162292. lajstromszámú szabadalom • Eljárás proteolitikus enzimek előállítására
19 162292 20 A BPFA és BSX jelű tenyésztési közegeket mestersége* levegőztetésű szubmerz tenyésztéshez is használtuk, ezt egy 550 literes rozsdamentes acéltartályban valósítottuk meg. A félüzemi méretű tenyésztés körülményeit az alábbi V. táblázatban mutatjuk be. A táblázatban feltüntettük a? alkalmazott törzseket, a tenyésztés körülményeit és a kapót i eredményeket. V. táblázat Törzs C 324 I C 335 C 339 C 347 •— "• — •• •'"•- TM C 351 Közeg » ! BPFA BPFA BPFA BPFA BSX pH az inokuláció előtt 9,3 10,2 10,5 10,2 10,2 A tenyésztés hőmérséklete C'-ban 34 34 34 34 34 Levegő m'/perc 0,3 0,25 0,25 0,25 0,3 Tenyésztési Idő, óra 53 84 97 59 83 Végső pH-érték 8,3 9.2 9.1 8,9 9,35 Anson-egység/kg szubsztrátum-i egységben kifejezett végső j proteolitikus aktivitás. j 44 40 29 48 33 Lgy másik kísérleti üzemben más torzsekkel különböző összetételű közegekben végeztünk tenyésztéseket. A fenti méretű acéltartályban négy tenyésztést végeztünk a C 303-as törzzsel különböző körülmények között. 40 A tenyésztési közeg összetételét, a tenyésztés körülményeit és a kapott eredményeket a VI. táblázatban foglaljuk VI. táblázat Tenyésztés száma 1 2 3 4 Arpaliszt g/l 100 100 150 200 Szójababliszt g/l 30 30 45 60 Pluronic* ml/l 0,03 0,03 0,03 0,03 Na, C03 (steril körülmények között a közegbe adva az inokuláció előtt ) 0,2 M 0,2 M 0,2 M 0,4 M pH az inokuláció előti 10,0 10,0 10,35 10,1 Tenyésztési hőmérséklet C* 34 34 34 34 Levegő m'/perc 0,3 0,3 0,3 0,3 Tenyésztési idő, ó 125 104 113 126 Maximális pH 9,3 9,3 9,6 9,3 Maximális Ansoneqység/kg 67 80 77 66 *Etilénglikol és propílénglikol kopoltmerje A" proteolitikus enzimeket úgy tudjuk a folyékom tenyésztési közegből kinyerni, hogy a folyadékot centri fugálással elválasztjuk. Az így kapott folyadékból az enzimet Na2 S0 4 vagy etanol hozzáadásával kicsapjuk, a csapadékot a folyadéktól Kicselguhr szűrési segédanyaggal való szűréssel 10 70 75 elválasztjuk, végül a csapadékot megszárítjuk. Ilyen módcu aktív proteolitikus enzimet tartalmazó port kapunk. Az enzimek elkülönítését önmagában ismert módon végezzük. E kinyerési eljárásokat melyek a találmány oltalmi körének korlátozása nélkül csupán a találmány szerinti eljárás bemutatására szolgálnak - a VII. táblázatban ismertetjük.
