2 n nátriumkarbonátoldatot hozzáadva a pH-t 6,5-re állítjuk be, és nitrogénatmoszférában 6 órán át 60°-on melegítjük. Ezután az elegyet lehűtjük, és egymás után 750 és 500 ml etilacetáttal extraháljuk. A szerves fázisokat kétszer 30—30 ml pH 6,5 pufferrel visszamossuk, és eldobjuk. Az egyesített vizes fázisra 1 liter etilacetátot rétegezünk, és 4 n sósavoldat hozzáadásával intenzív kevertetés közben a pH-t 2,5 értékre állítjuk (kb. 15 ml-el). Az ekkor keletkezett barna csapadékot szűréssel eltávolítjuk. A fázisokat ezután szétválasztjuk, a vizes oldatot konyhasóval telítjük és 0,5 liter, majd még kétszer 250—250 ml etilacetáttal mossuk. A szerves fázisokat kétszer. 50—50 ml telített konyhasóoldattal extraháljuk, majd nátriumszulfát felett szárítjuk és vákuumban kb. 100 ml-re pároljuk be. Az oldathoz intenzív keverés mellett 100 ml hexánt UV-spektrumban Xmax = 270 nm (e = 13 150); (a )20 D = _i4°+i° (0 = 1,04 vízben). Szilikagélen végzett vőkonyrétegkromatográfiás vizsgálat során Rfr,2A = 0>31, RfioiA — 0,47, RÍKBA = 0,68, etilacetát-jégecet (9:1) rendszerben Rf = 0,21. 30 9. példa 12,8 g 7-ciánaoetiliamino-ce'falosporánisav nátriumsó 280 ml pH 6,7 (10'%-os) foszfátpufferes oldatában 5,8 g 5-merkapto-3-metil-l,2,4-triazolt 35 szuszpendálunk. Ezután 2 n nátriumkarbonátoldatot csepegtetve hozzá, intenzív keverés közben, a pH-t 6,8-re állítjuk és nitrogénatmoszférában 8 órán át 60°-on melegítjük. Ezután a reakcióelegyet lehűtjük, és háromszor 1,5 liter etilace-40 tattal extraháljuk. A szerves fázisokat kétszer 50—50 ml pH 6,5 pufferrel visszamossuk és elöntjük. Az egyesített vizes fázisra 2 liter etilacetátot rétegezünk, és intenzív keverés közben 4 n sósavoldattal (kb. 45 ml) pH 2,5-re állítjuk be. 45 Az ekkor keletkezett barna csapadékot szűréssel eltávolítjuk. A fázisokat elválasztjuk, a vizes fázist konyhasóval telítjük és 1,5, majd 1 liter etilacetáttal extraháljuk. A szerves fázisokat kétszer 100—100 ml telített konyhasóoldattal kiráz-50 zuk, majd nátriumszulfát felett szárítjuk és vákuumban 300 ml-re pároljuk be. Ehhez az oldathoz intenzív keverés közben 300 ml hexánt adunk, így egy csapadék válik ki. Félóráig 0°-on állni hagyjuk, a csapadékot leszívatjuk, és elő-55 szőr etilacetát-hexán (1:1) eleggyel, majd hexánnal mossuk. 5,9 g így nyert csapadékot acetonos oldatból 30 g szilikagélen adszorbeálunk. A száraz adszorbeátumot egy 470 g szilikagéllel töltött oszlopra (0 5,75 cm, h = 42 cm) visszük 60 fel, és először 6 liter kloroform-aceton (2:1) eleggyel eluáljuk, majd 3 liter etilacetát-aceton (1:1) eleggyel. Az első 6 liter eluátumot elöntjük, a következő három litert pedig, amely a reakcióterméket tartalmazza, vákuumban szá-65 rázra pároljuk, és a maradékot etilacetáttal el-10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3
