162292. lajstromszámú szabadalom • Eljárás proteolitikus enzimek előállítására

162292 I. táblázat folytatása Számjel Letéti szám A minta lelőhelye Dúsítási módszer C 373 10318 C 374 10319 C 375' 10320 C 376 10321 C 377 10322 C 378 10323 C 410 10324 C411 10325 C412 10326 C413 10327 Kerti föld egy dán városból Ascheberg-Í (Holstein) pázsit agyagja Szarvastrágya az állatkertből Elefánttrágya Viziló medencéjének vize Cserzőüzem meszezőfürdőjének kaparéka Tigris trágya Galambtrágya Baromfiudvar földje egy dán városból Ascheberg-i (Holstein) pázsit agyagja Perborát-agar Etiléndiamin-tetra ecetsavas nátriumot tartalmazó kazein nátrium-szeszkvikarbonát (pH 9,2—9,6) Nátrium-szeszkvikarbonát (pH 9,2—9,6) Meleg dúsítás NaOH-t tartalmazó keményítőn i Mannit-KNO, Meleg szeszkvikarbonát (50 C*. pH 9,8-9,7) Meleg szeszkvikarbonát (50 C*, pH 8,8-9,7) Tárolás burgonyaliszttel és nátrium- i szeszkvikarbonáttal Keményítő (pH 11) és szervetlen nitrogén forrás A Bacillus-nem fenti tagjainak rendszertani vizsgálatát Smith, Gordon és Clark monográfiája szerint végeztük ((Smith, Gordon and Clark: Aerobic Spore-forming Bacteria, U.S. Department of Agr., Monograph No. 16 (1952ÍJ. Jelenleg az e szerzők által leírt módszert tartják a legcélravezetőbbnek. E módszereket azonban módosítani kellett, mivel az I. táblázatban ismertetett Bacillus-fajok mind nagy pH-értékeknél tenyésznek, s így a tenyésztési közegeket nagyobb pH-ra kellett beállítani, mint amit a szerzők megadtak. A baktériumokat elég pontosan lehetett morfológiai osztályokba sorolni. E csoportok eléggé különböznek egymástól ahhoz, hogy különböző fajokat alkossanak. A morfológiai csoportokon belül különbözőek a biokémiai reakciók is. A biokémiai reakciók eltérése alapján a csoportokat különböző variánsokra osztottuk. Egy-egy variánsba több törzs tartozik. A tenyésztés nátrium-szeszkvikarbonáttal pH=9,7-re beállított tápagaron történik. /. faj (A Bergey-féle I. morfológiai csoportba tartozik; Bergey: „Manual of Determinative Bacteriology", 7. kiadás (1957), pp. 614-615). Morfológia: Vegetatív pálcák: 0,5 - 0,7 n x 1,5 - 4 M Spórák: 0,5 - 0,8 M X 0,8 - 1 M elhelyezkedés: középpontból -a pálca közelében : Alak: ovális - hengeres Leírás: vékony fallal körülvett Sporangia: a spórák duzzanatai: ha vannak nagyon kicsinyek „a" változat C 300, C 301, C 360, C 372, C 374 Gram-pozitív; pH 7,3-as agar-agar táptalajon tenyésztve a növekedés éppoly jó, vagy jobb, mint 9,7-es pH-ju agar-agaron. A növekedés maximális hőmérséklete: 50-55 C°. Csak nitrát nitrogén forrást tartalmazó 9,7-pH-jú glükóz vagy mannitagaron a baktériumok egyáltalán nem, vagy csak nagyon kevéssé növekednek. Keményítő- hidrolízis: pozitív, a hidrolízis 7 nap után csökken. „b" változat C 302, C 334 Gram-pozitív A növekedés az agar-agar táptalajon pH=7,3-nál az első két] 30 35 40 46 50 60 70 76 napon elég lassú, ezután az idő után azonban a 9,7 pH-ju agáron tapasztalható növekedéshez hasonló. A növekedés maximális hőmérséklete 40 -50 C°. Csak nitrát nitrogénforrást tartalmazó 9,7 pH-ju glükóz vagy mannitagaron a baktériumok egyáltalán nem, vagy csak nagyon kevéssé növekednek. Keményítő- hidrolizis: pozitív, széles hidroliziszóna. „c" változat C 323, C 339, C 352, C 369, Gram-pozitív, illetve változó gram-festhetőség. 7,3-as pH-ju agar-agar táptalajon kis vagy gyenge növekedés. A tenyésztés maximális hőmérséklete: 37-50 Cc. Csak nitrát nitrogénforrást tartalmazó 9,7-es pH-ju glükózvagy mannitagaron a baktériumok csak kevéssé vagy egyáltaí Ián nem növekednek. Keményítő- hidrolizis: pozitív, széles hidroliziszóna. „d" változat C304, C 311, C 336, Gram-pozitív pálcikák. 7,3-as pH-ju agar-agar táptalajon kis vagy hiányos növekedés. A tenyésztés maximális hőmérséklete: 37 C°. Csak nitrát nitrogénforrást tartalmazó 9,7-es pH-ju glukóz vagy mannitagaron a baktériumok csak kevéssé vagy egyáltalán nem növekednek. Keményítő- hidrolizis: negativ. //. sz. faj (A Bergey szerinti I. morfológiai csoporthozf: tartozik) C 335, C 341. Morfológia: Vegetatív pálcikák: 0,3 - 0,4m x 1,5 - 2,5M Spórák: . 0,3-0,5MX0,8-1;U , elhelyezkedés: centrális vagy körülbelül centrális Alak: ovális - hengeres Leírás: vékony fallal körülvett Sporangia: spórák duzzanatai. Ha vannak, nagyon kicsinyek Gram-pozitív 7,3-as pH-ju agar-agar táptalajon alig növekednek. Maximális növekedési hőmérséklet: 37 C°. Csak nitrát nitrogénforrást tartalmazó glukóz vagy man-, nitagaron egyáltalán nem vagy csak kevéssé növekednek. Keményítő- hidrolizis: negatív. ///. sz. faj Morfológia: Vegetatív pálcák: 0,6-0,7M X 1,5-3,5M a pálcák vége lekerekített 3