162171. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a szérum kalciumtartalom csökkentésére képes hormonszerű szer előállítására

162171 7 . • 8 A hatóanyagot tartalmazó szövetek az angolnában való megoszlása Szövet súly (mg) „, .. . _, .. . mE/fehőrje N E/szovet mE/szovet (V) a) a nyelőcső falához kötődött vena cava-t tartalmazó szövet b) sziyburokhártya a) + b) 170,3 107,7 239,6 1,6 6,6 9,6 9,4 61,5 40,1 5,9 26,5 38,7 az állat testsúly-kilogrammjára számítjuk, igen tekintélyes. Azt is megállapíthatjuk a táblázat adatai alapján, hogy pl. 2-4 angplna elegendő ahhoz, hogy a jelen találmány szerinti eljárással az egy sertéspajzsmirigyből kivonható thyrocalcitoninmennyiséggel egyenértékű calcitonin-aktivitásu hatóanyagot kapjunk. Szekréciós szövet mE/szövet mE/testsuly kg patkány sertés kutya baromfi pulyka vadkacsa ehető béka lazac cápa angolna pajzsmirigy pajzsmirigy pajzsmirigy ultimobranchiális mirigy ultimobranchiális mirigy ultimobranchiális mirigy ultimobranchiális mirigy ultimobrancihális mirigy ultimobranchiális mirigy szivburokhártya, továbbá a nyelőcső mellett levő, a nyelőcső falához kötődött vena cava-t magába foglaló szövet. Az angolna szekréciós szövetéből extrahált, a szérum-kalciumtartalmat csökkenteni képes hormonszerü anyag szérum-kalciumtartalom csökkentő hatásának mérését a fentebb emiitett mód- 45 szerrel végeztük. Az angolna valamely a szérum-kalciumtartalmat csökkenteni képes hormonszerü anyagot tartalmazó szekréciós szövetének 0,2 n sósavval való ejztrahálása utján kapott kivonatot nátriumhidroxid- 50 oldattal semlegesítjük- A kivonatot 0,1 n nátriumacetát-oldattal készített 1 %-os. albuminoldattal 1:2, 1:4, 1:6, 1:8, 1<10 és 1:29 arányban hígítjuk. E hígításokból 0,50-0,50 ml-t adunk intravénásán him patkányoknak. A beadástól számítva egy óra 55 múlva a patkányokat megöljük, a vérüket kifolyatjuk, és meghatározzuk a széruirnkalciumtartalmat az atom-abszorpciós spektrofotometriás módszerrel. Egy sertéspajzjmirigyből előállított standardkészítményből (melynek biológiai hatóértéke 8 MRC 60 E/mg. gyártja az Amour Pharm. Co.) 30, 60, 90, 15C, 180 és 240 mE/0,5 mltöménységühigitásokat készítünk. E hígításokból him patkányoknak 0,5-0,5 ml-t adunk intrpmusculárisan. A továbbiakban a fenti módon járunk el, és meghatározzuk a szé- 65 100-300 200-800 20000-40000 250-500 5000-20000 400-800 200-700 500-800 2200 450-900 4-10 3-9 0,4 1-2 1000-1500 100-200 500-1000 250-500 9550 39750 rum-kalciumtartalmat. A standard készítmény biológiai hatáserősségéhez való viszonyítása utján meghatározzuk az angolnából készített fenti kivonatban a szérum-kalciumtartalmat csökkenteni képes hormonszerü anyag hatáserősségét. Az e célra használandó angolnákat előnyösen tengervízben, vagy ahhoz hasonló összetételű konyhasőoldatban neveljük. Használhatunk tehát tengervizet vagy mesterséges tengervizet ill. konyhasós vizet. Az angolnák általában tengervízben és édesvízben egyaránt képesek élni. Az édesvízben fogott angolnáknál azonban fennáll annak a veszélye, hogy elpusztulnak, ha közvetlenül tengervízbe vagy a tengervízzel lényegében azonos sókoncentrációju vizes oldatba helyezzük őket. Előnyös tehát a tengervizet hígítani, illetőleg a konyhasóoldat töménységét ugy megválasztani, hogy a benne tartandó angolnák életben maradjanak. Az angolnákat eszerint célszerű a tengervíz konyhasókoncentrációja 1/3 és 2/3 része közötti koncentrációjú oldatban nevelni. A szekréciós szövet mennyiségére vonatkoztatott calcitonin-hatáserősség gyorsabban növekszik, ha az angolnákat tengervízben vagy a tengervízhez 4